本文關(guān)鍵詞：GPER信號(hào)通路在雌激素誘導(dǎo)乳腺上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察17-β雌二醇(17β-estradiol,E2)和G1誘導(dǎo)乳腺上皮細(xì)胞MCF-10A轉(zhuǎn)化和局部黏著斑激酶(Focal adhesion kinase,FAK)表達(dá)變化,以及G蛋白偶聯(lián)受體(G protein coupled estrogen receptor,GPER)在上述效應(yīng)中的介導(dǎo)作用,深入探討雌激素生物學(xué)作用的信號(hào)機(jī)制,為臨床上探索預(yù)防乳腺癌的高效方法提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:以雌激素受體(Estrogen receptor,ER)陰性、GPER陽(yáng)性MCF-10A乳腺癌細(xì)胞為研究模型,分為DMSO(對(duì)照)、E2、G1、G15、E2+G15、G1+G15六個(gè)組,連續(xù)處理模型細(xì)胞11個(gè)處理周期,建立轉(zhuǎn)化細(xì)胞模型。采用蛋白印跡法檢測(cè)蛋白表達(dá)變化、軟瓊脂集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞非貼壁依賴集落形成能力、傷口愈合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移、MTT法觀察細(xì)胞生長(zhǎng)、siRNA沉默靶基因表達(dá)、qRT-PCR檢測(cè)目的基因mRNA表達(dá)水平。結(jié)果:1)E2和G1連續(xù)刺激MCF-10A細(xì)胞11代后,細(xì)胞生長(zhǎng)速度明顯增快(與對(duì)照組相比,E2和G1組分別增加40.64%和39.05%,**P0.01)、接觸抑制性消失(細(xì)胞胞體變大、呈梭形生長(zhǎng)、增殖速度加快);細(xì)胞遷移顯著增快(48 h時(shí),與對(duì)照組相比,E2組和G1組細(xì)胞遷移率分別增加100.02%和100.78%,**P0.01),圖3A);與對(duì)照組相比,E2組G1組軟瓊脂集落形成率分別增加173.08%和153.85%,**P0.01,圖3B);2)E2和G1上調(diào)GPER在乳腺上皮細(xì)胞MCF-10A中的蛋白及mRNA表達(dá),與對(duì)照組相比,E2組、G1組GPER蛋白表達(dá)分別上調(diào)109.58%(**P0.01)和60.55%(*P0.05);與對(duì)照組相比,E2組GPER mRNA表達(dá)上調(diào)117.83%(*P0.05)。3)GPER抑制劑G15可逆轉(zhuǎn)E2和G1誘導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化,表現(xiàn)為生長(zhǎng)速度降低、細(xì)胞接觸抑制、遷移減慢、軟瓊脂集落形成率低;4)E2和G1可誘導(dǎo)FAK的表達(dá),該效應(yīng)可被G15明顯抑制;siRNA沉默F(xiàn)AK可使E2轉(zhuǎn)化細(xì)胞遷移降低22.61%(**P0.01)。結(jié)論:E2和G1均可誘導(dǎo)MCF-10A乳腺上皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)化;E2和G1可上調(diào)GPER的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平;E2誘導(dǎo)MCF-10A細(xì)胞轉(zhuǎn)化與GPER信號(hào)通路有關(guān),而FAK可能在GPER下游發(fā)揮作用。
【關(guān)鍵詞】：雌激素 轉(zhuǎn)化 G蛋白偶聯(lián)雌激素受體 乳腺上皮細(xì)胞 局部黏著斑激酶
【學(xué)位授予單位】：貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.9
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• 英文摘要5-8
• 略縮詞表8-9
• 引言9-11
• 材料與方法11-25
• 結(jié)果25-37
• 討論37-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-44
• 綜述44-51
• 參考文獻(xiàn)49-51
• 作者簡(jiǎn)歷51-52
• 致謝52-53
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集53

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1 秦宜德,鄒思湘;乳腺上皮細(xì)胞的特殊粘蛋白MUC1[J];生物學(xué)雜志;1999年02期

2 楊淋清;羅凌鳳;黃海燕;吳德生;崔棟;周麗;林曉陽(yáng);劉建軍;張文昌;莊志雄;;低劑量雙酚A及其與苯并芘聯(lián)合染毒對(duì)人乳腺上皮細(xì)胞MDM2基因的影響[J];毒理學(xué)雜志;2014年03期

3 王卓然;侯曉明;曲波;王杰;高學(xué)軍;李慶章;;Pten對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞活力及乳蛋白合成的影響[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2014年04期

4 宋紅芹,孫懷昌,許益民,王寶安;SV40T基因轉(zhuǎn)化的山羊乳腺上皮細(xì)胞系及其生物學(xué)特性[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2003年04期

5 楊莉;李陽(yáng);朱筑霞;王旭東;;FAK在雌激素誘導(dǎo)MCF-10A乳腺上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化中的表達(dá)及其意義[J];重慶醫(yī)學(xué);2013年20期

6 曾濤;吳坤河;;Kin17表達(dá)促進(jìn)乳腺上皮細(xì)胞MCF-10A增殖[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2013年05期

7 莫繼先;佟慧麗;張莉;王青竹;高學(xué)軍;;牛初乳IGF-Ⅰ對(duì)體外培養(yǎng)人乳腺上皮細(xì)胞系HBL-100影響的研究[J];藥物生物技術(shù);2008年06期

8 田雷;李慶章;張莉;;牛αS1酪蛋白5′調(diào)控序列驅(qū)動(dòng)報(bào)告基因LacZ在奶山羊乳腺上皮細(xì)胞中的表達(dá)[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2007年09期

9 殷曙東,錢(qián)倩,程寶庚,周q

本文編號(hào)：443420