本文關(guān)鍵詞：基于離心芯片的血清中癌胚抗原的含量檢測，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：癌胚抗原是廣泛存在于消化系統(tǒng)癌、乳腺癌、肺癌患者血清中的一種糖蛋白。它是一種廣譜性的腫瘤標(biāo)志物,是目前臨床上公認(rèn)的、具有明確診斷意義的六種腫瘤標(biāo)志物之一,對血清中癌胚抗原濃度的實時監(jiān)測,能夠更好地監(jiān)測病情發(fā)展以及對藥物療效進(jìn)行判斷。傳統(tǒng)的癌胚抗原的檢測方法是免疫,多次洗滌分離操作繁瑣、費(fèi)時。本文以離心沉降為原理,首次將殼聚糖作為密度介質(zhì),開發(fā)了一種一步檢測癌胚抗原的方法,即在預(yù)儲存有密度介質(zhì)的14個鉛筆型通道的圓盤芯片上,一步離心將待測微珠復(fù)合物與溶液分離后,直接進(jìn)行熒光檢測,實現(xiàn)了癌胚抗原高通量的快速、便捷檢測。文中首先對用微珠代替常規(guī)的孔板固相基底的可行性進(jìn)行了驗證。對percoll、右旋糖酐以及殼聚糖三種密度介質(zhì)的分離效果進(jìn)行考察,發(fā)現(xiàn)2%的殼聚糖溶液的分離效果明顯較其他兩種的好。接著對不同傾斜角的芯片通道進(jìn)行篩選,最終選擇0°傾斜角的通道進(jìn)行實驗。對于離心所涉及的離心轉(zhuǎn)速、離心時間等參數(shù),文中進(jìn)行了優(yōu)化,最終在2500r/min的轉(zhuǎn)速條件下進(jìn)行2.5min的離心,使待測微珠復(fù)合物與溶液完全分離。用所開發(fā)的方法對癌胚抗原標(biāo)準(zhǔn)品濃度進(jìn)行測定,得到癌胚抗原濃度與熒光強(qiáng)度關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線,在0.7-22.5ng/mL濃度范圍內(nèi)線性良好(R2=0.993)。最后對32例已知濃度的癌胚抗原血清樣品進(jìn)行檢測,并與實際濃度進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)本實驗所用方法得到的檢測結(jié)果與醫(yī)院所提供結(jié)果無顯著性差異,因此本文建立的實驗方法在臨床生物標(biāo)記物檢測方面具有潛在應(yīng)用價值。
【關(guān)鍵詞】：離心芯片 癌胚抗原 密度介質(zhì) 熒光檢測
【學(xué)位授予單位】：大連理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R730.43
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 引言8-9
• 1 文獻(xiàn)綜述9-25
• 1.1 癌胚抗原9-11
• 1.1.1 癌胚抗原簡介9
• 1.1.2 癌胚抗原檢測現(xiàn)狀9-11
• 1.2 離心微流控11-21
• 1.2.1 離心微流控芯片的制作11-13
• 1.2.2 離心芯片的原理及優(yōu)點13
• 1.2.3 離心芯片的應(yīng)用及發(fā)展13-21
• 1.3 密度梯度離心21
• 1.4 殼聚糖21-24
• 1.4.1 殼聚糖的理化性質(zhì)21-22
• 1.4.2 殼聚糖的應(yīng)用22-24
• 1.5 研究目標(biāo)24-25
• 2 實驗25-35
• 2.1 實驗試劑25-26
• 2.2 實驗儀器26-27
• 2.3 離心芯片的設(shè)計及制作27-29
• 2.3.1 模板的制作27-28
• 2.3.2 PDMS-玻璃芯片的制作28-29
• 2.4 癌胚抗原的檢測29-35
• 2.4.1 實驗原理29-30
• 2.4.2 實驗方法的建立30
• 2.4.3 實驗可行性驗證30-31
• 2.4.4 微珠表面抗體結(jié)合率的測定31
• 2.4.5 芯片通道平行性驗證31-32
• 2.4.6 實驗條件的篩選及優(yōu)化32-33
• 2.4.7 癌胚抗原標(biāo)準(zhǔn)品的檢測33-34
• 2.4.8 人血清中癌胚抗原的檢測34-35
• 3 結(jié)果與討論35-48
• 3.1 實驗方法可行性驗證35-36
• 3.2 芯片通道平行性驗證36
• 3.3 微珠表面蛋白結(jié)合率36-37
• 3.4 實驗條件的篩選及優(yōu)化37-41
• 3.4.1 密度介質(zhì)的篩選37-39
• 3.4.2 通道傾斜角度的優(yōu)化39
• 3.4.3 離心轉(zhuǎn)速的優(yōu)化39-40
• 3.4.4 離心時間的優(yōu)化40-41
• 3.5 癌胚抗原標(biāo)準(zhǔn)品的含量測定41-42
• 3.6 人血清中癌胚抗原含量的測定42-48
• 結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-54
• 致謝54-55

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;癌胚抗原升高就是患了癌癥嗎[J];求醫(yī)問藥;2005年10期

