miR-217通過靶向14-3-3γ抑制胃癌轉(zhuǎn)移的作用及機(jī)制研究
發(fā)布時間:2017-05-30 12:00
本文關(guān)鍵詞:miR-217通過靶向14-3-3γ抑制胃癌轉(zhuǎn)移的作用及機(jī)制研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:探討miRNA-217(miR-217)抑制胃癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的作用及其機(jī)制。了解miR-217在胃癌細(xì)胞和組織中的表達(dá)水平,和對胃癌細(xì)胞遷移、增殖及侵襲力的影響。方法:qRT-PCR法比較胃癌組織、癌旁組織、人胃癌細(xì)胞系(AGS、MKN28、SGC7901、BGC823、MKN45)和正常胃粘膜上皮細(xì)胞系(GES)中miR-217的表達(dá)差異。轉(zhuǎn)染miR-217 mimics或Inhibitors后,通過Transwell侵襲實(shí)驗觀察mi R-217的胃癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響;應(yīng)用Millipore Transwell小室法檢測胃癌細(xì)胞的侵襲及遷移能力,建立裸鼠尾靜脈轉(zhuǎn)移模型,觀察穩(wěn)定表達(dá)miR-217在體內(nèi)對胃癌轉(zhuǎn)移能力的影響;生物信息學(xué)分析miR-217的候選靶基因為14-3-3γ,熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測SGC7901細(xì)胞中miR-217過表達(dá)對野生型和突變型14-3-3γ熒光素酶活性的影響。Western blot檢測miR-217對14-3-3γ野生型和突變體蛋白表達(dá)的影響。統(tǒng)計學(xué)分析應(yīng)用t檢驗。結(jié)果:1.qRT-PCR檢測miR-217在20對胃癌及癌旁組織中的表達(dá):miR-217在胃癌組織中的表達(dá)明顯低于癌旁組織(P0.05);qRT-PCR檢測miR-217在胃癌細(xì)胞系和正常胃癌上皮細(xì)胞中的表達(dá):在各胃癌細(xì)胞中的表達(dá)量相對于正常胃上皮細(xì)胞GES顯著降低(P0.05)。mi R-217mimics顯著抑制SGC7901細(xì)胞的侵襲能力,與陰性對照的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。而mi R-217 inhibitors顯著促進(jìn)SGC7901細(xì)胞的侵襲能力(P0.01);體內(nèi)實(shí)驗發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定過表達(dá)miR-217的SGC7901細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力明顯降低。熒光素酶報告基因結(jié)果證實(shí)miR-217能夠抑制14-3-3γ的3’-UTR區(qū)熒光素酶活性;Western blot結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染miR-217后,SGC7901細(xì)胞中的14-3-3γ蛋白水平明顯低于對照組;Western blotting結(jié)果顯示miR-217過表達(dá)顯著抑制14-3-3γ-wt,而不能抑制14-3-3γ-mut的蛋白表達(dá)。結(jié)論:在胃細(xì)胞和組織中,mi R-217是一個抑制性mi RNA,表達(dá)水平下調(diào)影響胃癌的發(fā)生及發(fā)展,將可能成為胃癌生物靶向治療的新靶點(diǎn)。miR-217能夠通過靶向14-3-3γ抑制胃癌轉(zhuǎn)移,促進(jìn)mi R-217的表達(dá)或抑制14-3-3γ的表達(dá)可能是抑制胃癌轉(zhuǎn)移的有效手段。
【關(guān)鍵詞】:胃癌 轉(zhuǎn)移 微小RNA 微小RNA-217 14-3-3γ
【學(xué)位授予單位】:西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R735.2
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- 英文摘要6-8
- 前言8-10
- 材料與方法10-20
- 結(jié)果20-26
- 討論26-33
- 結(jié)論33-34
- 參考文獻(xiàn)34-37
- 英文縮略詞對照表37-38
- 致謝38-39
- miRNA-217在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展(綜述)39-46
- 參考文獻(xiàn)44-46
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 劉中娟;張瑞麗;劉娟娟;高學(xué)慧;秦緒珍;郭子建;;多種血清腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測對胃癌輔助診斷的研究[J];標(biāo)記免疫分析與臨床;2016年01期
2 盧燕華;唐三元;;miR-217靶向MAPK1抑制胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移作用研究[J];中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志;2014年11期
本文關(guān)鍵詞:miR-217通過靶向14-3-3γ抑制胃癌轉(zhuǎn)移的作用及機(jī)制研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:407036
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