本文以人乳腺癌MCF-7和BT-20細(xì)胞為研究對象,通過與硒酸殼聚糖共培養(yǎng)一定時(shí)間后,研究硒酸殼聚糖對人乳腺癌細(xì)胞凋亡的影響及可能存在的凋亡機(jī)理。本文所用藥物硒酸殼聚糖(4827.0 Da)兼?zhèn)湮c多糖的共同抗癌作用,且已經(jīng)通過紅外確定硒與多糖連接位點(diǎn)。首先,驗(yàn)證硒酸殼聚糖誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞凋亡的發(fā)生。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,硒酸殼聚糖能抑制細(xì)胞的增殖,且當(dāng)作用濃度達(dá)到100 μg/mL是MCF-7細(xì)胞的最佳作用劑量,200 μg/mL時(shí)與硒酸殼聚糖共培養(yǎng)時(shí)間為24 h其作用效果顯著,細(xì)胞增殖抑制率可達(dá)到70%以上且存在較強(qiáng)的時(shí)間劑量依賴關(guān)系。但對正常人乳腺細(xì)胞Hs 578Bst基本無毒性作用;形態(tài)學(xué)變化觀察到相應(yīng)濃度的硒酸殼聚糖能誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞形態(tài)凋亡;AnnexinV-FITC/PI雙染實(shí)驗(yàn)中,硒酸殼聚糖與乳腺癌細(xì)胞作用指定時(shí)間段后,經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測證明硒酸殼聚糖可誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡且是時(shí)間依賴關(guān)系;此外,細(xì)胞周期的檢測結(jié)果表明硒酸殼聚糖破壞了乳腺癌細(xì)胞分裂周期的連續(xù)性,并將MCF-7細(xì)胞阻滯在G2/M、S期;BT-20細(xì)胞阻滯在S期。其次,探究了乳腺癌細(xì)胞在硒酸殼聚糖誘導(dǎo)下的凋亡信號途...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－１硒酸殼聚糖結(jié)構(gòu)以及不同濃度不同培養(yǎng)８?－２４?ｈ的硒酸殼聚糖對ＭＣＦ－７和ＢＴ－２０細(xì)胞、人??

因此我們可以得出結(jié)論，在ＭＴＴ實(shí)驗(yàn)中，是硒酸殼聚糖的生物活性大力誘導(dǎo)了這兩??種人乳腺癌細(xì)胞的活性。并且，基于本次實(shí)驗(yàn)對象的特殊性，我們以正常人乳腺Ｈｓ??５７８Ｂｓｔ細(xì)胞，進(jìn)行ＭＴＴ實(shí)驗(yàn)。結(jié)果如（圖３－１－Ｃ）所示，即使硒酸殼聚糖濃度增加到??６００?ｐｇ／ｍＬ

圖３－２倒置顯微鏡下觀察指定濃度硒酸殼聚糖與ＭＣＦ－７和ＢＴ－２０細(xì)胞共培養(yǎng)８?－?２４?ｈ后其形態(tài)變??化（ｘ２０）??

Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｉｉｏｎ?ｏｆ?ＳＳＣＣ?（ｎｇ／ｍｌ）??（Ｃ）??圖３－１硒酸殼聚糖結(jié)構(gòu)以及不同濃度不同培養(yǎng)８?－２４?ｈ的硒酸殼聚糖對ＭＣＦ－７和ＢＴ－２０細(xì)胞、人??正常乳腺Ｈｓ?５７８Ｂｓｔ細(xì)胞生長的影響（Ｐ＜０．０５?）??Ａ：ＭＣＦ－７?細(xì)胞，Ｂ：ＢＴ－２０?細(xì)胞....

圖３－３掃描電鏡觀察指定濃度砸酸殼聚糖與ＭＣＦ－７和ＢＴ－２０細(xì)胞共培養(yǎng)后其形態(tài)變化??注：Ａ：ＭＣＦ－７?細(xì)胞；Ｂ：ＢＴ－２０?細(xì)胞??

Ａ：?ＭＣＦ－７?ｃｅｌｌｓ；?Ｂ：?ＢＴ－２０?ｃｅｌｌｓ??３．２．３?Ｈｏｅｃｈｓｔ?３３３４２／Ｗ雙染觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)變化??如圖３－４，由于細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，未經(jīng)藥物處理的兩種乳腺癌細(xì)胞對兩種染料均有??拒染性，因此只有少量細(xì)胞被Ｈｏｅｃｈｓｔ?３３３４２染成淡藍(lán)色。而經(jīng)２....

圖３－４?ＭＣＦ－７和ＢＴ－２０細(xì)胞與硒酸殼聚糖作用８?２４?ｈ的Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２／ＰＩ雙染結(jié)果（ｘ２０）??注：Ａ：?ＭＣＦ－７細(xì)胞Ｂ：?ＢＴ－２０細(xì)胞??Ｆｉｇ．?３－４?Ａ?ａｎｄ?Ｂ?ｓｔａｎｄ?ｆｏｒ?ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２／ＰＩ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ＭＣＦ－７?ａｎｄ?ＢＴ－２０?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ??ｔｒｅａｔｍｅｎｔ?ｗｉｔｈ?ＳＳＣＣ?８?－?２４?ｈ，?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．?（ｘ２０）??

３．３硒酸殼聚糖誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞凋亡率的研究??在Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ／ＰＩ雙染實(shí)驗(yàn)中，我們可以明顯看出經(jīng)過指定硒酸殼聚糖誘導(dǎo)??的人乳腺癌細(xì)胞凋亡。在圖３－５所示，流式細(xì)胞儀的兩個(gè)炎光通逍ＦＬＨ－１和ＦＬＨ－３??分別用來收集Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ和ＰＩ的熒光信號....

本文編號：3982198