目的:初步探討枯芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物Surfactin對(duì)體外培養(yǎng)的舌鱗癌Tca8113細(xì)胞株發(fā)生和發(fā)展影響。方法:觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),當(dāng)細(xì)胞鋪滿瓶壁約85%-90%時(shí),分別加入20μg/m L、40μg/m L、60μg/m L、80μg/m L、100μg/m L濃度的藥物,培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h、48h,SRB染色法檢測(cè)Surfactin對(duì)舌鱗癌生長(zhǎng)的影響;克隆形成實(shí)驗(yàn),通過計(jì)數(shù)分析Surfactin對(duì)舌鱗癌細(xì)胞克隆數(shù)目的影響;Hochest/PI雙染法觀察Surfactin作用于腫瘤細(xì)胞后細(xì)胞的形態(tài)的變化;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)早期凋亡;Wound healing和Transwell遷移實(shí)驗(yàn)分別觀察Surfactin作用下對(duì)舌鱗癌細(xì)胞劃傷傷口的愈合能力和對(duì)細(xì)胞遷移的影響;免疫印跡法檢測(cè)與細(xì)胞遷移有關(guān)的蛋白MMPs表達(dá)的含量。結(jié)果:1.由SRB實(shí)驗(yàn)結(jié)果知,Surfactin能夠有效抑制舌鱗癌細(xì)胞的生長(zhǎng),Surfactin對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率隨著藥物劑量的加大也增大,24h、48h的IC50分別為74μg/m L和53μg/m L。2.克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Surfactin能夠抑制舌鱗癌細(xì)胞的克隆形成,...

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 舌癌的治療現(xiàn)狀
    1.2 Surfactin作用的實(shí)驗(yàn)研究及臨床觀察
        1.2.1 抗菌作用
        1.2.2 抗炎活性
        1.2.3 抗腫瘤作用
        1.2.4 抗支原體的作用
        1.2.5 抗病毒作用
        1.2.6 抗粘附作用
        1.2.7 Surfactin抗血栓功能
        1.2.8 其它方面的應(yīng)用
    1.3 本實(shí)驗(yàn)課題的研究目的和意義
    1.4 本實(shí)驗(yàn)課題的研究?jī)?nèi)容
    1.5 技術(shù)路線
第二章 實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)所需細(xì)胞
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)用主要試劑
        2.1.4 藥品來(lái)源
        2.1.5 主要試驗(yàn)用試劑的配置
第三章 Surfactin能夠削弱舌鱗癌細(xì)胞株生長(zhǎng)的能力
    3.1 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1.1 細(xì)胞復(fù)蘇
        3.1.2 細(xì)胞的生長(zhǎng)和傳代
        3.1.3 細(xì)胞的凍存
        3.1.4 Surfactin作用于舌鱗癌細(xì)胞后腫瘤細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化
        3.1.5 SRB（磺酰羅丹明B）染色法檢測(cè)Surfactin對(duì)舌鱗癌Tca8113細(xì)胞增殖抑制作用的影響
        3.1.6 平板克隆形成實(shí)驗(yàn)
    3.2 實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 藥物干預(yù)舌癌細(xì)胞后鏡下細(xì)胞的變化
        3.3.2 Surfactin抗增殖作用
        3.3.3 平板克隆實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 討論
    3.5 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第四章 Surfactin的促凋亡的作用
    4.1 實(shí)驗(yàn)方法
        4.1.1 流式細(xì)胞儀術(shù)檢測(cè)Surfactin對(duì)舌鱗癌細(xì)胞凋亡的影響
        4.1.2 Hochest33258/PI雙染觀察藥物處理細(xì)后細(xì)胞核的變化
    4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.2.1 Hochest/PI染色后細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
        4.2.2 Surfactin對(duì)舌癌細(xì)胞凋亡的影響
    4.3 討論
    4.4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第五章 Surfactin的抗遷移的作用
    5.1 實(shí)驗(yàn)方法
        5.1.1 劃傷愈合實(shí)驗(yàn)法測(cè)定藥物干預(yù)舌鱗癌細(xì)胞后對(duì)舌鱗癌細(xì)胞遷移的影響
        5.1.2 Transwell小室遷移實(shí)驗(yàn)
        5.1.3 免疫印跡法驗(yàn)證Surfactin對(duì)MMPs的表達(dá)情況
    5.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.2.1 Surfactin作用于舌鱗癌細(xì)胞后對(duì)腫瘤細(xì)胞遷移作用的影響
        5.2.2 Transwell小室遷移的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.2.3 蛋白質(zhì)印記驗(yàn)證Surfactin處理細(xì)胞MMPs表達(dá)情況
    5.3 實(shí)驗(yàn)討論
    5.4 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第六章 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
中英文略縮詞
在校期間完成的科研成果
致謝



本文編號(hào)：4014113