本文關(guān)鍵詞：擬康氏木霉胞外多糖對CT26結(jié)腸癌移植瘤小鼠抑瘤作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究擬康氏木霉胞外多糖對CT26結(jié)腸癌移植瘤小鼠抑瘤作用及其相關(guān)機(jī)制。方法:1.采用MTT法檢測擬康氏木霉胞外多糖(EPS)對小鼠結(jié)腸癌CT26細(xì)胞存活率的影響,以不同濃度EPS處理CT26細(xì)胞24 h后檢測。2.PBS稀釋處于對數(shù)生長期的CT26細(xì)胞,使其密度為2×106個(gè)/ml。75%酒精對小鼠右下腋進(jìn)行消毒擦拭,腋下接種0.2 ml/只,每日觀察小鼠右腋,待其出現(xiàn)綠豆粒大小腫塊,說明移植瘤模型建立成功。3.通過治療給藥途徑研究EPS對CT26荷瘤小鼠的抗腫瘤作用。以CT26結(jié)腸癌移植瘤小鼠為模型,檢測擬康氏木霉胞外多糖對小鼠CT26移植瘤的抑制作用和生理指標(biāo)的影響。4.通過聯(lián)合應(yīng)用5-氟尿嘧啶(5-Fu)研究擬康氏木霉胞外多糖聯(lián)合化療藥物對CT26結(jié)腸癌小鼠的抗腫瘤作用。以CT26結(jié)腸癌移植瘤小鼠為模型,檢測聯(lián)合用藥對小鼠CT26移植瘤的抑制作用和生理指標(biāo)的影響。5.小鼠血液樣本于10000 rpm離心,取血清,ELISA法測定小鼠血清中白細(xì)胞介素-2(IL-2)和腫瘤壞死因子(TNF-α)的濃度。6.制備小鼠脾細(xì)胞懸液并分別與刀豆蛋白A(Con A)或脂多糖(LPS)孵育48h,酶標(biāo)儀570nm波長讀取每孔OD值。7.制備小鼠脾細(xì)胞懸液避光4o C與CD3和CD8a熒光抗體孵育30分鐘,流式細(xì)胞儀檢測CD3+CD8+T淋巴細(xì)胞占脾細(xì)胞比例。8.腫瘤組織塊經(jīng)組織裂解提取組織蛋白用Western blotting技術(shù)檢測凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2和P53的表達(dá)。9.小鼠的血液樣本送檢,測小鼠血常規(guī)參數(shù)的變化。結(jié)果:1.MTT法檢測發(fā)現(xiàn)EPS在50~1000μg/ml劑量范圍內(nèi)對CT26細(xì)胞無明顯細(xì)胞毒性。2.EPS給藥具有顯著的體內(nèi)抗腫瘤作用,且EPS給藥組小鼠免疫器官指數(shù)明顯上升,生存質(zhì)量明顯提高。3.酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示EPS給藥明顯提高小鼠血清中IL-2與TNF-α水平。4.無有絲分裂刺激的淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)中,EPS給藥組小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖率明顯高于腫瘤模型組并呈劑量依賴性,在刀豆蛋白A(Con A,5μg/m L)或LPS(10μg/m L)刺激下,EPS組小鼠的脾淋巴細(xì)胞增殖率明顯較腫瘤模型組高,但5-Fu組淋巴細(xì)胞增殖率顯著降低。5.EPS給藥提升了小鼠CD3+CD8+T細(xì)胞的比例。6.治療給藥途徑中,Western blotting結(jié)果顯示EPS給藥可以調(diào)節(jié)小鼠體內(nèi)腫瘤組織凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá),提示EPS給藥可能誘導(dǎo)小鼠腫瘤細(xì)胞凋亡,具體分子機(jī)制有待進(jìn)一步研究。7.聯(lián)合給藥實(shí)驗(yàn)中,EPS聯(lián)合5-Fu明顯改善了小鼠各項(xiàng)生理指標(biāo)、血液學(xué)參數(shù)與生存質(zhì)量。結(jié)論:1.EPS給藥可以提高小鼠機(jī)體免疫力,激活機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)揮機(jī)體免疫抗腫瘤作用。2.EPS聯(lián)用5-Fu對治療小鼠結(jié)腸癌腫瘤具有協(xié)同與增效解毒作用。
【關(guān)鍵詞】：擬康氏木霉 胞外多糖 免疫調(diào)節(jié) 抗腫瘤 結(jié)腸癌
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.35
【目錄】：

• 摘要8-11
• ABSTRACT11-14
• 前言14-19
• 研究內(nèi)容與方法19-33
• 1. 研究內(nèi)容19-20
• 2. 材料與方法20-33
• 結(jié)果33-46
• 討論46-52
• 結(jié)論52-53
• 參考文獻(xiàn)53-59
• 綜述59-73
• 參考文獻(xiàn)66-73
• 作者簡介及讀研期間主要科研成果73-74
• 致謝74

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本文編號：392590