本文關(guān)鍵詞：sTRAIL及TRAIL受體在DNT細(xì)胞抑制胰腺癌細(xì)胞中的作用及意義

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【摘要】：【目的】本課題組前期研究表明雙陰性T細(xì)胞(DNT)細(xì)胞對(duì)胰腺癌細(xì)胞有抑制作用,本研究旨在探討可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(s TRAIL)結(jié)合其受體TRAIL-R1、TRAIL-R2在DNT細(xì)胞殺傷胰腺癌細(xì)胞中的作用及意義�！痉椒ā坎捎每贵w吸附法培養(yǎng)從健康志愿者外周血中分離的DNT細(xì)胞,3-4天換液一次,第12天收獲細(xì)胞。ELISA法檢測(cè)體外擴(kuò)增的過(guò)夜培養(yǎng)的DNT細(xì)胞上清液中的s TRAIL水平。采用q PCR、Western blot法分別從基因和蛋白水平檢測(cè)TRAIL-R1、TRAIL-R2在6株胰腺癌細(xì)胞中的表達(dá)水平,免疫組織化學(xué)法檢測(cè)48例來(lái)自安徽醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院普外科手術(shù)治療的胰腺癌組織及相應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本中TRAIL-R1、TRAIL-R2的表達(dá)情況,并分析兩種受體與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系�！窘Y(jié)果】體外培養(yǎng)DNT細(xì)胞隨著時(shí)間的推移數(shù)目逐漸增多,在第12天左右達(dá)到峰值。ELISA法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組DNT細(xì)胞培養(yǎng)液中s TRAIL與對(duì)照組未含DNT細(xì)胞培養(yǎng)液相比濃度明顯升高(t=27.24,P0.05)。QPCR檢測(cè)在6株胰腺癌細(xì)結(jié)果顯示TRAIL-R1 m RNA在SW1990、PANC-1、BXPC-3、MIA Pa Ca-2、CFPAC-1和Capan-1的相對(duì)表達(dá)量分別為0.807、1、0.423、0.662、1.470和1.418;TRAIL-R2m RNA在6株細(xì)胞中相對(duì)表達(dá)量低依次為0.744(SW1990)、1(PANC-1)、0.999(BXPC-3)、0.658(MIA Pa Ca-2)、1.949(CFPAC-1)和1.077(Capan-1)。Western blot法檢測(cè)TRAIL-R1受體表達(dá)發(fā)現(xiàn)胰腺癌細(xì)胞系CFPAC-1表達(dá)最高,與之在同一水平上還有Capan-1細(xì)胞,在PANC-1和BXPC-3中較高,而SW1990、MIAPa Ca-2細(xì)胞系中表達(dá)非常低甚至不表達(dá);檢測(cè)TRAIL-R2發(fā)現(xiàn)了同樣的趨勢(shì),但其中TRAIL-R2在BXPC-3中未見(jiàn)明顯表達(dá)。免疫組化發(fā)現(xiàn)TRAIL-R1在胰腺癌組及癌旁組的陽(yáng)性表達(dá)率分別為48%,75%(c2=7.43,P0.05);分析染色的強(qiáng)度胰腺癌組(23%)低于相應(yīng)的癌旁組織中的陽(yáng)性表達(dá)率(58%)(c2=12.48,P0.05);進(jìn)一步分析臨床病理資料提示TRAIL-R1的表達(dá)與胰腺癌的分化程度(c2=8.60,P0.05)及T分級(jí)之間相關(guān)(c2=7.26,P0.05)即分化程度越低、T分級(jí)越晚TRAIL-R1表達(dá)水平越高。另外,我們?cè)诜治鯰RAIL-R2發(fā)現(xiàn),其在胰腺癌組織中染色強(qiáng)度中強(qiáng)陽(yáng)性率低于相應(yīng)的癌旁組織(17%,35%,c2=4.38,P0.05),胰腺癌分化程度越低,腫瘤組織中的TRAIL-R2越低(c2=7.704,P0.05)�！窘Y(jié)論】外周血來(lái)源的DNT細(xì)胞可分泌s TRAIL,s TRAIL可與胰腺癌細(xì)胞和組織所表達(dá)的TRAIL受體結(jié)合誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,可能是DNT細(xì)胞抑制胰腺癌細(xì)胞增殖的機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】：胰腺癌 DNT細(xì)胞 TRAIL-R1 TRAIL-R2
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.9
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本文編號(hào)：868064