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Asporin/CD44信號軸對胰腺導(dǎo)管腺癌侵襲、遷移生物學(xué)行為的影響

發(fā)布時間:2024-05-18 14:12
  背景:胰腺癌是惡性程度最高的人類腫瘤之一,被稱之為“癌中之王”。由于胰腺癌早期診斷困難,現(xiàn)有的治療手段有限,就目前而言,胰腺癌患者的預(yù)后依舊很差。臨床上近90%的胰腺癌病理類型為胰腺導(dǎo)管腺癌,因此,尋找具有臨床意義的腫瘤生物學(xué)標(biāo)記物來預(yù)測胰腺導(dǎo)管腺癌的發(fā)生、發(fā)展以及設(shè)計、研發(fā)針對腫瘤標(biāo)記物的靶向藥物,對于改善胰腺導(dǎo)管腺癌患者的預(yù)后就顯得非常迫切和必要。目的:1.探討Asporin、CD44在胰腺導(dǎo)管腺癌組織中的表達、定位及其臨床意義2.探討Asporin/CD44生物軸對胰腺癌侵襲和遷移生物學(xué)行為的影響及機制方法:第一部分:Asporin、CD44在胰腺導(dǎo)管腺癌組織中的表達、定位及其臨床意義收集132例胰腺導(dǎo)管腺癌和50例癌旁石蠟組織標(biāo)本、臨床、病理和預(yù)后資料,采用IHC和免疫熒光分別評估Asporin和CD44在胰腺導(dǎo)管腺癌組織和癌旁組織中的表達和定位,SPSS16.0統(tǒng)計軟件對結(jié)果進行分析。第二部分:體外實驗Asporin/CD44生物軸對胰腺導(dǎo)管腺癌侵襲和遷移生物學(xué)行為的影響及機制1.Asporin在人活化和去活化PSCs中的表達和定位:通過outgrowth法、油紅染色法和α-...

【文章頁數(shù)】:115 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

圖1-3.免疫熒光共定位a?-SMA和Asporin,?CD44和Asporin在人胰腺癌組織中的??表達模式和位置關(guān)系

圖1-3.免疫熒光共定位a?-SMA和Asporin,?CD44和Asporin在人胰腺癌組織中的??表達模式和位置關(guān)系

進一步我們通過對a-SMA和Asporin,CD44和Asporin免疫共染的方法,一方??面我們再次發(fā)現(xiàn):在大多數(shù)胰腺癌患者的組織中,Asporin和ci-SMA的表達部位基??本一致,主要位于環(huán)繞腫瘤細胞的PSCs胞漿中(見圖1-3-A),⑶44主要在胰腺癌??細胞的胞膜上高....


圖2-1.人源性PSCs的分離和鑒定

圖2-1.人源性PSCs的分離和鑒定

按照前述的outgrowth實驗方法,我們從新鮮的人PDAC組織中成功分離??PSCs。隨后,我們采用油紅脂滴染色和a-SMA免疫熒光染色來鑒定從新鮮的人??PDAC組織分離得到的活化PSCs?(見圖2-1?)。??越??.袁…屬??圖2-1.人源性PSCs的分離和鑒定。(A)P....


圖2-2.?ATRA誘導(dǎo)人源性PSCs去活化前后對照

圖2-2.?ATRA誘導(dǎo)人源性PSCs去活化前后對照

首先通過收集活化PSCs和去活化PSCs的總DNA和總RNA,分別進行基因芯??片和RNA測序,我們發(fā)現(xiàn):Aaporin在活化PSCs中高表?達,ATRA誘導(dǎo)去活化后表??達明顯降低(


圖2-4.?Asporin在活化和去活化PSCs中的表達

圖2-4.?Asporin在活化和去活化PSCs中的表達

和PANC-1細胞系的侵襲和遷移能力??通過Western?blot篩選4對siRNA對Asporin的敲除效率后,我們發(fā)現(xiàn)??Asporin-siRNAl能夠有效地敲低Asporin的表達(見圖2-6)。同樣采用??Transwell分析的方法我們發(fā)現(xiàn):利用Asporin-si....



本文編號:3977043

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