本文關(guān)鍵詞：JNK1與VDR的相互作用及其對(duì)Vit D介導(dǎo)的抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景Vit D(Vitamin D)是一種用于腫瘤預(yù)防的藥物,在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中通過(guò)VDR(Vitamin D receptor)來(lái)阻止結(jié)腸癌腫瘤的發(fā)生。有研究顯示,應(yīng)激活化蛋白激酶c-JNKs(c-Jun NH2-terminal kinases)和p38共同作用激活VDR,并增強(qiáng)Vit D介導(dǎo)的對(duì)乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。本課題旨在研究在結(jié)腸癌細(xì)胞中Vit D介導(dǎo)的對(duì)癌細(xì)胞增殖的抑制作用是否和JNK1相關(guān)。目的以人結(jié)腸癌細(xì)胞HT29和從JNK1-/-小鼠模型中提取的腸上皮細(xì)胞和MEFs(mouse embryonic fibroblasts)為研究對(duì)象,探討Vit D通過(guò)VDR對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞增殖所起的抑制作用是否與JNK1有關(guān),進(jìn)而為進(jìn)一步研究人結(jié)腸癌防治方法提供科學(xué)依據(jù)。方法1.用Vit D3的一種活性物質(zhì)鈣三醇培養(yǎng)人結(jié)腸癌細(xì)胞HT29后,通過(guò)MTS實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞技術(shù)分析,檢測(cè)Vit D3對(duì)細(xì)胞增殖和周期的影響。2.分離JNK1-/-(JNK1 knockout)和JNK1+/+(JNK1 wild type)小鼠的腸上皮細(xì)胞,再?gòu)姆蛛x得到的腸上皮細(xì)胞中提取蛋白,通過(guò)western blotting檢測(cè)其中的VDR蛋白的表達(dá)水平。3.在JNK1-/-小鼠的MEFs中轉(zhuǎn)染VDR Ex4-luc報(bào)告質(zhì)粒,通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因活性分析檢測(cè)VDR報(bào)告基因的活性。4.在體外實(shí)驗(yàn)中,向JNK1-/-MEFs中轉(zhuǎn)染pcDNA3-Flag-MKK7-JNK1質(zhì)粒,過(guò)表達(dá)p-JNK1(phosphorylated JNK1,JNK1的一種活化形式),通過(guò)western blotting和熒光素酶報(bào)告基因活性分析分別檢測(cè)VDR的表達(dá)水平及轉(zhuǎn)錄活性。5.將帶pDs-Red標(biāo)簽的JNK1表達(dá)質(zhì)粒和帶GFP標(biāo)簽的VDR表達(dá)質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染至HEK293細(xì)胞中,48h后經(jīng)過(guò)處理,置于共聚焦顯微鏡下觀察,檢測(cè)JNK1與VDR是否共定位。6.將敲低JNK1的siRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)入HT29細(xì)胞中,再用鈣三醇作用于HT29細(xì)胞和JNK1-/-MEFs,通過(guò)活力細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)檢測(cè)敲除JNK1對(duì)鈣三醇抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增殖作用的影響。結(jié)果1.MTS實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞技術(shù)分析結(jié)果顯示:鈣三醇能夠顯著抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增殖并引起細(xì)胞周期停滯,鈣三醇對(duì)細(xì)胞的這種作用與磷酸化水平升高的JNK1有關(guān)。2.western blotting結(jié)果顯示:與JNK1+/+小鼠的腸上皮細(xì)胞相比,JNK1-/-小鼠的腸上皮細(xì)胞中VDR的表達(dá)水平顯著下降。3.熒光素酶報(bào)告基因活性分析結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,VDR的報(bào)告基因活性也有所下降。4.western blotting和熒光素酶報(bào)告基因活性分析結(jié)果顯示:過(guò)表達(dá)p-JNK1能夠上調(diào)VDR的表達(dá)水平和轉(zhuǎn)錄活性。5.共定位結(jié)果顯示:JNK1與VDR在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中可以共定位,且二者結(jié)合在一起。6.活力細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果顯示:敲除細(xì)胞中的JNK1和JNK1-/-MEFs中JNK1的表達(dá)缺失,都可以減弱鈣三醇對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的抑制作用。結(jié)論JNK1在結(jié)構(gòu)和功能上與VDR相互作用,可以明確地是,JNK1可以在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上正向調(diào)節(jié)VDR的表達(dá),且二者之間的這種相互作用可以影響鈣三醇對(duì)癌細(xì)胞增殖的抑制作用。
【關(guān)鍵詞】：結(jié)腸癌 JNK1 VDR 增殖 細(xì)胞周期
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.35
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-11
• 1 材料與方法11-23
• 2 結(jié)果23-30
• 3 討論30-32
• 4 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-37
• 綜述 JNK1與VDR的研究進(jìn)展37-55
• 參考文獻(xiàn)46-55
• 附錄 英文縮略詞55-57
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況57-59
• 致謝59-60
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷60