2 馬立雄,吳京,沈馨;各類胸水中癌胚抗原水平的檢測[J];上海醫(yī)學(xué)檢驗雜志;2000年04期

3 潘宇紅,孫鈞銘,陳永偉,肖華龍;腫瘤特異性生長因子和癌胚抗原聯(lián)合檢測對肺癌的診斷價值[J];臨床檢驗雜志;2001年06期

4 李焰,李海渝,張平,彭德銀;肺癌患者80例癌胚抗原的測定與分析[J];中國航天工業(yè)醫(yī)藥;2001年03期

5 焦維克,薛青,鄧新宇,黃康健;血清腫瘤特異性生長因子與癌胚抗原聯(lián)合檢測對肺癌的診斷價值[J];中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2001年04期

6 李云貴,王曉懷,楊太成,賴晃文,江悅?cè)A;含不同啟動子的人癌胚抗原重組質(zhì)粒的構(gòu)建與表達(dá)[J];中國腫瘤臨床;2003年08期

7 陳繼紅;梁錦勝;彭杰文;;癌胚抗原血樣標(biāo)本對肺癌追蹤觀察1例[J];社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志;2006年09期

8 趙會民;張森;高楓;;癌胚抗原受體在非消化器官的表達(dá)及意義[J];重慶醫(yī)學(xué);2011年09期

9 Beatty JD;陳云富;;癌胚抗原的臨床價值[J];國外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊);1980年05期

10 耿稚江;腫瘤的標(biāo)志物——癌胚抗原[J];北京醫(yī)學(xué);1984年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 李曉鳳;彭樹萍;;消化系統(tǒng)惡性腫瘤血漿D-二聚體與癌胚抗原水平變化的臨床意義[A];第三屆中國腫瘤內(nèi)科大會教育集暨論文集[C];2009年

2 周海鷗;黃衛(wèi)平;王明山;;肺癌患者GM-CSF、CEA聯(lián)合檢測及臨床意義[A];浙江省免疫學(xué)會第五次學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2004年

3 劉書遜;江金霞;劉娟;夏夢;于益芝;曹雪濤;;攜帶人癌胚抗原(576-669段)和熱休克蛋白70樣分子融合基因的重組腺病毒治療腫瘤的實驗研究[A];第十三屆中國科協(xié)年會第18分會場-癌癥流行病趨勢和防控策略研討會論文集[C];2011年

4 吳佐周;賈山;陳希琳;司立瑩;張嘉慶;周未工;王燕玲;余力偉;彭勃;;大腸癌患者癌胚抗原的測定及意義[A];中西醫(yī)結(jié)合大腸肛門病診治新進(jìn)展——理論與實踐[C];2006年

5 杜婷娥;孟利利;毛勛;;基于棉線的鱗狀癌胚抗原即時診斷裝置的研究[A];中國化學(xué)會第29屆學(xué)術(shù)年會摘要集——第04分會：納米生物傳感新方法[C];2014年

6 李振甫;楊志;張宏;林保和;;癌胚抗原單抗的制備及免疫學(xué)性狀和動物體內(nèi)分布的研究[A];2000全國腫瘤學(xué)術(shù)大會論文集[C];2000年

7 李芳;伍新堯;羅超權(quán);;陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)自殺基因?qū)Π┡呖乖栃苑伟┑臍饔肹A];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會第八屆會員代表大會暨全國學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2001年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張禹;癌胚抗原是咋回事[N];家庭醫(yī)生報;2007年

2 湖南省腫瘤醫(yī)院主任醫(yī)師 唐石初;術(shù)后癌胚抗原升高警惕癌癥復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移[N];大眾衛(wèi)生報;2005年

3 文巧;癌胚抗原升高一定都是癌變嗎[N];衛(wèi)生與生活報;2003年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 戴盛明;新型高效Exosomes的制備及其誘導(dǎo)癌胚抗原特異性抗腫瘤免疫反應(yīng)的研究[D];浙江大學(xué);2005年

2 張帆;骨橋蛋白與癌胚抗原相關(guān)粘附分子5在舌癌組織中的表達(dá)及相關(guān)性研究[D];山東大學(xué);2012年

3 梁毓;影響廣西防城港地區(qū)漢族成年男性癌胚抗原水平的遺傳變異分析及其臨床意義探討[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 申方超;碳納米管—紙傳感器檢測癌胚抗原方法的建立[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

2 許玲玲;基于離心芯片的血清中癌胚抗原的含量檢測[D];大連理工大學(xué);2016年

3 王德舜;分子標(biāo)記物技術(shù)與傳感技術(shù)結(jié)合檢測癌胚抗原[D];電子科技大學(xué);2015年

4 馬俊芬;轉(zhuǎn)染人癌胚抗原真核表達(dá)質(zhì)粒的人樹突狀細(xì)胞的抗癌作用[D];鄭州大學(xué);2002年

5 勵逑元;肺癌外科癌胚抗原的臨床應(yīng)用研究[D];浙江大學(xué);2015年

6 MOHAMMED ALI CHOWDHURY;癌胚抗原-125和細(xì)胞間粘附分子-1共同作為肝硬化腹水的評價指標(biāo)[D];山東大學(xué);2014年

7 楊濤;癌胚抗原啟動子的活性研究[D];武漢大學(xué);2003年

8 韓忠;癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子1在肺癌組織的表達(dá)及其與血管生成的相關(guān)性研究[D];中南大學(xué);2007年

  本文關(guān)鍵詞：基于離心芯片的血清中癌胚抗原的含量檢測，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：500219