本文關(guān)鍵詞：氧化損傷對口腔鱗癌細(xì)胞scc-25生長與抑制的調(diào)控機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 過氧化氫 氧化應(yīng)激 口腔鱗癌細(xì)胞 炎癥 超螺旋敏感定量PCR(ss-qPCR)

【摘要】：目的外源性的氧化刺激作用下誘導(dǎo)口腔鱗癌細(xì)胞中mtDNA損傷、修復(fù)、拷貝數(shù)的動態(tài)變化過程;研究DNA損傷與細(xì)胞活性以及mtDNA損傷與核DNA損傷相關(guān)性的研究;探索口腔鱗癌的致病機(jī)理和防治方法。方法選用口腔鱗癌中發(fā)病率較高,惡性程度較強(qiáng)的口腔鱗狀細(xì)胞癌SCC-25細(xì)胞株為實(shí)驗?zāi)Ｐ?選用皮膚纖維原細(xì)胞株BJ作為對照實(shí)驗?zāi)Ｐ?以四個濃度H2O2(120μM-960μM),六個時間點(diǎn)(15min,1h,2h,24h,48h,72h)誘導(dǎo)細(xì)胞出現(xiàn)氧化損傷反應(yīng),通過ss-q PCR方法測定mtDNA損傷、修復(fù)和拷貝數(shù)降解的動態(tài)過程;MTT方法測定細(xì)胞活性與生長抑制;γH2AX方法測定細(xì)胞核DNA雙鏈斷裂情況;建星凝膠電泳實(shí)驗進(jìn)行口腔癌細(xì)胞核DNA單鏈及雙鏈斷裂情況。結(jié)果通過ss-qPCR方法檢測兩種細(xì)胞中mtDNA損傷,修復(fù)的動態(tài)變化發(fā)現(xiàn),SCC-25細(xì)胞,在低水平的氧化應(yīng)激作用下,會出現(xiàn)氧化損傷與修復(fù)的反應(yīng),拷貝數(shù)不會發(fā)生改變;高水平的刺激下,則形成不可逆的損傷,隨著時間一直持續(xù),拷貝數(shù)也顯著降低。對于正常細(xì)胞BJ而言,低水平的氧化刺激,并沒有引起細(xì)胞的損傷修復(fù)機(jī)制,隨著刺激水平的提高,才表現(xiàn)出損傷,及一定程度的修復(fù)功能。比較可見,癌細(xì)胞對氧化刺激更為敏感,反應(yīng)更為強(qiáng)烈。同時,兩種細(xì)胞的MTT實(shí)驗檢測,癌細(xì)胞的LC50濃度僅為對照細(xì)胞的0.5倍,這與癌細(xì)胞在受到較低濃度刺激時就表現(xiàn)出的氧化損傷相對應(yīng)。當(dāng)對癌細(xì)胞中核DNA進(jìn)行斷裂檢測發(fā)現(xiàn),氧化刺激下,同樣會引發(fā)核DNA的斷裂,而且兩種斷裂趨勢相同,說明mtDNA可以作為核DNA斷裂的一種敏感指示劑。結(jié)論我們通過新的技術(shù)手段,首次檢測出口腔癌在外源性刺激下的mtDNA損傷修復(fù)的動態(tài)變化過程。這樣的一個動態(tài)過程將為癌癥的早期診斷以及早期預(yù)防提供新的思路。同時,由外源性自由基誘發(fā)的口腔癌細(xì)胞與正常細(xì)胞之間的差異性反應(yīng),這也將為癌癥特異性的針對性治療提供新思路。通過流式細(xì)胞術(shù)及堿性凝膠電泳實(shí)驗實(shí)驗首次證明,mtDNA氧化損傷與核DNA氧化損傷具有相同的反應(yīng)趨勢,提示mtDNA可以作為核DNA氧化損傷的敏感指示劑。
【關(guān)鍵詞】：過氧化氫 氧化應(yīng)激 口腔鱗癌細(xì)胞 炎癥 超螺旋敏感定量PCR(ss-qPCR)
【學(xué)位授予單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.8
【目錄】：

• 中文論著摘要4-6
• 英文論著摘要6-8
• 英文縮略語8-9
• 前言9-12
• 實(shí)驗材料與方法12-18
• 實(shí)驗結(jié)果18-38
• 討論38-40
• 結(jié)論40-41
• 本研究創(chuàng)新性的自我評價41-42
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 附錄46-60
• 一、文獻(xiàn)綜述 氧化損傷在人類癌癥中的研究進(jìn)展46-57
• 參考文獻(xiàn)52-57
• 二、在學(xué)期間科研成績57-58
• 三、致謝58-59
• 四、個人簡介59-60

