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紫花牡荊素對肝癌細胞RASSF1A基因表達的影響

發(fā)布時間:2017-08-24 08:12

  本文關(guān)鍵詞:紫花牡荊素對肝癌細胞RASSF1A基因表達的影響


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【摘要】:目的:觀察紫花牡荊素(casticin,CAS)對肝癌Hep G2細胞RASSF1A基因表達的影響。方法:體外培養(yǎng)人肝癌細胞系Hep G2,并根據(jù)不同的實驗?zāi)康姆譃榭瞻讓φ战M和不同濃度CAS處理組。其中空白對照組僅給予等體積培養(yǎng)基處理;CAS干預(yù)組采用0.5μmol/L,1.0μmol/L,2.0μmol/L CAS作用Hep G2細胞0~48h。采用甲基化特異性PCR(MSP)法檢測Hep G2細胞CAS處理后RASSF1A基因啟動子區(qū)的甲基化水平。提取細胞總RNA和蛋白,實時定量PCR和Western blot分別檢測RASSF1A m RNA和DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)蛋白的表達。結(jié)果:1.MSP結(jié)果顯示,Hep G2細胞未經(jīng)CAS處理時,細胞內(nèi)甲基化RASSF1A含量呈一定表達水平。當給予不同濃度CAS處理0~48h后,甲基化RASSF1A含量隨著CAS濃度的增高而降低,與之相對應(yīng)的是,隨著CAS濃度的增高,非甲基化RASSF1A基因含量隨之增多。2.Hep G2細胞中RASSF1A m RNA含量低下,而經(jīng)不同濃度CAS處理0~48h后,real-time PCR結(jié)果顯示RASSF1A m RNA水平隨之增高,并具有一定的劑量和時間依賴性。此外,CAS也能上調(diào)RASSF1A蛋白的表達。3.Hep G2細胞在靜息狀態(tài)下,DNMT1 m RNA呈較高水平表達。而CAS處理后,隨著濃度的遞增,DNMT1 m RNA含量隨之降低。此外,Western blot也獲得了類似的效果。結(jié)論:CAS能降低Hep G2細胞中RASSF1A啟動子的甲基化水平,并促進其表達;CAS能降低Hep G2細胞中DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1的表達水平。
【關(guān)鍵詞】:紫花牡荊素 RASSF1A 肝癌細胞
【學位授予單位】:南華大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R735.7
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-9
  • 主要縮略詞及英文索引9-10
  • 第1章 前言10-12
  • 第2章 主要實驗材料和儀器設(shè)備12-16
  • 第3章 實驗方法16-24
  • 第4章 實驗結(jié)果24-31
  • 第5章 討論31-35
  • 第6章 結(jié)論35-37
  • 參考文獻37-41
  • 綜述41-47
  • 參考文獻44-47
  • 作者攻讀學位期間的科研成果47-49
  • 致謝49

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張春雷;;晚期肝癌介入治療綜合措施的探討[J];中國醫(yī)藥指南;2014年26期



本文編號:730165

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