本文關(guān)鍵詞：小鼠胰腺癌細(xì)胞MPC-83中干性細(xì)胞群的篩選及其特性的鑒定

  更多相關(guān)文章： 腫瘤干細(xì)胞 胰腺癌 MPC-83細(xì)胞 流式細(xì)胞分選 生物學(xué)特性 耐藥性

【摘要】：目的：本實(shí)驗(yàn)從小鼠胰腺癌細(xì)胞MPC-83中篩選出干性細(xì)胞群,對其在侵襲能力、致瘤性等方面的生物學(xué)特性進(jìn)行鑒定,并對胰腺癌干細(xì)胞對化療藥的耐受性進(jìn)行初步研究。為小鼠胰腺癌干細(xì)胞群免疫抑制功能的研究提供基礎(chǔ)。方法：1.運(yùn)用流式分選技術(shù)從小鼠胰腺癌細(xì)胞MPC-83中分選出CD24+CD44+的腫瘤干細(xì)胞群。2.運(yùn)用無血清懸浮培養(yǎng)法,將分選獲得的CD24+CD44+的MPC-83干性細(xì)胞群進(jìn)行體外培養(yǎng)。將細(xì)胞傳代培養(yǎng),觀察細(xì)胞成球能力。3.通過劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell侵襲、遷移實(shí)驗(yàn)檢測CD24+CD44+的MPC-83干細(xì)胞的遷移能力和侵襲能力。4.將細(xì)胞接種于昆明小鼠,觀察細(xì)胞的成瘤能力,比較細(xì)胞成瘤率。5.運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測分選獲得的CD24+CD44+的MPC-83干細(xì)胞的細(xì)胞周期。6.MTT技術(shù)檢篩選出的CD24+CD44+的MPC-83干細(xì)胞和普通MPC-83細(xì)胞對抗腫瘤藥物吉西他濱作用的敏感性。使用不同濃度的吉西他濱干預(yù)CD24+CD44+的MPC-83干細(xì)胞和普通腫瘤細(xì)胞,分析化療藥物刺激對兩種細(xì)胞生長的影響。結(jié)果：1.利用流式細(xì)胞分選技術(shù),可以篩選出CD24+CD44+的MPC-83干性細(xì)胞群,這些干細(xì)胞約占細(xì)胞總數(shù)的5%。2.利用流式細(xì)胞技術(shù)篩選出的CD24+CD44+的MPC-83干性細(xì)胞群在無血清培養(yǎng)基中可以存活,形成細(xì)胞球。在體外可連續(xù)培養(yǎng),具有自我更新能力。3.CD24+CD44+的MPC-83干性細(xì)胞群和普通MPC-83細(xì)胞Transwell遷移實(shí)驗(yàn)平均穿膜數(shù)分別為(145.2±15.4)個(gè)細(xì)胞vs(112.3±11.5)個(gè)細(xì)胞,侵襲實(shí)驗(yàn)平均穿膜數(shù)分別為(62.8±12.7)個(gè)細(xì)胞vs(48.7±21.5)個(gè)細(xì)胞。與普通MPC-83細(xì)胞相比,CD24+CD44+的MPC-83干性細(xì)胞群的侵襲能力和遷移能力更強(qiáng)。4.在體內(nèi)成瘤能力試驗(yàn)中,CD24+CD44+的MPC-83干性細(xì)胞群形成移植瘤所需最少細(xì)胞數(shù)為1×103個(gè),成瘤能力是普通MPC-83細(xì)胞的100倍。5.細(xì)胞周期檢測的結(jié)果顯示：在CD24+CD44+的MPC-83干性細(xì)胞群中,Go/G1期細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的(76.8±2.57)%。在普通MPC-83細(xì)胞中,G0/G1期細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的(47.28±1.31)%。兩者之間相比,差異顯著。6.在耐藥性試驗(yàn)中：相同作用時(shí)間,相同作用濃度條件下吉西他濱對普通MPC-83細(xì)胞的殺傷能力要強(qiáng)于對CD24+CD44+的MPC-83干性細(xì)胞群的殺傷能力。CD24+CD44+的MPC-83干性細(xì)胞群對于吉西他濱的作用,具有耐受性。結(jié)論：通過流式細(xì)胞技術(shù)成功篩選出小鼠胰腺癌干性細(xì)胞群。來源于小鼠MPC-83細(xì)胞的CD24+CD44+的細(xì)胞具有干細(xì)胞的生物學(xué)特性,并且對化療藥物耐受,為今后進(jìn)行胰腺癌個(gè)體化治療和干細(xì)胞群免疫抑制功能的研究提供基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：腫瘤干細(xì)胞 胰腺癌 MPC-83細(xì)胞 流式細(xì)胞分選 生物學(xué)特性 耐藥性
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.9
【目錄】：

• 中英文縮略詞5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 引言10-13
• 第一部分：小鼠胰腺癌細(xì)胞MPC-83中干性細(xì)胞群的分選及成球能力的檢測13-25
• 一. 實(shí)驗(yàn)材料13-15
• 二. 實(shí)驗(yàn)方法15-19
• 三. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果19-22
• 四. 討論22-25
• 第二部分：CD24~+CD44~+ MPC-83干細(xì)胞生物學(xué)特性的鑒定及耐藥性研究25-45
• 一. 實(shí)驗(yàn)材料25-28
• 二. 實(shí)驗(yàn)方法28-34
• 三. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果34-42
• 四、討論42-45
• 總結(jié)45-46
• 參考文獻(xiàn)46-51
• 綜述51-58
• 綜述參考文獻(xiàn)56-58
• 發(fā)表文章情況58-59
• 致謝59

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：799876