目的:初步探討枯芽孢桿菌發(fā)酵產物Surfactin對體外培養(yǎng)的舌鱗癌Tca8113細胞株發(fā)生和發(fā)展影響。方法:觀察細胞的生長狀態(tài),當細胞鋪滿瓶壁約85%-90%時,分別加入20μg/m L、40μg/m L、60μg/m L、80μg/m L、100μg/m L濃度的藥物,培養(yǎng)箱內培養(yǎng)24h、48h,SRB染色法檢測Surfactin對舌鱗癌生長的影響;克隆形成實驗,通過計數分析Surfactin對舌鱗癌細胞克隆數目的影響;Hochest/PI雙染法觀察Surfactin作用于腫瘤細胞后細胞的形態(tài)的變化;流式細胞術檢測早期凋亡;Wound healing和Transwell遷移實驗分別觀察Surfactin作用下對舌鱗癌細胞劃傷傷口的愈合能力和對細胞遷移的影響;免疫印跡法檢測與細胞遷移有關的蛋白MMPs表達的含量。結果:1.由SRB實驗結果知,Surfactin能夠有效抑制舌鱗癌細胞的生長,Surfactin對腫瘤細胞的抑制率隨著藥物劑量的加大也增大,24h、48h的IC50分別為74μg/m L和53μg/m L。2.克隆形成實驗結果顯示Surfactin能夠抑制舌鱗癌細胞的克隆形成,...

【文章頁數】：51 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 舌癌的治療現狀
    1.2 Surfactin作用的實驗研究及臨床觀察
        1.2.1 抗菌作用
        1.2.2 抗炎活性
        1.2.3 抗腫瘤作用
        1.2.4 抗支原體的作用
        1.2.5 抗病毒作用
        1.2.6 抗粘附作用
        1.2.7 Surfactin抗血栓功能
        1.2.8 其它方面的應用
    1.3 本實驗課題的研究目的和意義
    1.4 本實驗課題的研究內容
    1.5 技術路線
第二章 實驗材料和實驗方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗所需細胞
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 實驗用主要試劑
        2.1.4 藥品來源
        2.1.5 主要試驗用試劑的配置
第三章 Surfactin能夠削弱舌鱗癌細胞株生長的能力
    3.1 實驗方法
        3.1.1 細胞復蘇
        3.1.2 細胞的生長和傳代
        3.1.3 細胞的凍存
        3.1.4 Surfactin作用于舌鱗癌細胞后腫瘤細胞的形態(tài)學變化
        3.1.5 SRB（磺酰羅丹明B）染色法檢測Surfactin對舌鱗癌Tca8113細胞增殖抑制作用的影響
        3.1.6 平板克隆形成實驗
    3.2 實驗統計方法
    3.3 實驗結果
        3.3.1 藥物干預舌癌細胞后鏡下細胞的變化
        3.3.2 Surfactin抗增殖作用
        3.3.3 平板克隆實驗結果
    3.4 討論
    3.5 實驗小結
第四章 Surfactin的促凋亡的作用
    4.1 實驗方法
        4.1.1 流式細胞儀術檢測Surfactin對舌鱗癌細胞凋亡的影響
        4.1.2 Hochest33258/PI雙染觀察藥物處理細后細胞核的變化
    4.2 實驗結果
        4.2.1 Hochest/PI染色后細胞形態(tài)學觀察
        4.2.2 Surfactin對舌癌細胞凋亡的影響
    4.3 討論
    4.4 實驗小結
第五章 Surfactin的抗遷移的作用
    5.1 實驗方法
        5.1.1 劃傷愈合實驗法測定藥物干預舌鱗癌細胞后對舌鱗癌細胞遷移的影響
        5.1.2 Transwell小室遷移實驗
        5.1.3 免疫印跡法驗證Surfactin對MMPs的表達情況
    5.2 實驗結果
        5.2.1 Surfactin作用于舌鱗癌細胞后對腫瘤細胞遷移作用的影響
        5.2.2 Transwell小室遷移的實驗結果
        5.2.3 蛋白質印記驗證Surfactin處理細胞MMPs表達情況
    5.3 實驗討論
    5.4 實驗小結
第六章 全文總結
參考文獻
中英文略縮詞
在校期間完成的科研成果
致謝



本文編號：4014113