目的:肝細(xì)胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)是一種常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤。多數(shù)肝癌患者在確診時(shí)已達(dá)疾病晚期,失去最佳手術(shù)切除時(shí)機(jī)。索拉菲尼是一種多靶點(diǎn)激酶抑制劑,是目前國(guó)內(nèi)外使用較多的晚期HCC靶向藥之一。許多因素會(huì)導(dǎo)致肝癌耐藥,其中一個(gè)重要因素就是自噬的激活。自噬不僅可以通過抑制腫瘤的能量代謝、增殖和轉(zhuǎn)移,抑制腫瘤的進(jìn)程。同時(shí)也有助于維持腫瘤細(xì)胞產(chǎn)物合成及代謝的平衡,是缺乏營(yíng)養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞獲取能量的主要代謝機(jī)制。其中自噬相關(guān)基因(Autophagy-related genes,ATGs)發(fā)揮了重要的調(diào)控作用。微RNA(microRNA,miRNA)可通過與mRNA的3’UTRs(Untranslated Regions)端近乎完全互補(bǔ)性的結(jié)合,從而在基因表達(dá)中起著至關(guān)重要的調(diào)控作用。本研究針對(duì)miR-375靶向結(jié)合ATG14影響肝癌細(xì)胞對(duì)索拉菲尼的敏感性的機(jī)制展開了一系列研究,逐步揭示miR-375調(diào)控自噬從而影響肝癌細(xì)胞對(duì)索拉菲尼敏感性的分子機(jī)制,為肝癌治療以及對(duì)治療藥物再敏感提供理論依據(jù)。研究方法:1.利用GEO數(shù)據(jù)庫(kù)、KEGG基因富集分析等生物信息學(xué)方...

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.KEGG分析富集結(jié)果顯示GSE109211肝癌組

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文173結(jié)果3.1KEGG富集分析肝癌組織中索拉菲尼與自噬的相關(guān)性為了驗(yàn)證肝癌組織樣本中索拉菲尼與自噬的相關(guān)性，我們從GEO數(shù)據(jù)庫(kù)中獲取GSE109211數(shù)據(jù)：索拉菲尼處理67例患者樣本，安慰劑處理73例患者樣本。我們歸納總結(jié)了10個(gè)目前被認(rèn)為參與細(xì)胞內(nèi)部活....

圖2.索拉菲尼藥物處理后自噬表達(dá)增多A.westernbolt顯示索拉菲尼處理Huh7細(xì)胞系之后LC3-II/LC3-I比率提高，蛋白p62表達(dá)降低（P＜0.05）

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文18現(xiàn)其自噬小體增多（圖2C）。這三種實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，索拉菲尼能夠誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞自噬的發(fā)生。圖2.索拉菲尼藥物處理后自噬表達(dá)增多A.westernbolt顯示索拉菲尼處理Huh7細(xì)胞系之后LC3-II/LC3-I比率提高，蛋白p62表達(dá)降低（P＜0.05）。B....

圖3.抑制自噬肝癌細(xì)胞的增殖凋亡表現(xiàn)A.采用MTT法測(cè)定加入Baf-A1和si-ULK后索拉菲尼處理Huh7細(xì)胞的相對(duì)存活率

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文19實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，使用Baf-A1加索拉菲尼處理組中的Q2+Q4區(qū)域紅色光點(diǎn)分布增多，說明凋亡增多（圖3C）。我們發(fā)現(xiàn)經(jīng)自噬抑制劑和小干擾RNA處理后，增殖明顯減少，凋亡明顯變多。這些結(jié)果都說明，阻斷自噬之后，索拉菲尼對(duì)HCC的生長(zhǎng)抑制作用更明顯。圖3.抑....

圖4.miR-375抑制索拉菲尼誘導(dǎo)的自噬A.R語言顯示了miRNA的表達(dá)熱圖

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文21圖4.miR-375抑制索拉菲尼誘導(dǎo)的自噬A.R語言顯示了miRNA的表達(dá)熱圖。B.RT-PCR用于評(píng)估索拉菲尼處理Huh7細(xì)胞中相關(guān)的miRNA水平。C.KEGG富集分析結(jié)果顯示miR-375在肝細(xì)胞癌中低表達(dá)且與自噬呈相關(guān)性。D.對(duì)照組、索拉菲尼處....

本文編號(hào)：4026432