目的:探討綠原酸誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞HepG2凋亡作用及機(jī)制。方法:采用噻唑藍(lán)(MTT)法測(cè)定綠原酸對(duì)HepG2的生長(zhǎng)抑制作用,倒置顯微鏡觀察綠原酸對(duì)HepG2細(xì)胞作用后的形態(tài)改變,TUNEL實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況,羅丹明123熒光染色實(shí)驗(yàn)觀察線(xiàn)粒體膜電位的改變,免疫印跡實(shí)驗(yàn)探討綠原酸的作用機(jī)制。結(jié)果:與空白組相比較,不同濃度綠原酸(1¹0mmol/L)能夠抑制HepG2肝癌細(xì)胞增殖并呈時(shí)間-濃度依賴(lài)性,綠原酸(1¹0 mmol/L)作用24 h后能夠顯著降低SIRT1、HO-1、Bcl-2和NF-κB蛋白表達(dá),同時(shí)上調(diào)p53和Bax蛋白表達(dá)。結(jié)論:綠原酸能夠顯著抑制HepG2肝癌細(xì)胞增殖并通過(guò)調(diào)控SIRT1/HO-1依賴(lài)的凋亡途徑發(fā)揮作用。

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 試驗(yàn)藥物綠原酸購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所(批號(hào):110753-200413),見(jiàn)圖1。
    1.2 細(xì)胞
    1.3 試劑
    1.4 儀器
    1.5 方法
        1.5.1 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制
        1.5.2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化的觀察
        1.5.3 末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)d UTP缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)
        1.5.4 線(xiàn)粒體膜電位觀察
        1.5.5 免疫印跡法
2 結(jié)果
    2.1 綠原酸抑制Hep G2細(xì)胞生長(zhǎng)作用
    2.2 綠原酸誘導(dǎo)Hep G2細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化
    2.3 綠原酸誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡
    2.4 綠原酸明顯降低線(xiàn)粒體膜電位
    2.5 SIRT1、HO-1、p53、NF-κB、Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)
3 討論



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