本文關(guān)鍵詞：醛酮還原酶家族1的C1亞型在膽管癌發(fā)生發(fā)展中作用及機(jī)制

  更多相關(guān)文章： AKR1C1 QBC939細(xì)胞 增殖 細(xì)胞周期 凋亡

【摘要】：研究目的近年來(lái),關(guān)于腫瘤代謝相關(guān)蛋白的研究越來(lái)越多,通過(guò)研究發(fā)現(xiàn),這些代謝酶與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移相關(guān),且許多代謝蛋白已用作腫瘤診斷的標(biāo)記物及治療的靶點(diǎn)。消化系腫瘤膽管癌是指源于主要肝管和肝外膽管的癌,約占腫瘤發(fā)生率的3%。目前,膽管癌的研究已成為熱門,雖然有很多學(xué)說(shuō)來(lái)解釋說(shuō)明其發(fā)病機(jī)制,但都并不全面和清楚,所以,繼續(xù)深入研究膽管癌的發(fā)生機(jī)制,有可能為膽管癌的發(fā)生、發(fā)展、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移提供新思路,為非手術(shù)治療提供新的突破口。醛酮還原酶(Aldo-keto reductases AKRs)是參與氧化還原反應(yīng)的三大酶類超家族之一,廣泛地分布于原核生物和真核生物。AKRs以煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(triphosphopyridine nucleotide NADPH)為輔酶,參與氧化還原反應(yīng)。本文旨在研究AKR1C1(Aldo-keto reductase family 1 member C1)在膽管癌中的表達(dá),并初步探討其在膽管癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中的作用。研究方法采用消化系腫瘤組織芯片和免疫組化分析方法,檢測(cè)不同腫瘤患者癌組織及癌旁正常組織AKR1C1的表達(dá);實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)各腫瘤細(xì)胞株AKR1C1的表達(dá),蛋白免疫印跡western blot檢測(cè)各腫瘤細(xì)胞株及10例膽管癌病人腫瘤組織、癌旁正常組織AKR1C1的表達(dá);在膽管癌細(xì)胞株QBC939中感染沉默AKR1C1的病毒質(zhì)粒及空質(zhì)粒,CCK-8(Cell Counting Kit-8)比色法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖。劃痕實(shí)驗(yàn)和transwell檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的遷移情況;流式細(xì)胞術(shù)技術(shù)檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組QBC939細(xì)胞的周期阻滯和凋亡情況;RT-PCR和Western-blot方法分別檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組QBC939細(xì)胞survivin、Bcl-2、Bax、caspase-3、β-catenin和E-cadherin的m RNA和蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:腫瘤組織芯片和免疫組化結(jié)果顯示,與正常組織相比,膽管癌組織中AKR1C1呈高表達(dá);western blot驗(yàn)證10例膽管癌患者腫瘤組織及癌旁正常組織AKR1C1表達(dá),確定在AKR1C1在腫瘤組織中呈高表達(dá);實(shí)時(shí)熒光定量PCR和western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)膽管癌細(xì)胞株QBC939高表達(dá)AKR1C1;CCK-8比色法檢測(cè)感染沉默AKR1C1的病毒質(zhì)粒組與空質(zhì)粒對(duì)照組細(xì)胞增,沉默組細(xì)胞的增殖受到明顯抑制,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);流式細(xì)胞術(shù)技術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示,感染沉默AKR1C1的病毒質(zhì)粒組出現(xiàn)細(xì)胞周期阻滯,凋亡增加;同時(shí),RT-PCR和Western-blot方法分別檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組QBC939細(xì)胞survivin、Bcl-2、Bax、caspase-3、β-catenin和E-cadherin的m RNA和蛋白表達(dá)發(fā)現(xiàn),survivin、caspase-3和E-cadherin變化有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。證明了AKR1C1與膽管癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移有關(guān),但具體通路仍然不能解釋清楚,需要后續(xù)實(shí)驗(yàn)繼續(xù)研究驗(yàn)證。結(jié)論:AKR1C1在膽管腫瘤組織與肝外膽管癌細(xì)胞株QBC939中高表達(dá),其與膽管癌細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移均相關(guān),可能是其參與或間接參與了癌細(xì)胞的生長(zhǎng)周期、凋亡及轉(zhuǎn)移相關(guān)途徑,為膽管癌的相關(guān)研究提供了新的思路和方向。
【關(guān)鍵詞】：AKR1C1 QBC939細(xì)胞 增殖 細(xì)胞周期 凋亡
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.8
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮略詞表9-11
• 前 言11-14
• 第一部分 AKR1C1在消化系統(tǒng)各腫瘤的表達(dá)及膽管癌組織、細(xì)胞驗(yàn)證14-33
• 一、材料與方法14-26
• 二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-31
• 三、討 論31-33
• 第二部分 沉默膽管癌細(xì)胞株QBC939中AKR1C1基因，檢測(cè)細(xì)胞的增殖、凋亡及遷移33-44
• 一、材料與方法33-39
• 二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果39-43
• 三、討 論43-44
• 第三部分 在膽管癌細(xì)胞株QBC939中沉默基因AKR1C1后，細(xì)胞的增殖、凋亡及遷移的相關(guān)基因表達(dá)研究44-49
• 一、材料與方法45-46
• 二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果46-47
• 三、討 論47-49
• 參考文獻(xiàn)49-54
• 綜述54-60
• 參考文獻(xiàn)57-60
• 致謝60

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 ;Influence of survivin and caspase-3 on cell apoptosis and prognosis in gastric carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2004年13期

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本文編號(hào)：883515