血清堿性磷酸酶（ALP）是與前列腺癌、骨骼、肝功能障礙、糖尿病等多種疾病密切相關(guān)的重要生物標(biāo)志物。它還是一種功能酶,能夠?qū)?yīng)底物去磷酸化,即通過水解磷酸酯鍵將底物分子上的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)換為磷酸根離子和羥基。血清甲胎蛋白（AFP）是診斷原發(fā)性肝癌的特異性血清標(biāo)志物。由于這些腫瘤標(biāo)志物的具有重要醫(yī)學(xué)意義,開發(fā)快速、靈敏的AFP檢測方法具有重要意義。熒光素是一種高效的小分子模擬酶,在可見光下可以迅速的催化3,3′,5,5′-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）氧化,發(fā)生顯色反應(yīng)。本文通過改變熒光素的官能團(tuán)、合成配合物納米顆粒（CNPs）以及構(gòu)建金屬有機(jī)框架免疫復(fù)合物等策略調(diào)控?zé)晒馑氐墓獯呋富钚?實現(xiàn)了血清中ALP和AFP的檢測。該方法檢測線性范圍廣、特異性好、儀器設(shè)備簡單,為臨床醫(yī)學(xué)提供了前景。此外,該方法不僅證明了熒光素光催化活性與其分子結(jié)構(gòu)密切相關(guān),某些金屬離子(如Cu²⁺)能夠抑制其酶活性。揭示Cu²⁺抑制熒光素模擬酶活性的機(jī)理為酶活性抑制劑的篩選提供了思路。研究內(nèi)容有以下幾個方面:（1）基于熒光素的光誘導(dǎo)氧化酶活性比色檢測ALP和AFP本文選取熒光素二磷酸...

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮寫符號對照表
第1章 緒論
    1.1 腫瘤標(biāo)志物概述
    1.2 腫瘤標(biāo)志物的檢測方法
        1.2.1 化學(xué)發(fā)光免疫分析
        1.2.2 酶聯(lián)免疫吸附實驗
        1.2.3 免疫傳感器
    1.3 腫瘤標(biāo)志物的檢測信號
    1.4 目標(biāo)信號放大策略
    1.5 背景信號降低策略
    1.6 本論文的研究內(nèi)容及意義
第2章 基于熒光素的光誘導(dǎo)氧化酶活性比色檢測ALP和 AFP
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 試劑與儀器
        2.2.2 緩沖溶液和抗體溶液的配制
        2.2.3 ALP活性的檢測
        2.2.4 AFP活性測定
        2.2.5 臨床血清樣本的獲取與處理
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 比色檢測ALP的可行性
        2.3.2 反應(yīng)條件優(yōu)化
        2.3.3 ALP的檢測性能
        2.3.4 ALP檢測的選擇性
        2.3.5 比色免疫檢測AFP的分析性能
        2.3.6 人血清樣品中AFP的測定
    2.4 結(jié)論
第3章 基于雙鎖策略減少背景信號高靈敏檢測ALP和 AFP
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 試劑與儀器
        3.2.2 Ce-FDP CNPs的制備
        3.2.3 ALP活性的檢測
        3.2.4 AFP的免疫分析
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 Ce-FDP CNPs的制備與表征
        3.3.2 ALP傳感的可行性
        3.3.3 優(yōu)化反應(yīng)條件
        3.3.4 ALP的分析性能
        3.3.5 AFP傳感原理及測試性能
        3.3.6 人血清樣品中AFP的檢測
    3.4 結(jié)論
第4章 雙功能抗體及銅有機(jī)框架納米復(fù)合材料用于超靈敏檢測AFP
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 試劑與儀器
        4.2.2 Cu²⁺抑制熒光素的光誘導(dǎo)氧化酶活性
        4.2.3 電子自旋共振(EPR)實驗
        4.2.4 Cu-MOF的制備
        4.2.5 Ab2@Cu-MOF制備
        4.2.6 基于Ab2@Cu-MOF檢測AFP
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 用Cu²⁺調(diào)控?zé)晒馑氐墓庹T導(dǎo)氧化酶活性及其機(jī)制探究
        4.3.2 Cu²⁺檢測性能
        4.3.3 Cu-MOF和 Ab2@Cu-MOF的設(shè)計原理和表征
        4.3.4 Ab2@Cu-MOF免疫法檢測AFP的性能和選擇性
        4.3.5 測定人血清樣品中的AFP
    4.4 結(jié)論
第5章 全文總結(jié)與展望
    5.1 全文總結(jié)
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
碩士期間已發(fā)表的研究成果
致謝



本文編號：4045759