本文關(guān)鍵詞：觀察LETM1蛋白在結(jié)腸癌細(xì)胞對(duì)化療藥物敏感性的影響機(jī)制及相關(guān)研究

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【摘要】：目的：探討奧沙利鉑耐藥細(xì)胞株-HCT116產(chǎn)生的耐藥機(jī)制,觀察LETM1蛋白水平變化對(duì)其影響。方法：結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT116和奧沙利鉑耐藥細(xì)胞株HCT116-OxR的傳代培養(yǎng)；噻唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)奧沙利鉑對(duì)細(xì)胞存活和死亡情況,并繪制生長(zhǎng)曲線,篩選藥物濃度；利用熒光素酶檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞和線粒體內(nèi)ATP的含量；Western-blot法檢測(cè)HCT116和HCT116-OxR細(xì)胞中LETM1蛋白和糖酵解相關(guān)蛋白的表達(dá)變化；葡萄糖和乳酸檢測(cè)試劑盒檢測(cè)兩種細(xì)胞內(nèi)的葡萄糖和乳酸含量；通過(guò)線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒測(cè)定線粒體耗氧量?jī)煞N細(xì)胞的耗氧量的相對(duì)值。結(jié)果：比較HCT116-OxR和HCT116細(xì)胞株,發(fā)現(xiàn)HCT116-OxR細(xì)胞線粒體耗氧量降低、線粒體ATP含量減少,而胞漿內(nèi)ATP含量相對(duì)增加；(2)比較HCT116-OxR和HCT116細(xì)胞株,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液葡頭糖含量減少,相反乳酸含量增加；(3)在HCT116-OxR細(xì)胞株內(nèi)HIF-1α、Glu-1、HK-2及LETMl蛋白表達(dá)水平升高,利用3-BrPA抑制糖酵解,則逆轉(zhuǎn)HCT116-OxR細(xì)胞株內(nèi)HIF-1α、Glu-1、HK-2及LETM1蛋白的表；(4)利用3-BrPA抑制糖酵解,增加了HCT116-OxR對(duì)奧沙利鉑的敏感性。結(jié)論：1.HCT116-OxR細(xì)胞株通過(guò)抑制線粒體功能、增加糖酵解途徑產(chǎn)生ATP,導(dǎo)致對(duì)奧沙利鉑的耐藥；2.細(xì)胞漿內(nèi)ATP含量是結(jié)腸癌細(xì)胞引起奧沙利鉑耐藥的關(guān)鍵原因；3.結(jié)腸癌細(xì)胞對(duì)化療藥物耐藥機(jī)制,可能是通過(guò)增加LETM1蛋白表達(dá)的水平,從而抑制線粒體功能,增加胞漿內(nèi)ATP含量而引起。
【關(guān)鍵詞】：LETM1蛋白 結(jié)腸癌 化療敏感
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.35
【目錄】：

• 摘要6-7
• ABSTRACT7-8
• 縮略詞8-10
• 第一章 前言10-12
• 第二章 材料與方法12-16
• 2.1 材料12
• 2.1.1 研究對(duì)象12
• 2.1.2 主要試劑12
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法12-15
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理15-16
• 第三章 結(jié)果16-21
• 3.1 HCT116和HCT116-OXR細(xì)胞的耐藥性16-17
• 3.2 線粒體的代謝變化17-18
• 3.3 糖酵解過(guò)程的變化18-19
• 3.4 LETM1增強(qiáng)了耐受細(xì)胞的化療敏感性19-20
• 3.5 3-BRPA增強(qiáng)了耐受細(xì)胞的化療敏感性20-21
• 第四章 討論21-23
• 第五章 結(jié)論23-24
• 參考文獻(xiàn)24-28
• 綜述28-43
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 致謝43

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