目的探究腫瘤微環(huán)境中CD8+T細胞免疫抑制性受體PD-1的表達。方法使用小鼠肺癌細胞系3LL建立荷瘤小鼠模型,流式細胞術檢測分析腫瘤微環(huán)境中各類免疫細胞的比例以及CD8+PD-1+T細胞比例;使用免疫磁珠細胞分選法MACS分別分選CD11b+細胞以及CD8+T細胞,兩種細胞按照1∶1比例共培養(yǎng),并加入3LL腫瘤細胞培養(yǎng)上清,培養(yǎng)48 h,流式細胞術檢測分析CD8+T細胞PD-1表達水平。結果(1)腫瘤微環(huán)境中存在大量CD11b+細胞,此外還包含16.4%左右CD3+T細胞,腫瘤實質的重量與腫瘤微環(huán)境中T細胞比例呈負相關。(2)荷瘤小鼠淋巴結中CD8+PD-1+T比例升高(P<0.05);腫瘤微環(huán)境中CD8+PD-1+T細胞比例顯著升高(P<0.01),占CD8+T細胞的40%左右,腫瘤微環(huán)境中CD8+T細胞還表達其他免疫抑制分子如TIM-3、LAG-3;(3)相比單獨使用腫瘤細胞培養(yǎng)上清,CD11b+細胞加腫瘤細胞培養(yǎng)上清可誘導CD8+T細胞表達PD-1(P<0.05)。結論在腫瘤微環(huán)境中,CD11b+細胞可誘導CD8+T細胞表達免疫抑制性受體PD-1。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細胞系與實驗動物
    1.2 主要試劑和儀器
    1.3 構建小鼠皮下荷瘤模型
    1.4 腫瘤組織制備單細胞懸液
    1.5 流式細胞術檢測細胞表面蛋白表達
    1.6 MACS分選細胞
    1.7 CD8+T細胞、CD11b+細胞共培養(yǎng)
    1.8 統(tǒng)計學分析
2 結果
    2.1 腫瘤實質的重量與腫瘤微環(huán)境中T細胞的比例呈負相關
    2.2 腫瘤微環(huán)境中CD8+PD-1+T細胞比例增高
    2.3 CD11b+細胞誘導CD8+T細胞表PD-1
3 討論



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