本文關(guān)鍵詞：環(huán)狀RNA CDR1as調(diào)控膠質(zhì)瘤惡性生長(zhǎng)的分子機(jī)制

  更多相關(guān)文章： 膠質(zhì)瘤 環(huán)狀 RNA CDR1as 腫瘤蛋白p53

【摘要】：目的:神經(jīng)膠質(zhì)瘤是最為常見(jiàn)的原發(fā)性顱內(nèi)腫瘤,發(fā)病率為(5~8)/100萬(wàn),5年病死率在全身腫瘤中僅次于胰腺癌和肺癌,位列第三位,是嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的重大疾病之一。目前,膠質(zhì)瘤的治療以手術(shù)治療為主,但由于腫瘤浸潤(rùn)性生長(zhǎng),與腦組織間無(wú)明顯邊界,難以作到全部切除,常遺有神經(jīng)功能缺失。國(guó)內(nèi)外有關(guān)腦膠質(zhì)瘤的臨床治療效果在近30年進(jìn)展最為緩慢,患者生存期無(wú)明顯改善。惡性膠質(zhì)瘤的發(fā)病機(jī)制至今仍不明確。因此,對(duì)惡性膠質(zhì)瘤的分子機(jī)制進(jìn)行深入研究,從而發(fā)現(xiàn)更為有效的治療靶標(biāo)和治療方案,就顯得十分迫切和必要。環(huán)狀RNAs(circular RNA)作為一類(lèi)新發(fā)現(xiàn)的非編碼RNA分子,可能對(duì)細(xì)胞生物學(xué)行為發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。最新的研究顯示,環(huán)狀RNAs可大量表達(dá)于腫瘤細(xì)胞中,而它們的表達(dá)異常是否與腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān),尚待進(jìn)一步的研究。本研究旨在通過(guò)敲減實(shí)驗(yàn)闡明環(huán)狀RNA CDR1as調(diào)控膠質(zhì)瘤惡性生長(zhǎng)的作用機(jī)制,為該疾病的有效防治提供新策略。方法:1、根據(jù)Circbase數(shù)據(jù)庫(kù)提供的CDR1as基因序列設(shè)計(jì)合成特異引物,利用RT-qPCR檢測(cè)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中CDR1as的表達(dá)水平。2、構(gòu)建CDR1as敲減載體。3、MTT檢測(cè)CDR1as對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響。4、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CDR1as對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡及周期的影響。5、敲減處理膠質(zhì)瘤細(xì)胞系,RT-qPCR檢測(cè)CDR1as的表達(dá),同時(shí)用RT-qPCR及Western Blot檢測(cè)CDR1as下游靶標(biāo)P53的變化。結(jié)果:1、RT-qPCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)與正常腦組織相比,膠質(zhì)瘤細(xì)胞系及膠質(zhì)瘤組織中CDR1as的表達(dá)顯著降低。2、利用CDR1as敲減載體處理膠質(zhì)瘤細(xì)胞48h后,MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖,與對(duì)照組相比,處理組細(xì)胞增殖能力明顯升高。3、利用CDR1as敲減載體處理膠質(zhì)瘤細(xì)胞48h后,用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡及周期,發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比,處理組細(xì)胞凋亡減少,細(xì)胞周期G0/G1期降低,且S期明顯升高。4、利用CDR1as敲減載體處理膠質(zhì)瘤細(xì)胞系后,CDR1as及P53的表達(dá)明顯降低。結(jié)論:環(huán)狀RNA CDR1as在多數(shù)惡性膠質(zhì)瘤腫瘤標(biāo)本和細(xì)胞失活,CDR1as的失活可能通過(guò)降低p53的表達(dá)從而促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的惡性生長(zhǎng)。
【關(guān)鍵詞】：膠質(zhì)瘤 環(huán)狀 RNA CDR1as 腫瘤蛋白p53
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R739.4
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• （一）前言11-12
• （二）材料和方法12-17
• 1. 材料與儀器12-14
• 1.1 主要試劑12
• 1.2 組織收集12-13
• 1.3 細(xì)胞株及細(xì)胞培養(yǎng)13
• 1.4 主要儀器與設(shè)備13
• 1.5 主要溶液的配制13-14
• 2. 方法14-17
• 2.1 細(xì)胞培養(yǎng)傳代和收集14-15
• 2.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)CDR1as的表達(dá)15-16
• 2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染16
• 2.4 MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力16
• 2.5 流式細(xì)胞術(shù)16
• 2.6 蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)（Western blotting）16-17
• 2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法17
• （三）結(jié)果17-19
• （四）討論19-21
• （五）結(jié)論21-22
• （六）參考文獻(xiàn)22-25
• 綜述25-41
• 參考文獻(xiàn)34-41
• 致謝41-42

【相似文獻(xiàn)】

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2 徐俊杰;于洪泉;趙偉;金宏;溫娜;齊玲;劉興吉;;西蘭花多肽對(duì)C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年01期

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中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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3 張獻(xiàn)懷　張文;瘤區(qū)埋雷 持續(xù)殺傷[N];健康報(bào);2007年

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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