本文關鍵詞：人源全分子抗c-Met抗體的制備及對鼻咽癌細胞生物學特性的影響

  更多相關文章： 鼻咽癌 c-Met 人源抗體

【摘要】：目的 :利用基因工程技術制備全分子人源抗c-Met抗體,分析該抗體免疫學特性,并觀察該全分子抗體對鼻咽癌細胞增殖、遷移和侵襲的影響。方法:設計引物擴增抗c-Met Fab抗體的重輕鏈可變區(qū)序列,將其分別克隆到真核表達載體p FUSECHIg-h G1和p FUSE-CLIg-hκ中。轉(zhuǎn)染真核細胞,表達產(chǎn)物用Protein A柱純化。通過ELISA、Western blot和免疫熒光等方法鑒定該抗體的免疫學特性。CCK-8檢測抗體對人鼻咽癌細胞增殖的抑制作用,劃痕實驗、Transwell侵襲實驗分析抗體對人鼻咽癌細胞遷移和侵襲的影響。結(jié)果:成功重組全分子人源抗c-Met抗體的表達載體,獲得的全分子抗體保留了與抗原的特異性結(jié)合活性。CCK-8實驗中結(jié)果顯示全分子抗體能抑制c-Met陽性鼻咽癌細胞CNE2和HONE1的增殖。細胞劃痕和Transwell侵襲實驗結(jié)果顯示全分子抗體能抑制c-Met陽性細胞CNE2和HONE1的遷移和侵襲能力。結(jié)論:本研究成功制備人源全分子抗c-Met抗體,該抗體有明顯的中和活性,為探索鼻咽癌分子靶向治療奠定了基礎。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科;南京醫(yī)科大學附屬南京婦幼保健院婦產(chǎn)科;南京醫(yī)科大學衛(wèi)生部抗體技術重點實驗室;南京軍區(qū)軍事醫(yī)學研究所;
【關鍵詞】： 鼻咽癌 c-Met 人源抗體
【基金】：江蘇省科技廳臨床醫(yī)學科技專項計劃(BL2013038) 國家自然科學基金(81502673)
【分類號】：R739.63
【正文快照】： 南京醫(yī)科大學學報鼻咽癌是我國十大高發(fā)惡性腫瘤之一,在南方地區(qū)發(fā)生率極高。目前鼻咽癌的治療方法主要采用放療聯(lián)合化療,但其療效不佳,5年生存率不足60%,并且治療產(chǎn)生的不良反應可進一步損傷機體免疫系統(tǒng)功能[1-2]。隨著分子生物學的發(fā)展,人們對鼻咽癌的研究進入基因水平,有

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉彥仿,付勇;重視抗體工程[J];中華病理學雜志;2003年01期

2 安懷杰,劉志剛,俞煒源;治療性全抗體的表達及其研究進展[J];生物技術通訊;2004年03期

3 劉彥仿;第七屆國際抗體工程年會簡訊[J];細胞與分子免疫學雜志;1997年02期

4 谷仁燁 ,姚月歌;抗體醫(yī)療的最新進展[J];日本醫(yī)學介紹;2004年05期

5 楊磊;張春明;王德芝;;體外展示技術及其在抗體工程中的應用[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2009年13期

6 楊靖;孫衛(wèi)兵;鄺玉;;抗體的系統(tǒng)性檢測方法[J];四川生理科學雜志;2013年03期

7 周正任;抗體工程[J];微生物學雜志;1996年04期

8 陸詩華;李昌本;趙壽元;;抗體工程[J];科學;1997年01期

9 徐偉文;科技發(fā)展與社會需求——抗體工程發(fā)展進程的啟示[J];醫(yī)學與哲學;1999年12期

10 唐文淵;能否用抗體代替抗生素[J];國外畜牧學(豬與禽);2005年05期

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 忠良　小莉;江蘇生物抗體工程與藥物創(chuàng)制研究院通過專家論證[N];常州日報;2009年

2 北京華經(jīng)縱橫經(jīng)濟信息中心 生物醫(yī)藥部;國際抗體治療藥物技術“熱氣騰騰”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2005年

3 王博;抗體工程的新紀元[N];北京科技報;2010年

4 北京華經(jīng)縱橫經(jīng)濟信息中心生物醫(yī)藥部;國際抗體治療藥物熱點聚焦[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2005年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 呂明;新型抗CD3小分子抗體的設計及其功能研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2007年

2 阮承邁;抗HBsAg抗體在CHO細胞中表達量提高研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2002年

3 陶俊;人源性抗FGF-2中和性抗體的篩選，表達及鑒定[D];南方醫(yī)科大學;2010年

4 楊峗;靶向表皮生長因子受體的新型前抗體制備及抗腫瘤功能研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2015年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 李楊;抗β-淀粉樣蛋白鼠源融合抗體在Pichia pastoris中的表達、純化及性質(zhì)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2006年

2 張付凱;抗對硫磷基因工程四價抗體在大腸桿菌中的高效表達[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2011年

3 相雙雙;基于GFP分子的抗體設計與改造[D];福建農(nóng)林大學;2014年

4 楊濱;HAb18G/CD147及其單抗的分子模建對接和抗體人源化設計的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2007年

5 安懷杰;全抗體在CHO細胞的高效表達[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2004年

6 王曉娜;抗結(jié)核桿菌晶體蛋白人源IgA抗體研制[D];廣西醫(yī)科大學;2012年

7 李存;抗禽流感病毒H5N1分泌型IgA在CHO細胞中的表達及免疫學活性分析[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2011年

，

本文編號：699492