發(fā)布時間：2017-09-04 16:04

  本文關(guān)鍵詞：腫瘤細胞新分子標(biāo)記的探索

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【摘要】：癌癥又稱惡性腫瘤,是人類重大基因疾病之一。在致癌因素作用下,細胞周期失去了正常的調(diào)控,導(dǎo)致細胞異常增殖與分化,從而形成腫瘤。腫瘤標(biāo)記物在腫瘤細胞中表達量有顯著的變化,其敏感度與特異性極高。目前檢測血清中腫瘤標(biāo)記物的含量是癌癥診斷的常用方法。我們在不同的腫瘤細胞中檢測抑癌基因和原癌基因的突變,發(fā)現(xiàn)抑癌基因P53和BRCA1不僅外顯子有突變而且內(nèi)含子中也存在突變；P53突變分別在外顯子3上游內(nèi)含子、外顯子3下游內(nèi)含子、外顯子4、外顯子4下游內(nèi)含子、外顯子5上游內(nèi)含子、外顯子10上游內(nèi)含子以及外顯子11；BRCA1突變分別在外顯子7和8上游內(nèi)含子,外顯子10、12,外顯子17下游內(nèi)含子以及外顯子20上游內(nèi)含子。本文發(fā)現(xiàn)原癌基因Src和N-myc沒有突變。通過二維電泳和質(zhì)譜分析乳腺癌細胞MCF-7和乳腺上皮細胞MCF-10A,鑒定出7個差異表達的蛋白。其中,細胞角質(zhì)蛋白-8、71 kDa熱休克蛋白、94 kDa葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白以及14-3-3ε蛋白在乳腺癌細胞MCF-7中的表達上調(diào),而細胞角質(zhì)蛋白-18、40S核糖體蛋白以及細胞角質(zhì)蛋白-1的表達下調(diào)。因此,在探索乳腺癌早期診斷的新型分子標(biāo)記的過程中P53外顯子3上游內(nèi)含子、外顯子3下游內(nèi)含子、外顯子4下游內(nèi)含子、外顯子5上游內(nèi)含子、外顯子10上游內(nèi)含子的突變,BRCA1外顯子7和8上游內(nèi)含子,外顯子17下游內(nèi)含子以及外顯子20上游內(nèi)含子的突變可能是新的DNA分子標(biāo)記；14-3-3ε蛋白和40S核糖體蛋白是潛在的蛋白分子標(biāo)記。
【關(guān)鍵詞】：抑癌基因 原癌基因 DNA標(biāo)記 蛋白質(zhì)標(biāo)記
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R730.43
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 符號說明10-11
• 第一章 腫瘤標(biāo)記物與癌癥(文獻綜述)11-18
• 1.1 前言11
• 1.2 粘蛋白與癌癥11-12
• 1.3 自身抗體與癌癥12-15
• 1.4 CA125與癌癥15-16
• 1.5 甲胎蛋白與癌癥16
• 1.6 癌癥抗原CA19-9與癌癥16-17
• 1.7 其他腫瘤標(biāo)記物與癌癥17-18
• 第二章 腫瘤細胞分子標(biāo)記的探索18-57
• 2.1 引言18-20
• 2.1.1 腫瘤標(biāo)記物18
• 2.1.2 抑癌基因18-19
• 2.1.3 研究目的與意義19-20
• 2.2 實驗材料20-30
• 2.2.1 細胞株20
• 2.2.2 引物20-25
• 2.2.3 培養(yǎng)基25-26
• 2.2.4 實驗試劑26-30
• 2.2.5 酶類與其他試劑盒30
• 2.3 實驗方法30-35
• 2.3.1 抑癌基因與原癌基因突變的檢測30-32
• 2.3.2 乳腺癌細胞蛋白的提取32-34
• 2.3.3 差異表達蛋白的鑒定34-35
• 2.4 結(jié)果35-55
• 2.4.1 抑癌基因BRCA1突變譜35-44
• 2.4.2 抑癌基因P53突變譜44-52
• 2.4.3 原癌基因Src突變譜52
• 2.4.4 原癌基因N-myc突變譜52-53
• 2.4.5 乳腺細胞蛋白組的差異表達分析53-55
• 2.5 討論55-57
• 2.5.1 DNA標(biāo)記物55-56
• 2.5.2 蛋白分子標(biāo)記56-57
• 參考文獻57-63
• 致謝63

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本文編號：792483