本文關(guān)鍵詞：胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體在人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞及組織中的表達(dá)

  更多相關(guān)文章： 非小細(xì)胞癌細(xì)胞 IGF-1R 增殖 侵襲力 免疫組化

【摘要】：目的:體外實(shí)驗(yàn)細(xì)胞水平檢測(cè)IGF-1R單克隆抗體對(duì)人體非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖及侵襲力的影響;大體標(biāo)本免疫組化水平檢測(cè)IGF-1R在人體非小細(xì)胞肺癌不同病理分型、不同分期、不同分化程度表達(dá)的差異,對(duì)人體非小細(xì)胞肺癌的早期診斷提供新的方法,針對(duì)IGF-1R通路進(jìn)行基因靶向治療的理論和實(shí)踐基礎(chǔ)進(jìn)行了充分的論證。方法:本研究分為兩個(gè)部分:在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)培養(yǎng)人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的細(xì)胞株和人肺腺癌細(xì)胞的細(xì)胞株,并進(jìn)行顯微鏡觀察和免疫組化鑒定。MTT方法檢測(cè)人體肺鱗狀細(xì)胞癌的細(xì)胞和肺腺癌的細(xì)胞的影響,分別以用IGF-1R單克隆抗體100μg/ml、10μg/ml、5μg/ml、1μg/ml的IGF-IR單克隆抗體作用人肺腺癌細(xì)胞的人肺鱗癌細(xì)胞48小時(shí),檢測(cè)IGF-1R單克隆抗體人非小細(xì)胞癌細(xì)胞增殖的影響并繪制曲線。Transwell小室法檢測(cè)空白對(duì)照組、IGF-1R單克隆抗體組兩組細(xì)胞的遷移和侵襲能力,觀察對(duì)人肺腺癌細(xì)胞的人肺鱗癌細(xì)胞侵襲力的影響,并繪制曲線;通過(guò)對(duì)48例肺癌鱗狀細(xì)胞癌、35例肺腺癌大體標(biāo)本,采用免疫組織化學(xué)方法進(jìn)行IGF-1R檢測(cè),比較IGF-1R在肺鱗狀細(xì)胞癌、肺腺癌不同分期、不同分化程度表達(dá)中表達(dá)的差異。結(jié)果:人非小細(xì)胞癌細(xì)胞培養(yǎng)48h后,肺癌細(xì)胞喪失正常的接觸抑制,呈多層性生長(zhǎng),生長(zhǎng)代謝極其旺盛,倍增的時(shí)間大大縮短,飽和密度變大,分裂指數(shù)較正常細(xì)胞增高,具有無(wú)限增殖能力,并且細(xì)胞的浸潤(rùn)能力較正常細(xì)胞強(qiáng);免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中IGF-IR的表達(dá),結(jié)果顯示,非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株普遍表達(dá)IGF-IR,以細(xì)胞膜和細(xì)胞漿的混合型表達(dá)為主,免疫組化著色后呈現(xiàn)棕黃色或棕色;MTT檢測(cè)顯示用100μg/ml、10μg/ml、5μg/ml、1μg/ml的IGF-IR單克隆抗體作用非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞48小時(shí),細(xì)胞的增殖受到抑制,抑制率分別為:(8.24±1.02)%、(12.58±0.94)%、(18.41±1.15)%、(21.02±0.87)%,隨著IGF-IR單克隆抗體濃度的增加,細(xì)胞的增殖的被抑制率也隨之增加,不同單克隆抗體濃度組的組間兩兩相比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Transwell小室法檢測(cè)空白對(duì)照組、IGF-1R單克隆抗體組細(xì)胞細(xì)胞遷移和侵襲能力,IGF-1R單克隆抗體組細(xì)胞的遷移和侵襲至Transwell小室濾膜下表面的癌細(xì)胞數(shù)均明顯低于空白對(duì)照組細(xì)胞(P0.01)。IGF-1R特異性表達(dá)于人體肺鱗狀細(xì)胞癌,表達(dá)特異性和敏感性分別為57.1%、97.8%,與IGF-1R在人體肺腺癌中的表達(dá)相比,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。IGF-1R蛋白的在非小細(xì)胞肺癌中表達(dá)與患者性別、年齡、腫瘤直徑、腫瘤個(gè)數(shù)、血管侵犯、TNM分期等方面的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:體外實(shí)驗(yàn)細(xì)胞水平驗(yàn)證IGF-1R單克隆抗體抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖和侵襲力。IGF-1R蛋白高表達(dá)于人肺鱗狀細(xì)胞癌組織中,可能參與非小細(xì)胞肺癌的發(fā)展,對(duì)肺鱗狀細(xì)胞癌的早期診斷提供新的思路。
【關(guān)鍵詞】：非小細(xì)胞癌細(xì)胞 IGF-1R 增殖 侵襲力 免疫組化
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R734.2
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 常用縮寫(xiě)詞中英文對(duì)照表11-12
• 前言12-15
• 第一部分IGF -1R單克隆抗體對(duì)人非小細(xì)胞癌細(xì)胞株細(xì)胞增殖、侵襲力的影響15-36
• 1 材料19-22
• 1.1 本實(shí)驗(yàn)所用的試劑19
• 1.2 儀器19-20
• 1.3 其他儀器20
• 1.4 各種試劑的配制方法20-22
• 2 方法22-26
• 2.1 細(xì)胞傳代的方法22
• 2.2 細(xì)胞計(jì)數(shù)方法22
• 2.3 免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)IGF-IR的表達(dá)22-23
• 2.4 細(xì)胞的凍存23
• 2.5 細(xì)胞復(fù)蘇23
• 2.6 IGF-IR MAb的配制23-24
• 2.7 MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖情況24
• 2.8 小室法體外侵襲實(shí)驗(yàn)24-25
• 2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理25-26
• 3 結(jié)果26-30
• 3.1 倒置顯微鏡觀察：26
• 3.2 免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中IGF-IR的表達(dá)26-27
• 3.3 IGF-1R單克隆抗體 對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖的影響27-28
• 3.4 IGF-1R單克隆抗體 對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞遷移和侵襲力的影響28-30
• 4 討論30-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 第二部分IGF-1R在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)36-53
• 1 材料39-41
• 1.1 標(biāo)本來(lái)源及處理39
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑39-40
• 1.3 所有實(shí)驗(yàn)儀器40
• 1.4 其它器材40-41
• 2 方法41-43
• 2.1 免疫組織化學(xué)步驟（SP法）步驟41
• 2.2 結(jié)果判定41-42
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理42-43
• 3 結(jié)果43-48
• 3.1 IGF-1R在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)（免疫組化）43-44
• 3.2 IGF-1R在肺鱗狀細(xì)胞癌各個(gè)分期、各種分化程度的陽(yáng)性表達(dá)44-45
• 3.3 IGF-1R在肺腺癌各個(gè)分期、各種分化程度的陽(yáng)性表達(dá)45
• 3.4 IGF-1R蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系45-46
• 3.5 IGF-1R蛋白表達(dá)在肺鱗狀細(xì)胞癌、肺腺癌中表達(dá)的差異46-48
• 4 討論48-50
• 參考文獻(xiàn)50-53
• 綜述53-62
• 參考文獻(xiàn)59-62
• 致謝62-63
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果63-64
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷64

