本文關鍵詞：PRMT2對乳腺癌MDA-MB-231細胞侵襲與遷移的影響及機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討蛋白精氨酸甲基轉移酶.2(protein.arginine.methyltransferase.2,PRMT2)對人乳腺癌細胞MDA-MB-231侵襲與遷移的影響及可能的機制。方法:將構建好的真核表達載體瞬時轉染至MDA-MB-231細胞,Western Blot檢測EMT相關蛋白的表達,觀察PRMT2對乳腺癌MDA-MB-231細胞侵襲與遷移的影響;建立PRMT2高表達的穩(wěn)定細胞系MDA-MB-231-PRMT2,顯微鏡觀察PRMT2高表達后細胞形態(tài)的變化,Transwell及劃痕實驗檢測PRMT2高表達對細胞侵襲及遷移能力的影響,Western Blot檢測EMT相關蛋白的表達,進一步驗證和分析PRMT2對MDA-MB-231細胞侵襲與遷移的影響;蛋白質芯片技術檢測PRMT2影響細胞的可能信號通路,Western Blot檢測通路相關蛋白的表達,初步探討PRMT2影響乳腺癌MDA-MB-231細胞侵襲與遷移的機制。結果:1.Western Blot結果顯示PRMT2瞬時高表達后E-cadherin的表達水平下調(p0.05),Slug和Vimentin的表達水平上調(p0.05);PRMT2瞬時低表達后E-cadherin的表達水平上調(p0.05),Slug和Vimentin的表達水平下調(p0.05)。2.PRMT2穩(wěn)定高表達后,顯微鏡觀察到明顯的形態(tài)變化,Transwell實驗表明四環(huán)素誘導組細胞侵襲率較無四環(huán)素誘導組增加(p0.001),劃痕實驗顯示細胞遷移率無明顯改變(p0.05),對EMT相關蛋白表達水平的影響均與瞬時轉染的結果一致。3.蛋白質芯片結果提示Wnt/β-catenin可能為PRMT2影響細胞侵襲與遷移的信號通路,且磷酸化GSK-3β(Ser9)表達上調(p0.05),磷酸化β-catenin表達下調(p0.05)。結論:1.PRMT2促進乳腺癌MDA-MB-231細胞EMT形成。2.PRMT2促進乳腺癌MDA-MB-231細胞侵襲。3.PRMT2通過調控磷酸化β-catenin的表達而影響乳腺癌MDAMB-231細胞侵襲與遷移。
【關鍵詞】：乳腺癌細胞 蛋白精氨酸甲基轉移酶2 侵襲 遷移
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-13
• 第1章 引言13-15
• 第2章 實驗材料15-21
• 2.1 實驗載體15
• 2.2 實驗細胞15
• 2.3 實驗試劑15-16
• 2.4 實驗儀器和設備16-17
• 2.5 主要試劑的配制17-21
• 第3章 實驗方法21-29
• 3.1 細胞培養(yǎng)及處理21
• 3.2 細胞瞬時轉染21-23
• 3.3 Western blot23-25
• 3.4 細胞形態(tài)觀察及圖像采集25
• 3.5 Transwell及劃痕實驗25-26
• 3.6 蛋白質芯片26-27
• 3.7 數據統(tǒng)計及分析27-29
• 第4章 實驗結果29-37
• 4.1 PRMT2瞬時高表達及低表達對乳腺癌MDA-MB-231細胞侵襲與遷移的影響29-31
• 4.2 PRMT2穩(wěn)定高表達對乳腺癌MDA-MB-231細胞侵襲與遷移的影響31-35
• 4.3 PRMT2穩(wěn)定高表達后影響乳腺癌MDA-MB-231細胞侵襲與遷移的機制研究35-37
• 第5章 討論37-41
• 第6章 實驗結論41-43
• 參考文獻43-47
• 綜述47-57
• 參考文獻52-57
• 科研成果57-58
• 致謝58

【共引文獻】

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