背景:胰腺癌是惡性程度最高的人類腫瘤之一,被稱之為“癌中之王”。由于胰腺癌早期診斷困難,現(xiàn)有的治療手段有限,就目前而言,胰腺癌患者的預后依舊很差。臨床上近90%的胰腺癌病理類型為胰腺導管腺癌,因此,尋找具有臨床意義的腫瘤生物學標記物來預測胰腺導管腺癌的發(fā)生、發(fā)展以及設計、研發(fā)針對腫瘤標記物的靶向藥物,對于改善胰腺導管腺癌患者的預后就顯得非常迫切和必要。目的:1.探討Asporin、CD44在胰腺導管腺癌組織中的表達、定位及其臨床意義2.探討Asporin/CD44生物軸對胰腺癌侵襲和遷移生物學行為的影響及機制方法:第一部分:Asporin、CD44在胰腺導管腺癌組織中的表達、定位及其臨床意義收集132例胰腺導管腺癌和50例癌旁石蠟組織標本、臨床、病理和預后資料,采用IHC和免疫熒光分別評估Asporin和CD44在胰腺導管腺癌組織和癌旁組織中的表達和定位,SPSS16.0統(tǒng)計軟件對結果進行分析。第二部分:體外實驗Asporin/CD44生物軸對胰腺導管腺癌侵襲和遷移生物學行為的影響及機制1.Asporin在人活化和去活化PSCs中的表達和定位:通過outgrowth法、油紅染色法和α-...

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－３．免疫熒光共定位ａ?－ＳＭＡ和Ａｓｐｏｒｉｎ，?ＣＤ４４和Ａｓｐｏｒｉｎ在人胰腺癌組織中的??表達模式和位置關系

進一步我們通過對ａ－ＳＭＡ和Ａｓｐｏｒｉｎ，ＣＤ４４和Ａｓｐｏｒｉｎ免疫共染的方法，一方??面我們再次發(fā)現(xiàn)：在大多數(shù)胰腺癌患者的組織中，Ａｓｐｏｒｉｎ和ｃｉ－ＳＭＡ的表達部位基??本一致，主要位于環(huán)繞腫瘤細胞的ＰＳＣｓ胞漿中（見圖１－３－Ａ），⑶４４主要在胰腺癌??細胞的胞膜上高....

圖２－１．人源性ＰＳＣｓ的分離和鑒定

按照前述的ｏｕｔｇｒｏｗｔｈ實驗方法，我們從新鮮的人ＰＤＡＣ組織中成功分離??ＰＳＣｓ。隨后，我們采用油紅脂滴染色和ａ－ＳＭＡ免疫熒光染色來鑒定從新鮮的人??ＰＤＡＣ組織分離得到的活化ＰＳＣｓ?（見圖２－１?）。??越??．袁…屬??圖２－１．人源性ＰＳＣｓ的分離和鑒定。（Ａ）Ｐ....

圖２－２．?ＡＴＲＡ誘導人源性ＰＳＣｓ去活化前后對照

首先通過收集活化ＰＳＣｓ和去活化ＰＳＣｓ的總ＤＮＡ和總ＲＮＡ，分別進行基因芯??片和ＲＮＡ測序，我們發(fā)現(xiàn)：Ａａｐｏｒｉｎ在活化ＰＳＣｓ中高表？達，ＡＴＲＡ誘導去活化后表??達明顯降低（

圖２－４．?Ａｓｐｏｒｉｎ在活化和去活化ＰＳＣｓ中的表達

和ＰＡＮＣ－１細胞系的侵襲和遷移能力??通過Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ篩選４對ｓｉＲＮＡ對Ａｓｐｏｒｉｎ的敲除效率后，我們發(fā)現(xiàn)??Ａｓｐｏｒｉｎ－ｓｉＲＮＡｌ能夠有效地敲低Ａｓｐｏｒｉｎ的表達（見圖２－６）。同樣采用??Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ分析的方法我們發(fā)現(xiàn)：利用Ａｓｐｏｒｉｎ－ｓｉ....

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