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 ;橄欖油防結(jié)腸癌[J];安徽科技;2000年10期

2 鄭應(yīng)芳;結(jié)腸癌誤診8例報(bào)道[J];安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2000年06期

3 馮智;結(jié)腸癌并發(fā)急腹癥16例誤診分析[J];包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年04期

4 馬致祥;22例結(jié)腸癌誤診觀察[J];蘭州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年04期

5 李祁新;結(jié)腸癌誤診闌尾炎7例分析[J];農(nóng)墾醫(yī)學(xué);2000年01期

6 陳偉輝;103例結(jié)腸癌臨床分析[J];中國(guó)基層醫(yī)藥;2000年01期

7 鄭應(yīng)芳,鄒慧民;結(jié)腸癌誤診8例報(bào)道[J];河南外科學(xué)雜志;2000年02期

8 ;蔬菜水果不能降低結(jié)腸癌危險(xiǎn)[J];浙江中醫(yī)雜志;2001年03期

9 陳友恒;12例老年人結(jié)腸癌誤診闌尾膿腫原因分析[J];福建醫(yī)藥雜志;2001年04期

10 Aloys LA,廖小燕,常元?jiǎng)?紅肉與結(jié)腸癌[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊(cè));2001年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張?bào)w嶺;王琳;;急診以闌尾炎為首發(fā)癥狀的結(jié)腸癌(附11例分析)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)第五次急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];1994年

2 Paulo M.Hoff;;結(jié)腸癌化療的最新進(jìn)展(英文)[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)內(nèi)鏡醫(yī)師分會(huì)成立大會(huì)、中國(guó)第十四屆內(nèi)鏡醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)、《中國(guó)內(nèi)鏡雜志》創(chuàng)刊十周年學(xué)術(shù)討論會(huì)、恩德思獎(jiǎng)（Endoscopics Award）頒獎(jiǎng)大會(huì)論文匯編(一)[C];2005年

3 梁忠炎;張勻;陳作兵;陳中華;郭豐;高原;周永慶;;以急腹癥為表現(xiàn)的結(jié)腸癌72例診療分析[A];2007年浙江省急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

4 劉敏;顧婧;張晶;申秀錦;鄧紅;;結(jié)腸癌的傅立葉紅外光譜分析[A];2009年浙江省病理學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

5 張瑜;王磊;郭繼中;;結(jié)腸癌的早期診斷[A];第二十二屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議暨消化疾病診治進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2010年

6 張立春;;合并闌尾炎的結(jié)腸癌誤診分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)急診醫(yī)學(xué)分會(huì)第十三次全國(guó)急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)大會(huì)論文集[C];2010年

7 岳亞軍;韓元媛;溫巧生;;左右側(cè)結(jié)腸癌的臨床病理比較[A];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2003年

8 張國(guó)富;趙菊環(huán);;結(jié)腸癌內(nèi)瘺的臨床及影像學(xué)診斷[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三屆全國(guó)放射學(xué)大會(huì)論文匯編（下冊(cè)）[C];2006年

9 李天天;;結(jié)腸癌患者住院費(fèi)用影響因素分析[A];全國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

10 王建軍;楊培金;李樹(shù)金;張永生;;螺旋CT掃描對(duì)結(jié)腸癌的診斷價(jià)值[A];第八屆全國(guó)腫瘤介入診療學(xué)術(shù)大會(huì)、第一屆中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)腫瘤介入學(xué)護(hù)理專業(yè)學(xué)組會(huì)議暨國(guó)家級(jí)介入診療繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班、腫瘤介入治療新進(jìn)展研討會(huì)論文匯編[C];2007年

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1 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院教授 羅學(xué)宏;警惕藏在闌尾炎身后的結(jié)腸癌[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2007年