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1 萬學(xué)勤,李宏鳴,龍敏,張炳團(tuán),劉愛平;雞新城疫病毒對人類口腔鱗癌細(xì)胞的殺傷作用[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2004年04期

2 陳軍;趙建江;王治平;盤杰;黃宇華;;量子點(diǎn)對口腔鱗癌細(xì)胞活性的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2010年20期

3 王曉里;陳瑞梅;王植三;陳文磊;;口腔鱗癌細(xì)胞增殖特性的流式細(xì)胞光度分析[J];現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志;1989年01期

4 金曉明,李金榮,李雅馨,李祖兵;外源性轉(zhuǎn)化生長因子β1對口腔鱗癌細(xì)胞中相關(guān)基因表達(dá)的影響[J];實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2003年06期

5 孫毅;尚政軍;;內(nèi)皮前體細(xì)胞與口腔鱗癌細(xì)胞自發(fā)性融合的實(shí)驗研究[J];中國美容醫(yī)學(xué);2013年15期

6 申俊;柏景坪;王維倩;顧亞軍;;組蛋白去乙酰化酶抑制劑與順鉑聯(lián)用激活線粒體信號通路誘導(dǎo)口腔鱗癌細(xì)胞的凋亡[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2011年02期

7 宿穎;葛麗華;苗聰聰;張敏;張辛燕;;三氧化二砷對口腔鱗癌細(xì)胞裸鼠移植瘤的抑制作用[J];北京口腔醫(yī)學(xué);2013年01期

8 黃曉君;葉茂昌;李容新;王來平;;姜黃素對口腔鱗癌細(xì)胞生長增殖及相關(guān)蛋白影響的實(shí)驗研究[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2007年02期

9 ;Possible Mechanism Responsible for Changes of β-dystroglycanin Oral Squamous Cell Carcinoma[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2006年01期

10 李德超;李善昌;關(guān)鍵;;口腔鱗癌細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)因子表達(dá)水平與其對順鉑敏感性的研究[J];臨床和實(shí)驗醫(yī)學(xué)雜志;2007年11期

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1 龐寶興;金曉明;尚偉;;姜黃素對口腔鱗癌細(xì)胞的增殖抑制作用及相關(guān)機(jī)制研究[A];第八次全國口腔頜面—頭頸腫瘤會議論文匯編[C];2009年

2 張志光;張謙;何一青;陳詩書;;細(xì)胞因子基因修飾人口腔鱗癌細(xì)胞的體外生物學(xué)行為[A];第一屆全國口腔頜面部腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

3 何地;陳萬濤;;藤黃酸對口腔鱗癌細(xì)胞體外作用的研究[A];第五次全國口腔頜面—頭頸腫瘤學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2006年

4 張壯;潘劍;李龍江;;高淋巴道轉(zhuǎn)移的口腔鱗癌細(xì)胞對淋巴管生成的影響[A];第五次全國口腔頜面—頭頸腫瘤學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2006年

5 羅清瓊;胡水清;陳福祥;;TLR3在口腔鱗癌細(xì)胞中作用的初步研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第九次全國檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實(shí)驗室管理學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

6 阮敏;季彤;楊雯君;張陳平;;紫草素誘導(dǎo)口腔鱗癌細(xì)胞Tca-8113凋亡及相關(guān)機(jī)制的的研究[A];海峽兩岸2008口腔癌診治與修復(fù)重建新進(jìn)展研討會論文集[C];2008年

7 李春陽;程斌;洪筠;楊靈瀾;葉萍;馮崇錦;;cdc25A-Fas嵌合基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會第六屆全國口腔黏膜病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2004年

8 張敏;張辛燕;;三氧化二砷和放療結(jié)合對口腔癌治療作用的體外研究[A];第七屆全國口腔黏膜病暨第五屆口腔中西醫(yī)結(jié)合大會論文匯編[C];2008年

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1 王莉莉;microRNA-188作用于靶基因SIX1負(fù)調(diào)控ERK信號通路抑制口腔鱗癌細(xì)胞的增殖侵襲[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2016年

2 柴娟;P12~(CDK2-AP1)與CD82相互作用對口腔鱗癌細(xì)胞OSCC-15及裸鼠移植瘤生長作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2016年

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7 石芳瓊;MICA基因修飾的口腔鱗癌細(xì)胞疫苗誘導(dǎo)抗腫瘤免疫應(yīng)答的實(shí)驗研究[D];中南大學(xué);2011年

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本文編號：831650