本文關(guān)鍵詞：人源全分子抗c-Met抗體的制備及對(duì)鼻咽癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響

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【摘要】：目的 :利用基因工程技術(shù)制備全分子人源抗c-Met抗體,分析該抗體免疫學(xué)特性,并觀察該全分子抗體對(duì)鼻咽癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響。方法:設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增抗c-Met Fab抗體的重輕鏈可變區(qū)序列,將其分別克隆到真核表達(dá)載體p FUSECHIg-h G1和p FUSE-CLIg-hκ中。轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞,表達(dá)產(chǎn)物用Protein A柱純化。通過(guò)ELISA、Western blot和免疫熒光等方法鑒定該抗體的免疫學(xué)特性。CCK-8檢測(cè)抗體對(duì)人鼻咽癌細(xì)胞增殖的抑制作用,劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)分析抗體對(duì)人鼻咽癌細(xì)胞遷移和侵襲的影響。結(jié)果:成功重組全分子人源抗c-Met抗體的表達(dá)載體,獲得的全分子抗體保留了與抗原的特異性結(jié)合活性。CCK-8實(shí)驗(yàn)中結(jié)果顯示全分子抗體能抑制c-Met陽(yáng)性鼻咽癌細(xì)胞CNE2和HONE1的增殖。細(xì)胞劃痕和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示全分子抗體能抑制c-Met陽(yáng)性細(xì)胞CNE2和HONE1的遷移和侵襲能力。結(jié)論:本研究成功制備人源全分子抗c-Met抗體,該抗體有明顯的中和活性,為探索鼻咽癌分子靶向治療奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科;南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京婦幼保健院婦產(chǎn)科;南京醫(yī)科大學(xué)衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;南京軍區(qū)軍事醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 鼻咽癌 c-Met 人源抗體
【基金】：江蘇省科技廳臨床醫(yī)學(xué)科技專(zhuān)項(xiàng)計(jì)劃(BL2013038) 國(guó)家自然科學(xué)基金(81502673)
【分類(lèi)號(hào)】：R739.63
【正文快照】： 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)鼻咽癌是我國(guó)十大高發(fā)惡性腫瘤之一,在南方地區(qū)發(fā)生率極高。目前鼻咽癌的治療方法主要采用放療聯(lián)合化療,但其療效不佳,5年生存率不足60%,并且治療產(chǎn)生的不良反應(yīng)可進(jìn)一步損傷機(jī)體免疫系統(tǒng)功能[1-2]。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,人們對(duì)鼻咽癌的研究進(jìn)入基因水平,有

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