慢病毒載體是基因治療的重要基因轉(zhuǎn)導(dǎo)工具,在嵌合抗原受體(Chimeric Antigen Receptor,CAR)T細(xì)胞治療血液腫瘤中發(fā)揮著極其重要的作用。制備高質(zhì)量CAR-T細(xì)胞的先決條件是獲得高滴度的慢病毒,而高滴度的實(shí)現(xiàn)離不開濃縮步驟。其中,超速離心(超離)和超濾是兩種潛在的可選濃縮方法。為探究超離和超濾兩種濃縮方法在制備科研級(jí)CAR-T時(shí)的效率和對(duì)病毒的活力影響,該研究選擇GFP和CD19 CAR(CAR19)-mCherry兩種質(zhì)粒包裝病毒,并對(duì)兩種方法產(chǎn)生的病毒滴度和回收率進(jìn)行比較。結(jié)果顯示,超濾產(chǎn)生的慢病毒滴度最高達(dá)到1011 TU/mL,顯著高于超離法產(chǎn)生的慢病毒滴度(P<0.05),同時(shí)超濾的回收效率也更高。該結(jié)果可為科研級(jí)CAR慢病毒的濃縮方法提供直接的理論參考依據(jù),有助于CAR-T基礎(chǔ)研究的順利開展。

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