本文關(guān)鍵詞：非編碼RNA調(diào)控食管癌轉(zhuǎn)移的功能機(jī)制研究

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【摘要】：我國(guó)食管癌發(fā)病率和死亡率均居世界首位。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)在2014年2月3日發(fā)表的《世界癌癥報(bào)告2014》,2012年食管癌新發(fā)病例達(dá)45.6萬例,病理分型主要為鱗癌。臨床上因?qū)κ彻馨┌l(fā)生和發(fā)展機(jī)制尚不明了,始終缺乏有效的早診、特異性分子靶點(diǎn)和治療藥物。因此,對(duì)食管癌的防治已上升到國(guó)家層面的健康戰(zhàn)略需求。核仁小RNA是一類在真核細(xì)胞中廣泛存在的長(zhǎng)度約為60-300nt的非編碼RNA,主要由內(nèi)含子編碼,能與特定的蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物在細(xì)胞中穩(wěn)定存在。它們可以指導(dǎo)rRNA的2'-O甲基化及假尿嘧啶化修飾,影響rRNA的成熟,從而影響蛋白質(zhì)的合成。研究發(fā)現(xiàn)snoRNA在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著非常重要的作用,但在食管癌的研究中還未見有關(guān)snoRNA的報(bào)道。在本文的第一部分研究中,首先對(duì)食管鱗癌早期淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與非轉(zhuǎn)移標(biāo)本進(jìn)行miRNA芯片分析并驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)snord75在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中高表達(dá)。在細(xì)胞水平檢測(cè)snord75對(duì)食管鱗癌細(xì)胞表型的影響,結(jié)果顯示snord75促進(jìn)食管鱗癌細(xì)胞惡性表型的形成。我們?cè)诼闶篌w內(nèi)發(fā)現(xiàn)snord75高表達(dá)促進(jìn)其成瘤能力。進(jìn)一步探究snord75的功能機(jī)制,通過Biotin-RNA pull down、質(zhì)譜鑒定并用westernblot、RIP實(shí)驗(yàn)等進(jìn)一步驗(yàn)證,找到了一個(gè)與其特異性結(jié)合的蛋白ILF3,ILF3是VEGFC的轉(zhuǎn)錄因子,snord75與ILF3結(jié)合可以促進(jìn)VEGFC的轉(zhuǎn)錄,從而促進(jìn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。在臨床水平,snord75在75對(duì)食管鱗癌組織、122例食管鱗癌患者血漿中呈現(xiàn)高表達(dá),相對(duì)于75例配對(duì)的癌旁組織、55例正常人的血漿中的表達(dá)；且snord75表達(dá)越高,病人的生存預(yù)后越差。因此,snord75在食管癌中與ILF3蛋白結(jié)合,促進(jìn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,呈現(xiàn)癌基因的特點(diǎn)。miRNA是一類長(zhǎng)度為19～25個(gè)核苷酸的單鏈非編碼RNA,廣泛存在于真核生物中。miRNA通過與靶基因3'UTR結(jié)合,促進(jìn)靶mRNA的降解或抑制其翻譯,從而調(diào)控其表達(dá),影響細(xì)胞的增殖、分化和凋亡等過程。近年來研究顯示,miRNA與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),發(fā)揮類似癌基因或抑癌基因的功能。在本文第二部分研究中,發(fā)現(xiàn)miR-425高表達(dá)促進(jìn)食管癌細(xì)胞增殖、克隆形成及侵襲遷移能力。通過雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)證實(shí)SMAD2是miR-425的靶基因,且miR-425與SMAD2第二個(gè)結(jié)合位點(diǎn)(7649-7654)結(jié)合,影響其mRNA和蛋白水平的表達(dá)。高表達(dá)miR-425,E-cadherin表達(dá)降低,而Vimentin表達(dá)升高,靶基因SMAD2的表達(dá)下降。miR-425和SMAD2的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)。miR-425在食管鱗癌組織、食管鱗癌患者血漿中的表達(dá)明顯高于配對(duì)的癌旁組織、正常人血漿。綜上所述,miR-425通過靶向結(jié)合SMAD2 3'UTR,在食管鱗癌中發(fā)揮癌基因的作用。
【關(guān)鍵詞】：食管鱗癌 snord75 miR-425 增殖 侵襲遷移 分子機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.1
【目錄】：

• 縮略語表7-9
• 中文摘要9-11
• 英文摘要11-13
• 第一部分 食管癌轉(zhuǎn)移相關(guān)snoRNA功能及機(jī)制研究13-59
• 前言14-21
• 材料與方法21-40
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果40-54
• 討論54-57
• 展望57-58
• 小結(jié)58-59
• 第二部分 microRNA425在食管癌中的功能及其分子機(jī)制59-80
• 前言60-62
• 材料與方法62-67
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果67-76
• 討論76-77
• 展望77-79
• 小結(jié)79-80
• 參考文獻(xiàn)80-86
• 基金資助86-87
• 碩士在讀期間發(fā)表與待發(fā)表論文87-88
• 文獻(xiàn)綜述88-95
• 參考文獻(xiàn)94-95
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷95-97
• 致謝97-98

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Jeff Boyd;;Implication of snoRNA U50 in human breast cancer[J];遺傳學(xué)報(bào);2009年08期

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本文編號(hào)：697001