本文關(guān)鍵詞：Pirh2、p53在不同轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)及意義

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【摘要】：Pirh2是最近發(fā)現(xiàn)的泛素連接酶E3家族的新成員,具有內(nèi)在“泛素化”活性的RING-H2結(jié)構(gòu)域;p53是迄今發(fā)現(xiàn)與人類惡性腫瘤相關(guān)性最高的一種抑癌基因。已有研究表明,Pirh2能夠促進(jìn)p53泛素化,導(dǎo)致其降解,從而參與癌癥進(jìn)展。而癌癥的發(fā)展、轉(zhuǎn)移過程與癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)�！灸康摹勘緦�(shí)驗(yàn)旨在探討Pirh2、p53在不同轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)及意義,并以正常乳腺上皮細(xì)胞系作為對照,以期證明Pirh2、p53與乳腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的相關(guān)性,為乳腺癌的診治過程尋找新的分子機(jī)制及治療靶點(diǎn)提供初步理論依據(jù)。【方法】傳代培養(yǎng)正常乳腺上皮細(xì)胞系MCF-10A、低轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細(xì)胞系MCF-7、中轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231、高轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-435s;應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q PCR)及蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western blot)方法分別檢測Pirh2、p53 m RNA及蛋白在正常乳腺上皮細(xì)胞系及不同轉(zhuǎn)移潛能的乳腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)情況。【結(jié)果】1.Pirh2、p53在正常乳腺上皮細(xì)胞系MCF-10A及低轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細(xì)胞系MCF-7、中轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231、高轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-435s中均有表達(dá)。2.Pirh2在乳腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)高于正常乳腺上皮細(xì)胞系,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),p53在乳腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)低于正常乳腺上皮細(xì)胞系,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.隨著乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移潛能的升高,Pirh2的表達(dá)水平呈上升趨勢,組間兩兩比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);p53的表達(dá)水平呈下降趨勢,組間兩兩比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.Pirh2、p53二者的表達(dá)水平變化呈顯著負(fù)相關(guān)(rm RNA=-0.904,Pm RNA0.01;r蛋白=-0.953,P蛋白0.01)�！窘Y(jié)論】1.Pirh2、p53的表達(dá)與乳腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力相關(guān),Pirh2在乳腺癌細(xì)胞系中高表達(dá),p53在乳腺癌細(xì)胞系中低表達(dá),并且隨著乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移潛能的增高,Pirh2表達(dá)水平上調(diào)、p53表達(dá)水平下降。2.Pirh2、p53的表達(dá)變化水平呈顯著負(fù)相關(guān),提示在乳腺癌細(xì)胞中可能存在Pirh2/p53信號通路,并且Pirh2負(fù)性調(diào)控p53。
【關(guān)鍵詞】：乳腺癌細(xì)胞系 Pirh2、p53 實(shí)時(shí)熒光定量PCR、蛋白質(zhì)免疫印跡法
【學(xué)位授予單位】：湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-11
• 前言11-14
• 1 實(shí)驗(yàn)材料與方法14-26
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料14-19
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法19-26
• 2 結(jié)果26-32
• 2.1 細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果26
• 2.2 qPCR檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性分析26-28
• 2.3 q PCR檢測Pirh2、p53 mRNA的表達(dá)結(jié)果分析28-30
• 2.4 Western blot檢測Pirh2、p53蛋白的表達(dá)結(jié)果分析30-31
• 2.5 Pirh2、p53表達(dá)變化水平的相關(guān)性分析31-32
• 3 討論32-36
• 4 結(jié)論36-37
• 結(jié)語37-38
• 參考文獻(xiàn)38-41
• 綜述41-54
• 參考文獻(xiàn)49-54
• 附錄 154-55
• 附錄 255-56
• 致謝56

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 唐偉東;陳鐘;章建國;沈愛國;陳澍周;;Pirh2對人肝細(xì)胞肝癌細(xì)胞增殖的影響[J];江蘇醫(yī)藥;2012年20期

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本文編號：838401