2 北京大學(xué)腫瘤醫(yī)院外科教授 顧晉邋李明;50歲起 定期篩查結(jié)腸癌[N];健康報(bào);2007年

3 記者 鄭曉春;結(jié)腸癌與染色體變異有關(guān)[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

4 顧鋼;早期診斷結(jié)腸癌可免去手術(shù)[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

5 王增;貪吃容易引發(fā)結(jié)腸癌[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2008年

6 方留民;喝牛奶可減少結(jié)腸癌[N];中國(guó)食品質(zhì)量報(bào);2002年

7 東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院腫瘤中心主任 李蘇宜 吳葉青 程守勤整理;腹瀉和便秘交替警惕結(jié)腸癌[N];健康報(bào);2009年

8 本報(bào)記者 唐夏;李明：養(yǎng)成良好飲食習(xí)慣預(yù)防結(jié)腸癌[N];中國(guó)消費(fèi)者報(bào);2010年

9 阿明;結(jié)腸癌為何“掛羊頭賣狗肉”？[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2004年

10 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院急診科 教授 羅學(xué)宏;急性闌尾炎與結(jié)腸癌[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2009年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 高會(huì)杰;整合素ανβ6與ERK-ETS1信號(hào)通路在調(diào)控結(jié)腸癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

2 郭松佳;地皮菜水應(yīng)激蛋白的制備及其抗結(jié)腸癌效應(yīng)研究[D];山西大學(xué);2015年

3 李曉琴;磁共振動(dòng)態(tài)增強(qiáng)和彌散加權(quán)成像評(píng)估結(jié)腸癌裸鼠皮下移植瘤抗腫瘤治療效果的實(shí)驗(yàn)研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2016年

4 王錫明;多層螺旋CT在結(jié)腸癌診斷和分期中的臨床應(yīng)用[D];山東大學(xué);2005年

5 邱培菊;5-羥基多甲氧基黃酮抗結(jié)腸癌活性及其分子機(jī)制研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2010年

6 張蒂;跨膜型腫瘤壞死因子-a單克隆抗體治療結(jié)腸癌的實(shí)驗(yàn)研究[D];武漢大學(xué);2013年

7 張振亞;白細(xì)胞介素21抑制結(jié)腸癌生長(zhǎng)的相關(guān)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

8 張青松;5’-甲基硫代腺苷對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡的影響及其相關(guān)機(jī)制的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

9 趙會(huì)民;癌胚抗原對(duì)結(jié)腸癌進(jìn)展作用機(jī)制的初步研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

10 朱洪波;腺病毒介導(dǎo)的Bcl-XL shRNA治療結(jié)腸癌的研究[D];浙江大學(xué);2008年

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1 劉震;光動(dòng)力療法對(duì)結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞的殺傷作用及其機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 張慧;TRPV5、TRPV6對(duì)結(jié)腸癌SW480細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2015年

3 王渭倉(cāng);REGγ在結(jié)腸癌中生理作用及分子機(jī)制的研究[D];華東師范大學(xué);2014年

4 吳曉冰;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)結(jié)腸癌進(jìn)展及AMPK/mTOR介導(dǎo)NF-κB信號(hào)通路對(duì)其調(diào)節(jié)作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2016年

5 古麗巴哈·耐買提（Gulbahar·namat）;DCE-MRI評(píng)價(jià)結(jié)腸癌裸鼠藥物療效效能的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2016年

6 賀龍梅;1、蛋白酶活化受體2（PAR_2）活化YAP的分子機(jī)制及生物學(xué)功能研究 2、MicroRNA-181b在炎性結(jié)腸癌發(fā)展過(guò)程中的表達(dá)變化[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

7 朱建平;中藥聯(lián)合化療對(duì)結(jié)腸癌治療作用的Meta分析[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2016年

8 伍秋香;冬凌草甲素抑制HCT116細(xì)胞增殖與PTEN的關(guān)系研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

9 衡甜甜;開(kāi)腹和腹腔鏡結(jié)腸癌完整系膜切除術(shù)的臨床應(yīng)用研究[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2016年

10 劉鵬;乳桿菌菌株抑制結(jié)腸癌腺細(xì)胞HT-29細(xì)胞增殖的菌體功能分子研究[D];大連工業(yè)大學(xué);2016年

  本文關(guān)鍵詞：JNK1與VDR的相互作用及其對(duì)Vit D介導(dǎo)的抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：465529