本文關(guān)鍵詞：索拉非尼聯(lián)合5-氮雜-2’-脫氧胞苷調(diào)控肝癌細(xì)胞株DNMT3B基因表達(dá)的研究

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【摘要】：目的:(1)研究索拉非尼聯(lián)合5-氮雜-2’-脫氧胞苷對(duì)人肝癌細(xì)胞株的作用效果及其調(diào)控DNMT3B基因表達(dá)可能分子機(jī)制;(2)探討索拉非尼調(diào)控mi R-143、mi R-145對(duì)肝癌細(xì)胞作用效果及可能分子機(jī)制。方法:(1)以人肝癌細(xì)胞株BEL-7404、SMMC-7721為研究對(duì)象,單藥及聯(lián)合用藥后,采用噻唑藍(lán)比色法、創(chuàng)傷愈合實(shí)驗(yàn)、Transwell和流式細(xì)胞術(shù)方法分別檢測(cè)對(duì)人肝癌細(xì)胞株增殖、遷移、侵襲和凋亡的影響;(2)采用蛋白印跡技術(shù)檢測(cè)肝癌細(xì)胞株中DNMT3B、p-Akt-Ser473和ERK蛋白表達(dá)情況;(3)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)肝癌細(xì)胞株中DNMT3B基因m RNA表達(dá)情況;(4)以人肝癌細(xì)胞株BEL-7404和永生化肝細(xì)胞L02為研究對(duì)象,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)肝癌細(xì)胞株BEL-7404和永生化肝細(xì)胞L02 mi R-143、mi R-145表達(dá)情況,檢測(cè)索拉非尼作用BEL-7404細(xì)胞后mi R-143、mi R-145表達(dá)變化;(5)通過(guò)脂質(zhì)體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染mi RNAmimics到BEL-7404細(xì)胞后,檢測(cè)細(xì)胞生物學(xué)性狀變化情況,研究相應(yīng)的mi R-143、mi R-145在肝癌的作用機(jī)制。并通過(guò)蛋白質(zhì)印跡技術(shù)檢測(cè)DNMT3B蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:(1)索拉非尼聯(lián)合5-氮雜-2’-脫氧胞苷作用肝癌細(xì)胞后能夠明顯的抑制細(xì)胞增殖并呈劑量依賴關(guān)系,其聯(lián)用起到協(xié)同作用;能夠有抑制肝癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力;能促進(jìn)癌細(xì)胞的凋亡。(2)單藥及聯(lián)合用藥能減少DNMT3B和p-Akt-Ser473蛋白表達(dá),對(duì)ERK蛋白表達(dá)無(wú)影響。(3)單藥及聯(lián)合用藥后能夠下調(diào)癌細(xì)胞DNMT3B基因m RNA表達(dá)。(4)肝癌BEL-7404細(xì)胞與永生化肝L02相比較,mi R-143、mi R-145;索拉非尼作用肝癌細(xì)胞后mi R-143和mi R-145表達(dá)升高。(5)轉(zhuǎn)染mi RNA mimics到肝癌細(xì)胞后能抑制細(xì)胞增殖和侵襲能力,促進(jìn)凋亡,索拉非尼通過(guò)上調(diào)mi R-143和mi R-145的表達(dá)從而下調(diào)DNMT3B蛋白表達(dá)進(jìn)而,并通過(guò)此途徑發(fā)揮抗腫瘤作用。結(jié)論:1.索拉非尼聯(lián)用5-Aza-CdR能起到協(xié)同抗腫瘤作用,并可能通過(guò)抑制PI3K/Akt信號(hào)通路來(lái)減少DNMT3B的表達(dá)。2.mi R-143和mi R-145在肝癌中發(fā)揮類似抑癌基因的作用3.索拉非尼通過(guò)上調(diào)肝癌BEL-7404細(xì)胞中mi R-143和mi R-145的表達(dá)進(jìn)而下調(diào)靶蛋白DNMT3B的表達(dá)進(jìn)而發(fā)揮抗腫瘤作用。
【關(guān)鍵詞】：索拉非尼 5-氮雜-2’-脫氧胞苷 DNMT3B 肝癌 miR-143 miR-145
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-12
• 材料與儀器12-15
• 試驗(yàn)方法15-28
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-41
• 討論41-45
• 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-52
• 致謝52-53
• 附錄A：主要英文縮略詞53-54
• 附錄B：常用試劑配制54-56
• 附錄C：個(gè)人簡(jiǎn)介56-57
• 附錄D：綜述57-68
• 參考文獻(xiàn)64-68

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 李剛;付成;;蛋白激酶C在腎細(xì)胞癌多藥耐藥中的作用[J];腫瘤基礎(chǔ)與臨床;2009年02期

2 李倩玉;王一;王濤;吳孟超;;9種耐藥相關(guān)蛋白在肝癌中的表達(dá)及其臨床意義[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2006年03期

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本文編號(hào)：775958