目的:探討晚期糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycation end products,AGEs)對結(jié)直腸癌HCT116細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化及腫瘤細(xì)胞干性的影響,及其可能的作用機制。方法:200μg/mL AGEs和200μg/mL AGEs聯(lián)合50μmol/L磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)特異性抑制劑LY294002處理HCT116細(xì)胞后,分別應(yīng)用CCK-8法、劃痕愈合實驗、Transwell小室法、克隆形成實驗和腫瘤細(xì)胞成球?qū)嶒灆z測HCT116細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲、克隆形成和細(xì)胞成球能力。200μg/mL AGEs和200μg/mL AGEs聯(lián)合50μmol/L LY294002處理HCT116細(xì)胞球后,應(yīng)用Transwell小室法檢測細(xì)胞的侵襲能力,FCM法檢測CD133+細(xì)胞球所占比例,蛋白質(zhì)印跡法檢測HCT116細(xì)胞球中CD133、基質(zhì)金屬蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9蛋白的表達(dá)。不同濃度AGEs、200μg/mL AGEs和200μg/mL AGEs聯(lián)合...

【文章頁數(shù)】：11 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要材料
    1.2 細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 CCK-8法檢測AGEs對HCT116細(xì)胞增殖的影響
    1.4 劃痕愈合實驗檢測AGEs對HCT116細(xì)胞遷移能力的影響
    1.5 Transwell小室法檢測AGEs對HCT116細(xì)胞侵襲能力的影響
    1.6 克隆形成實驗檢測AGEs對HCT116細(xì)胞克隆形成能力的影響
    1.7 腫瘤細(xì)胞球形成實驗檢測AGEs對HCT116細(xì)胞成球能力的影響
    1.8 Transwell小室法檢測AGEs對HCT116細(xì)胞球侵襲能力的影響
    1.9 FCM法檢測AGEs對HCT116細(xì)胞球表面CD133表達(dá)的影響
    1.1 0 蛋白質(zhì)印跡法檢測AGEs對HCT116細(xì)胞球CD133、MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá)的影響
    1.1 1 蛋白質(zhì)印跡法檢測AGEs對HCT116細(xì)胞RAGE、PI3K信號通路分子和EMT標(biāo)志蛋白表達(dá)的影響
    1.1 2 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 AGEs促進(jìn)HCT116細(xì)胞增殖、遷移及侵襲
    2.2 AGEs促進(jìn)HCT116細(xì)胞的克隆形成和細(xì)胞成球
    2.3 AGEs促進(jìn)HCT116細(xì)胞球的侵襲
    2.4 AGEs上調(diào)CD133+HCT116細(xì)胞球比例
    2.5 A G E s上調(diào)H C T 1 1 6細(xì)胞球C D 1 3 3、MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá)水平
    2.6 AGEs上調(diào)HCT116細(xì)胞中RAGE、p-PI3K、p-Akt、N-cadherin和vimentin蛋白的表達(dá)水平
3 討論



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