本文關鍵詞：非編碼RNA調(diào)控食管癌轉移的功能機制研究

  更多相關文章： 食管鱗癌 snord75 miR-425 增殖 侵襲遷移 分子機制

【摘要】：我國食管癌發(fā)病率和死亡率均居世界首位。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)在2014年2月3日發(fā)表的《世界癌癥報告2014》,2012年食管癌新發(fā)病例達45.6萬例,病理分型主要為鱗癌。臨床上因?qū)κ彻馨┌l(fā)生和發(fā)展機制尚不明了,始終缺乏有效的早診、特異性分子靶點和治療藥物。因此,對食管癌的防治已上升到國家層面的健康戰(zhàn)略需求。核仁小RNA是一類在真核細胞中廣泛存在的長度約為60-300nt的非編碼RNA,主要由內(nèi)含子編碼,能與特定的蛋白質(zhì)結合形成復合物在細胞中穩(wěn)定存在。它們可以指導rRNA的2'-O甲基化及假尿嘧啶化修飾,影響rRNA的成熟,從而影響蛋白質(zhì)的合成。研究發(fā)現(xiàn)snoRNA在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著非常重要的作用,但在食管癌的研究中還未見有關snoRNA的報道。在本文的第一部分研究中,首先對食管鱗癌早期淋巴結轉移與非轉移標本進行miRNA芯片分析并驗證,發(fā)現(xiàn)snord75在淋巴結轉移組中高表達。在細胞水平檢測snord75對食管鱗癌細胞表型的影響,結果顯示snord75促進食管鱗癌細胞惡性表型的形成。我們在裸鼠體內(nèi)發(fā)現(xiàn)snord75高表達促進其成瘤能力。進一步探究snord75的功能機制,通過Biotin-RNA pull down、質(zhì)譜鑒定并用westernblot、RIP實驗等進一步驗證,找到了一個與其特異性結合的蛋白ILF3,ILF3是VEGFC的轉錄因子,snord75與ILF3結合可以促進VEGFC的轉錄,從而促進淋巴結轉移。在臨床水平,snord75在75對食管鱗癌組織、122例食管鱗癌患者血漿中呈現(xiàn)高表達,相對于75例配對的癌旁組織、55例正常人的血漿中的表達；且snord75表達越高,病人的生存預后越差。因此,snord75在食管癌中與ILF3蛋白結合,促進淋巴結轉移,呈現(xiàn)癌基因的特點。miRNA是一類長度為19～25個核苷酸的單鏈非編碼RNA,廣泛存在于真核生物中。miRNA通過與靶基因3'UTR結合,促進靶mRNA的降解或抑制其翻譯,從而調(diào)控其表達,影響細胞的增殖、分化和凋亡等過程。近年來研究顯示,miRNA與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關,發(fā)揮類似癌基因或抑癌基因的功能。在本文第二部分研究中,發(fā)現(xiàn)miR-425高表達促進食管癌細胞增殖、克隆形成及侵襲遷移能力。通過雙熒光素酶報告基因?qū)嶒炞C實SMAD2是miR-425的靶基因,且miR-425與SMAD2第二個結合位點(7649-7654)結合,影響其mRNA和蛋白水平的表達。高表達miR-425,E-cadherin表達降低,而Vimentin表達升高,靶基因SMAD2的表達下降。miR-425和SMAD2的表達水平呈負相關。miR-425在食管鱗癌組織、食管鱗癌患者血漿中的表達明顯高于配對的癌旁組織、正常人血漿。綜上所述,miR-425通過靶向結合SMAD2 3'UTR,在食管鱗癌中發(fā)揮癌基因的作用。
【關鍵詞】：食管鱗癌 snord75 miR-425 增殖 侵襲遷移 分子機制
【學位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.1
【目錄】：

• 縮略語表7-9
• 中文摘要9-11
• 英文摘要11-13
• 第一部分 食管癌轉移相關snoRNA功能及機制研究13-59
• 前言14-21
• 材料與方法21-40
• 實驗結果40-54
• 討論54-57
• 展望57-58
• 小結58-59
• 第二部分 microRNA425在食管癌中的功能及其分子機制59-80
• 前言60-62
• 材料與方法62-67
• 實驗結果67-76
• 討論76-77
• 展望77-79
• 小結79-80
• 參考文獻80-86
• 基金資助86-87
• 碩士在讀期間發(fā)表與待發(fā)表論文87-88
• 文獻綜述88-95
• 參考文獻94-95
• 個人簡歷95-97
• 致謝97-98

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Jeff Boyd;;Implication of snoRNA U50 in human breast cancer[J];遺傳學報;2009年08期

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本文編號：697001