本文關(guān)鍵詞：胃癌組織中MIF和VEGF的表達及其臨床意義

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【摘要】：背景:胃癌(gastric carcinoma,GC)是消化系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一,發(fā)病率居所有消化系統(tǒng)惡性腫瘤之首。GC主要起源于胃粘膜上皮的惡性腫瘤,組織學(xué)上胃腺癌占95%。盡管近些年來國內(nèi)經(jīng)濟的發(fā)展和人民生活水平的不斷改善,但由于一些落后的生活方式及環(huán)境等各種因素的影響,胃癌的發(fā)病率越來越高,每年新產(chǎn)生胃癌患者約有2萬多人。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn),胃癌的發(fā)病有明顯的地域性差別,發(fā)病率較高的區(qū)域主要集中于日本、中國、智利、愛爾蘭等國家及地區(qū),較低的區(qū)域主要分布于北美、西歐、澳大利亞和新西蘭;在中國,東南部沿海地區(qū)和西北胃癌的發(fā)病率明顯較南方地區(qū)高;而我們豫東地區(qū)處于豫皖交接地區(qū),也是胃腸道腫瘤的高發(fā)地區(qū)之一,胃惡性腫瘤的發(fā)病率僅次于食管癌。目前對早期胃癌的確診主要依賴于胃鏡加胃粘膜活檢,胃鏡檢查加組織學(xué)檢測已成為胃癌診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。但是,胃鏡檢查高經(jīng)濟成本、患者依從性差,阻礙了該技術(shù)的推廣應(yīng)用;而胃癌的血清學(xué)標(biāo)志物,如血清癌胚抗原(CEA)、CA-199、CA50、CA125等雖在胃癌患者中均可升高,但其敏感性和特異性均不高,尤其對早期胃癌診斷的臨床價值更是有限。巨噬細胞移動抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)除具有促炎作用外,也可促進血管生成從而促進腫瘤的形成,并且MIF與多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。MIF在乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、肺癌、肝癌、胃癌等多種腫瘤中均呈高表達,而與其緊鄰的癌旁組織中無表達或表達降低,且MIF的表達水平與不同種類的腫瘤患者的生存期具有相關(guān)性,提示MIF可能與一些腫瘤的惡性演進過程有關(guān)。血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)亦可以在多種腫瘤組織中高表達,其主要通過促血管內(nèi)皮細胞分裂從而促進新生血管形成,進而增強血管通透性的功能。但有關(guān)MIF和VEGF在胃癌中的表達及臨床意義的研究目前報道較少。目的:本實驗旨在研究豫東地區(qū)胃癌組織中MIF、VEGF的表達及其臨床意義,探討其作為胃癌早期診斷、治療及評估預(yù)后的分子標(biāo)志物提供新的理論依據(jù)。方法:選取河南大學(xué)淮河醫(yī)院2008-2013年手術(shù)切除的89例胃癌組織和癌旁組織及2013年手術(shù)切除的新鮮胃癌及癌旁標(biāo)本4對,分別采用免疫組織化學(xué)法(Immunohistochemistry,IHC)、免疫蛋白印跡法及PCR技術(shù)分析MIF和VEGF在胃癌組織中的表達變化,并分析其表達水平與胃癌臨床病理特征之間的相關(guān)性。結(jié)果:免疫組化結(jié)果表明,MIF和VEGF在胃腺癌中的表達率分別為88.8%(79/89)和50.6%(45/89)。利用免疫蛋白印跡法檢測胃癌組織中MIF和VEFG蛋白表達,發(fā)現(xiàn)MIF和VEGF在胃腺癌組織中的表達量均顯著高于癌旁組織。半定量PCR檢測發(fā)現(xiàn),在腫瘤組織中MIF及VEGF的m RNA表達明顯高于癌旁組織(P0.05)。在不同年齡以及性別組之間MIF和VEGF表達水平未見顯著性差異,而MIF和VEGF表達水平與胃癌的分化程度以及TNM分期有明顯差異(P0.05)。結(jié)論:MIF和VEGF在胃腺癌中的表達明顯高于癌旁組織;MIF和VEGF聯(lián)合檢測可能是胃癌發(fā)展及預(yù)后評估的分子標(biāo)志物之一,可能參與了胃癌的惡性進展過程。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 MIF VEGF 免疫組化 PCR
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 1 前言11-15
• 2 實驗材料和方法15-25
• 2.1 實驗材料15-17
• 2.1.1 實驗對象15
• 2.1.2 主要試劑與實驗材料15-16
• 2.1.3 主要實驗儀器設(shè)備16-17
• 2.2 免疫組化實驗17-18
• 2.2.1 免疫組化實驗步驟17
• 2.2.2 MIF、VEGF結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)17-18
• 2.3 蛋白免疫印跡實驗18-22
• 2.3.1 胃癌及切緣組織標(biāo)本處理并提取蛋白18
• 2.3.2 BSA法測定各組織總蛋白濃度18-19
• 2.3.3 蛋白質(zhì)電泳19-22
• 2.4 RT-PCR法檢測胃癌組織及癌旁組織中MIF和VEGFmRNA的表達水平22-24
• 2.4.1 實驗材料22
• 2.4.2 實驗步驟22-24
• 2.5 統(tǒng)計學(xué)分析24-25
• 3 結(jié)果25-29
• 3.1 IHC檢測胃癌組織中MIF和VEGF表達25
• 3.2 Western blot檢測MIF和VEGF在胃癌組織中的蛋白表達25-26
• 3.3 RT-PCR法檢測胃癌及癌旁組織中MIF和VEGFmRNA的表達26
• 3.4 MIF和VEGF蛋白表達與臨床病理特征的關(guān)系26-29
• 討論29-33
• 結(jié)論33-35
• 參考文獻35-37
• 綜述37-45
• 參考文獻43-45
• 附錄45-47
• 致謝47-48

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