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GP73對肝細胞肝癌細胞系增殖和轉(zhuǎn)移的機制研究

發(fā)布時間:2017-09-06 21:48

  本文關(guān)鍵詞:GP73對肝細胞肝癌細胞系增殖和轉(zhuǎn)移的機制研究


  更多相關(guān)文章: 高爾基體磷酸化蛋白2 肝細胞肝癌 小干擾RNA 細胞增殖與轉(zhuǎn)移 腫瘤標(biāo)志物


【摘要】:目的高爾基體磷酸化蛋白2 (GOLPH2/GP73)是一種在肝癌細胞中高表達的高爾基體膜蛋白,作為一種精準(zhǔn)的腫瘤標(biāo)志物,被用于指示肝腫瘤的發(fā)病進程。雖已有報道指出GP73和肝癌增殖有相關(guān)性,但具體機制仍不清楚。本研究擬闡述GP73參與的肝細胞肝癌增殖及遷移和侵襲過程的具體調(diào)控機制。方法1.利用GP73特異性siRNA沉默HepG2、SMMC-7721以及Huh7細胞系的GP73基因表達。2.采用MTS、軟瓊脂克隆實驗對三種肝細胞腫瘤細胞系增殖水平進行檢測,并通過移植瘤抑制實驗進一步在體內(nèi)證明干擾GP73對腫瘤增殖的影響。3.通過免疫印跡測定增殖和細胞周期信號相關(guān)通路蛋白,并使用流式細胞術(shù)測定細胞周期。4.通過Transwell遷移和侵襲實驗、細胞免疫熒光和免疫印跡測定GP73對腫瘤遷移和侵襲的影響以及對N-鈣粘蛋白和E-鈣粘蛋白表達的影響。結(jié)果1.干擾GP73會降低肝細胞肝癌細胞體外和體內(nèi)增殖。2.干擾GP73會降低肝細胞肝癌細胞中p-Rb表達量。3.干擾GP73對肝細胞肝癌細胞的細胞周期無影響。4.干擾GP73會降低腫瘤遷移和侵襲能力,并上調(diào)N-鈣粘蛋白和E-鈣粘蛋白的表達量。結(jié)論GP73可通過調(diào)控p-Rb、N-鈣粘蛋白和E-鈣粘蛋白的表達量,促進肝細胞肝癌細胞遷移和侵襲,從而進一步影響細胞增殖。
【關(guān)鍵詞】:高爾基體磷酸化蛋白2 肝細胞肝癌 小干擾RNA 細胞增殖與轉(zhuǎn)移 腫瘤標(biāo)志物
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R735.7
【目錄】:
  • 致謝4-5
  • 摘要5-7
  • Abstract7-9
  • 英文縮略詞9-15
  • 第1章 引言15-19
  • 1.1 研究背景15-17
  • 1.2 研究目標(biāo)17
  • 1.3 主要研究內(nèi)容17-19
  • 第2章 材料與方法19-34
  • 2.1 實驗材料19-22
  • 2.2 實驗方法22-34
  • 第3章 實驗結(jié)果34-53
  • 3.1 GP73在肝癌細胞中的表達量以及干擾效率的驗證34-36
  • 3.1.1 GP73在肝癌細胞中呈高表達34-35
  • 3.1.2 GP73特異性siRNA對細胞內(nèi)GP73轉(zhuǎn)錄和蛋白表達水平的抑制35-36
  • 3.2 干擾GP73抑制細胞體外增殖36-39
  • 3.2.1 MTS實驗結(jié)果表明干擾GP73抑制細胞體外增殖36-37
  • 3.2.2 軟瓊脂克隆形成實驗結(jié)果表明干擾GP73抑制細胞體外增殖37-39
  • 3.3 干擾GP73抑制肝癌細胞裸鼠皮下移植瘤增殖39-43
  • 3.3.1 免疫組化結(jié)果表明化學(xué)修飾siRNA對裸鼠體內(nèi)移植瘤中GP73表達產(chǎn)生抑制作用39-40
  • 3.3.2 活體干擾裸鼠皮下移植瘤實驗結(jié)果表明干擾GP73抑制肝癌細胞皮下移植瘤增殖40-41
  • 3.3.3 相關(guān)形態(tài)學(xué)和免疫學(xué)指標(biāo)測定41-43
  • 3.4 GP73對增殖相關(guān)信號通路和細胞周期的影響43-46
  • 3.4.1 干擾GP73下調(diào)p-Rb的表達量43-44
  • 3.4.2 干擾GP73對細胞周期分布無明顯影響44-46
  • 3.5 干擾GP73抑制腫瘤遷移和侵襲并改變EMT相關(guān)分子表達46-52
  • 3.5.1 Transwell實驗表明干擾GP73抑制細胞體外遷移和侵襲46-48
  • 3.5.2 干擾GP73上調(diào)N-cadherin和E-cadherin的表達量48-52
  • 3.6 結(jié)論52-53
  • 第4章 討論53-57
  • 4.1 GP73對細胞增殖和轉(zhuǎn)移的影響53-55
  • 4.2 展望55-57
  • 參考文獻57-60
  • 文獻綜述60-74
  • 參考文獻71-74
  • 作者簡介及攻讀碩士學(xué)位期間主要研究成果74

【相似文獻】

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1 朱立新,耿小平;肝細胞肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)的危險因素、預(yù)防及治療[J];肝膽外科雜志;2000年06期

2 季偉,王慧芬;乙型肝炎病毒感染合并肝細胞肝癌153例臨床分析[J];中華肝臟病雜志;2001年06期

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5 陳孝平;張志偉;楊甲梅;沈鋒;;肝細胞肝癌外科治療方法的選擇[J];中華普通外科學(xué)文獻(電子版);2009年02期

6 郭洪生;杜智;高英堂;薛春祥;張勤;朱爭艷;王偉麗;;磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝細胞肝癌中的表達及意義[J];中國腫瘤臨床;2009年08期

7 陳孝平;張志偉;楊甲梅;沈鋒;;肝細胞肝癌外科治療方法的選擇[J];中華普通外科學(xué)文獻(電子版);2010年01期

8 徐霽;;多齒針大劑量乙醇消融治療直徑5.0cm以內(nèi)的肝細胞肝癌[J];國際醫(yī)學(xué)放射學(xué)雜志;2010年01期

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本文編號:805651


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