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4 張海生;付月云;彭燕;馬勝喜;劉德義;;血清蛋白雙向電泳圖譜早期診斷肺鱗狀細(xì)胞癌價(jià)值[J];中華實(shí)用診斷與治療雜志;2010年05期

5 仲樓;;Alpha B-crystallin在肺鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[J];臨床醫(yī)學(xué);2012年02期

6 劉寶東，，李士昌;肺鱗狀細(xì)胞癌和肺原發(fā)性惡性纖維組織細(xì)胞瘤并存一例[J];中華腫瘤雜志;1994年03期

7 賀盛光,葉乃瑤;92例原發(fā)性肺鱗狀細(xì)胞癌放療療效分析[J];四川腫瘤防治;1998年04期

8 李偉;譚曉剛;;手術(shù)治療老年肺鱗狀細(xì)胞癌患者的預(yù)后研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2014年06期

9 單文俊,施楠,王建民,張旭,張樂(lè)峰;右下肺鱗狀細(xì)胞癌誤診為支氣管擴(kuò)張1例[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2004年02期

10 閆繼東,王躍,王巖,遲瑞鋒,李洪軍;肺鱗狀細(xì)胞癌定量測(cè)定和胞核形態(tài)分析的臨床意義[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué);2004年03期

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1 梁一;趙辰光;仝鑫;齊義鵬;孫慧;;楊樹(shù)菇蛋白對(duì)誘發(fā)性大鼠肺鱗狀細(xì)胞癌的抑制作用[A];湖北省生物工程學(xué)會(huì)2004年年會(huì)學(xué)術(shù)報(bào)告及論文摘要匯編[C];2004年

2 戴志強(qiáng);張素胤;許建一;胥彬;;人肺鱗狀細(xì)胞癌裸小鼠移植模型的超微結(jié)構(gòu)觀察[A];第四次全國(guó)電子顯微學(xué)會(huì)議論文摘要集[C];1986年

3 李萃;肖志強(qiáng);章曉鵬;陳主初;吳曉英;馮雪萍;張鵬飛;李建玲;梁宋平;;人肺鱗狀細(xì)胞癌的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[A];中國(guó)蛋白質(zhì)組學(xué)第二屆學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要論文集[C];2004年

4 黃受方;白逸秋;付治鋒;李云生;崔萍;童潔;任加強(qiáng);;肺鱗狀細(xì)胞癌超微結(jié)構(gòu)的研究[A];第四次全國(guó)電子顯微學(xué)會(huì)議論文摘要集[C];1986年

5 徐軼;王璽;馬靖;聶立功;符浩;遲春花;闕呈立;王廣發(fā);;同期原發(fā)肺鱗狀細(xì)胞癌及胃低分化腺癌伴支氣管內(nèi)轉(zhuǎn)移一例報(bào)告[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2011（第十二次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議）論文匯編[C];2011年

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5 張海生;肺鱗癌血清特異性標(biāo)志物的研究[D];鄭州大學(xué);2006年

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