本文關鍵詞：1-甲基乙內酰脲及順鉑對SGC-7901細胞增殖侵襲遷移的研究

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【摘要】：目的:探討1-甲基乙內酰脲及順鉑對人胃癌細胞SGC-7901細胞增殖、遷移和侵襲的影響及機制,為臨床應用提供實驗依據。方法:1、MTT法:檢測藥物對SGC-7901細胞增殖的抑制效果,分別設四個組:即對照組(等體積PBS溶液)、1-甲基乙內酰脲(M組)、順鉑(DDP)、1-甲基乙內酰脲(M)與順鉑(DDP)聯(lián)合組。通過予以1-甲基乙內酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合用藥及不同濃度的處理,檢測24h、48h、72h后藥物對胃癌SGC-7901細胞增殖的抑制作用。2、細胞劃痕實驗:檢測1-甲基乙內酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合用藥對SGC-7901細胞遷移能力的影響;3、Transwell侵襲實驗:檢測1-甲基乙內酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合用藥對SGC-7901細胞侵襲能力的影響。4、RT-PCR實驗:檢測1-甲基乙內酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合用藥對SGC-7901細胞中MMP9、CD44V6 m RNA表達影響。5、Western-blotting檢測:1-甲基乙內酰脲、順鉑、和兩者聯(lián)合用藥對SGC-7901細胞MMP9、CD44V6蛋白質表達的影響。結果:1.MTT分析法檢測結果顯示:①1-甲基乙內酰脲和順鉑在0.5-80 umol/L的濃度范圍內均能抑制SGC-7901細胞的增殖,其抑制率呈時間、濃度依賴關系,隨著濃度或作用時間的增加抑制率增加。②1-甲基乙內酰脲單獨作用時,與對照組相比,各處理組均能抑制SGC-7901細胞增殖,有統(tǒng)計學差異(P0.05)。③順鉑單獨作用時,與對照組相比,各處理組均顯著性抑制SGC-7901細胞增殖,有統(tǒng)計學差異(P0.05)。④1-甲基乙內酰脲與順鉑聯(lián)合作用,同等濃度下對SGC-7901細胞增殖的抑制作用明顯優(yōu)于二者單獨作用,具有顯著性差異(p0.01)。2.劃痕實驗24h后觀察結果表明:1-甲基乙內酰脲及順鉑處理的SGC-7901細胞,對照組修復的要比實驗組多,寬度變小,實驗組的傷痕寬度變化小。在48h后,對照組的劃痕變窄,幾乎處于愈合,而實驗組的劃痕變化比對照組小,且兩者聯(lián)合作用時效果更佳。各實驗組與對照組差異具有顯著性。實驗結果顯示:用藥后腫瘤細胞的運動能力減弱,結果提示:1-甲基乙內酰脲和順鉑能抑制細胞遷移,3.Transwell侵襲實驗結果表明:與對照組相比,使用1-甲基乙內酰脲、順鉑和兩藥聯(lián)合均能抑制SGC-7901細胞的侵襲,且兩藥聯(lián)合對抑制SGC-7901細胞的侵襲效果最佳。4.RT-PCR實驗:結果顯示,MMP9、CD44V6m RNA在SGC-7901細胞中均有表達。用1-甲基乙內酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合處理后,SGC-7901細胞中MMP9、CD44V6 m RNA表達降低。5.Western-blotting實驗結果顯示:與對照組相比,1-甲基乙內酰脲、順鉑、兩者聯(lián)合用藥處理細胞后,MMP9、CD44V6蛋白表達下調,且1-甲基乙內酰脲、順鉑兩者聯(lián)合用藥效果最佳,MMP9、CD44V6蛋白表達下調最明顯。結論:1.1-甲基乙內酰脲、順鉑均可抑制人SGC7901細胞的生長增殖。聯(lián)合應用抑制作用增強,呈現協(xié)同作用;2、1-甲基乙內酰脲、順鉑可抑制人SGC7901細胞的侵襲與遷移,聯(lián)合用藥抑制作用增強,MMP-9蛋白和CD44V6蛋白表達降低。
【關鍵詞】：1-甲基乙內酰脲 胃癌 增殖 侵襲 轉移
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-12
• 第1章 前言12-16
• 第2章 材料和儀器16-20
• 2.1 實驗細胞16
• 2.2 實驗儀器、設備16-17
• 2.3 實驗試劑17-18
• 2.4 試劑的配制18-20
• 第3章 實驗方法20-26
• 3.1 細胞復蘇及培養(yǎng)20
• 3.2 MTT法20-21
• 3.3 細胞劃痕實驗21
• 3.4 細胞侵襲實驗21-22
• 3.5 PT-PCR22-24
• 3.6 WesternBlot24-25
• 3.7 統(tǒng)計學處理25-26
• 第4章 結果26-38
• 4.1 MTT比色法檢測26-30
• 4.2 劃痕實驗檢測 1-甲基乙內酰脲及順鉑對人SGC-7901細胞遷移的影響30-31
• 4.3 Transwell侵襲實驗檢測 1-甲基乙內酰脲及順鉑對SGC-7901細胞侵襲的影響31-32
• 4.4 RT-PCR實驗結果32-35
• 4.5 WesternBlot. 實驗檢測SGC-7901細胞MMP-9\CD44V6蛋白表達的影響35-38
• 第5章 討論38-42
• 第6章 結論42-44
• 綜述44-48
• 參考文獻48-54
• 在讀期間發(fā)表的論文54-56
• 致謝56

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 楊靜;景在平;;血管內皮生長因子在胃癌中作用的研究進展[J];中國醫(yī)藥導報;2011年33期

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本文編號：858843