目的探究腫瘤微環(huán)境中CD8+T細(xì)胞免疫抑制性受體PD-1的表達(dá)。方法使用小鼠肺癌細(xì)胞系3LL建立荷瘤小鼠模型,流式細(xì)胞術(shù)檢測分析腫瘤微環(huán)境中各類免疫細(xì)胞的比例以及CD8+PD-1+T細(xì)胞比例;使用免疫磁珠細(xì)胞分選法MACS分別分選CD11b+細(xì)胞以及CD8+T細(xì)胞,兩種細(xì)胞按照1∶1比例共培養(yǎng),并加入3LL腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清,培養(yǎng)48 h,流式細(xì)胞術(shù)檢測分析CD8+T細(xì)胞PD-1表達(dá)水平。結(jié)果(1)腫瘤微環(huán)境中存在大量CD11b+細(xì)胞,此外還包含16.4%左右CD3+T細(xì)胞,腫瘤實質(zhì)的重量與腫瘤微環(huán)境中T細(xì)胞比例呈負(fù)相關(guān)。(2)荷瘤小鼠淋巴結(jié)中CD8+PD-1+T比例升高(P<0.05);腫瘤微環(huán)境中CD8+PD-1+T細(xì)胞比例顯著升高(P<0.01),占CD8+T細(xì)胞的40%左右,腫瘤微環(huán)境中CD8+T細(xì)胞還表達(dá)其他免疫抑制分子如TIM-3、LAG-3;(3)相比單獨使用腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清,CD11b+細(xì)胞加腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清可誘導(dǎo)CD8+T細(xì)胞表達(dá)PD-1(P<0.05)。結(jié)論在腫瘤微環(huán)境中,CD11b+細(xì)胞可誘導(dǎo)CD8+T細(xì)胞表達(dá)免疫抑制性受體PD-1。

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞系與實驗動物
    1.2 主要試劑和儀器
    1.3 構(gòu)建小鼠皮下荷瘤模型
    1.4 腫瘤組織制備單細(xì)胞懸液
    1.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面蛋白表達(dá)
    1.6 MACS分選細(xì)胞
    1.7 CD8+T細(xì)胞、CD11b+細(xì)胞共培養(yǎng)
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 腫瘤實質(zhì)的重量與腫瘤微環(huán)境中T細(xì)胞的比例呈負(fù)相關(guān)
    2.2 腫瘤微環(huán)境中CD8+PD-1+T細(xì)胞比例增高
    2.3 CD11b+細(xì)胞誘導(dǎo)CD8+T細(xì)胞表PD-1
3 討論



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