本文關(guān)鍵詞：1-甲基乙內(nèi)酰脲及順鉑對(duì)SGC-7901細(xì)胞增殖侵襲遷移的研究

  更多相關(guān)文章： 1-甲基乙內(nèi)酰脲 胃癌 增殖 侵襲 轉(zhuǎn)移

【摘要】：目的:探討1-甲基乙內(nèi)酰脲及順鉑對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC-7901細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響及機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1、MTT法:檢測(cè)藥物對(duì)SGC-7901細(xì)胞增殖的抑制效果,分別設(shè)四個(gè)組:即對(duì)照組(等體積PBS溶液)、1-甲基乙內(nèi)酰脲(M組)、順鉑(DDP)、1-甲基乙內(nèi)酰脲(M)與順鉑(DDP)聯(lián)合組。通過予以1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合用藥及不同濃度的處理,檢測(cè)24h、48h、72h后藥物對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖的抑制作用。2、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn):檢測(cè)1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合用藥對(duì)SGC-7901細(xì)胞遷移能力的影響;3、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn):檢測(cè)1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合用藥對(duì)SGC-7901細(xì)胞侵襲能力的影響。4、RT-PCR實(shí)驗(yàn):檢測(cè)1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合用藥對(duì)SGC-7901細(xì)胞中MMP9、CD44V6 m RNA表達(dá)影響。5、Western-blotting檢測(cè):1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑、和兩者聯(lián)合用藥對(duì)SGC-7901細(xì)胞MMP9、CD44V6蛋白質(zhì)表達(dá)的影響。結(jié)果:1.MTT分析法檢測(cè)結(jié)果顯示:①1-甲基乙內(nèi)酰脲和順鉑在0.5-80 umol/L的濃度范圍內(nèi)均能抑制SGC-7901細(xì)胞的增殖,其抑制率呈時(shí)間、濃度依賴關(guān)系,隨著濃度或作用時(shí)間的增加抑制率增加。②1-甲基乙內(nèi)酰脲單獨(dú)作用時(shí),與對(duì)照組相比,各處理組均能抑制SGC-7901細(xì)胞增殖,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。③順鉑單獨(dú)作用時(shí),與對(duì)照組相比,各處理組均顯著性抑制SGC-7901細(xì)胞增殖,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。④1-甲基乙內(nèi)酰脲與順鉑聯(lián)合作用,同等濃度下對(duì)SGC-7901細(xì)胞增殖的抑制作用明顯優(yōu)于二者單獨(dú)作用,具有顯著性差異(p0.01)。2.劃痕實(shí)驗(yàn)24h后觀察結(jié)果表明:1-甲基乙內(nèi)酰脲及順鉑處理的SGC-7901細(xì)胞,對(duì)照組修復(fù)的要比實(shí)驗(yàn)組多,寬度變小,實(shí)驗(yàn)組的傷痕寬度變化小。在48h后,對(duì)照組的劃痕變窄,幾乎處于愈合,而實(shí)驗(yàn)組的劃痕變化比對(duì)照組小,且兩者聯(lián)合作用時(shí)效果更佳。各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差異具有顯著性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:用藥后腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力減弱,結(jié)果提示:1-甲基乙內(nèi)酰脲和順鉑能抑制細(xì)胞遷移,3.Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與對(duì)照組相比,使用1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑和兩藥聯(lián)合均能抑制SGC-7901細(xì)胞的侵襲,且兩藥聯(lián)合對(duì)抑制SGC-7901細(xì)胞的侵襲效果最佳。4.RT-PCR實(shí)驗(yàn):結(jié)果顯示,MMP9、CD44V6m RNA在SGC-7901細(xì)胞中均有表達(dá)。用1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合處理后,SGC-7901細(xì)胞中MMP9、CD44V6 m RNA表達(dá)降低。5.Western-blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑、兩者聯(lián)合用藥處理細(xì)胞后,MMP9、CD44V6蛋白表達(dá)下調(diào),且1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑兩者聯(lián)合用藥效果最佳,MMP9、CD44V6蛋白表達(dá)下調(diào)最明顯。結(jié)論:1.1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑均可抑制人SGC7901細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖。聯(lián)合應(yīng)用抑制作用增強(qiáng),呈現(xiàn)協(xié)同作用;2、1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑可抑制人SGC7901細(xì)胞的侵襲與遷移,聯(lián)合用藥抑制作用增強(qiáng),MMP-9蛋白和CD44V6蛋白表達(dá)降低。
【關(guān)鍵詞】：1-甲基乙內(nèi)酰脲 胃癌 增殖 侵襲 轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-12
• 第1章 前言12-16
• 第2章 材料和儀器16-20
• 2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞16
• 2.2 實(shí)驗(yàn)儀器、設(shè)備16-17
• 2.3 實(shí)驗(yàn)試劑17-18
• 2.4 試劑的配制18-20
• 第3章 實(shí)驗(yàn)方法20-26
• 3.1 細(xì)胞復(fù)蘇及培養(yǎng)20
• 3.2 MTT法20-21
• 3.3 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)21
• 3.4 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)21-22
• 3.5 PT-PCR22-24
• 3.6 WesternBlot24-25
• 3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理25-26
• 第4章 結(jié)果26-38
• 4.1 MTT比色法檢測(cè)26-30
• 4.2 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè) 1-甲基乙內(nèi)酰脲及順鉑對(duì)人SGC-7901細(xì)胞遷移的影響30-31
• 4.3 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè) 1-甲基乙內(nèi)酰脲及順鉑對(duì)SGC-7901細(xì)胞侵襲的影響31-32
• 4.4 RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-35
• 4.5 WesternBlot. 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SGC-7901細(xì)胞MMP-9\CD44V6蛋白表達(dá)的影響35-38
• 第5章 討論38-42
• 第6章 結(jié)論42-44
• 綜述44-48
• 參考文獻(xiàn)48-54
• 在讀期間發(fā)表的論文54-56
• 致謝56

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 楊靜;景在平;;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在胃癌中作用的研究進(jìn)展[J];中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2011年33期

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本文編號(hào)：858843