目的研究mi R-25抑制劑對耐順鉑A549/DDP細(xì)胞增殖、凋亡和順鉑耐藥性的影響及可能機(jī)制的探討。方法培養(yǎng)人肺腺癌A549及耐順鉑A549/DDP細(xì)胞株,檢測順鉑對兩個(gè)細(xì)胞株的半數(shù)耐藥濃度(IC50);轉(zhuǎn)染mi R-25抑制劑至A549/DDP細(xì)胞內(nèi),提取細(xì)胞總RNA,并以q PCR法評估m(xù)i R-25抑制劑的轉(zhuǎn)染效果;抑制劑轉(zhuǎn)染A549/DDP細(xì)胞后,以CCK8法分別在轉(zhuǎn)染24 h、48 h、72 h時(shí)測定轉(zhuǎn)染組、陰性對照組及無處理組細(xì)胞的增殖抑制率,并以流式細(xì)胞儀檢測轉(zhuǎn)染mi R-25抑制劑72 h后三組細(xì)胞的凋亡率;設(shè)置轉(zhuǎn)染抑制劑組及陰性對照組,以CCK8法檢測順鉑作用于兩組細(xì)胞的IC50;以細(xì)胞爬片免疫細(xì)胞化學(xué)及數(shù)字化病理掃描系統(tǒng)分析PTEN蛋白在轉(zhuǎn)染抑制劑前后的表達(dá)情況。結(jié)果 A549細(xì)胞株的IC50為0.591μg/ml,95%可信區(qū)間為0.436⁰.753μg/ml;A549/DDP細(xì)胞的IC50為9.040μg/ml,95%可信區(qū)間6.504¹4.783μg/ml,A549/DDP的IC50約為A549的15.29倍;與陰...

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    一、材料與試劑
    二、方法
        1. 細(xì)胞培養(yǎng):
        2. CCK8檢測:
        3. mi R-25-I轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)染效果檢測:
        4. mi R-25-I增殖抑制試驗(yàn)及細(xì)胞凋亡檢測:
        5. 順鉑聯(lián)合miR-25-I增殖抑制試驗(yàn):
        6. 細(xì)胞爬片免疫細(xì)胞化學(xué):
    三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    一、CCK8檢測
    二、mi R-25-I轉(zhuǎn)染效果的檢測
    三、mi R-25-I對A549/DDP的增殖抑制實(shí)驗(yàn)及凋亡率檢測
    四、順鉑與mi R-25-I聯(lián)合增殖抑制試驗(yàn)
    五、細(xì)胞爬片免疫細(xì)胞化學(xué)
討論



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