探索miR-17調(diào)控Balb/c小鼠乳腺癌生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2024-02-27 02:05
乳腺癌(breast cancer)是乳房組織的惡性腫瘤,其病程進(jìn)展快,病灶易發(fā)生轉(zhuǎn)移,而轉(zhuǎn)移灶引起的并發(fā)癥為其致死的主因。我國(guó)每年約有20萬(wàn)例新增患者,其發(fā)病率與死亡率逐年上升,盡管乳腺癌通過(guò)手術(shù)治療、化療、放療及內(nèi)分泌和分子靶向治療等手段有效地治愈了臨床原位癌,但對(duì)于已發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移乳腺癌患者的總體治療效果及預(yù)后仍然欠佳,乳腺癌細(xì)胞可經(jīng)血液或淋巴道途徑發(fā)生肺、胸膜、骨、肝及腦轉(zhuǎn)移等,患者發(fā)生遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移是其致死的主要原因之一。大量研究表明,miRNA對(duì)于乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展和擴(kuò)散轉(zhuǎn)移具有重要調(diào)節(jié)作用,深入研究乳腺癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制,是尋找治療對(duì)策的關(guān)鍵。miR-17-92 cluster是目前研究最廣泛的miRNA之一,miR-17-92 cluster的功能涉及正常發(fā)育、腫瘤發(fā)生、免疫疾病、心血管疾病及神經(jīng)變性疾病等。miR-17-92 cluster位于小鼠14號(hào)染色體,人的染色體13q13-q32。它包括6個(gè)獨(dú)立成員:miR-17、miR-18、miR-19a、miR-19b、miR-20a與miR-92a,每個(gè)成員的表達(dá)作用各不相同,平衡表達(dá)。其中miR-17在大量研究中表現(xiàn)...
【文章頁(yè)數(shù)】:66 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
第1章 文獻(xiàn)綜述
1.1 乳腺癌
1.1.1 乳腺癌及其病因
1.1.2 乳腺癌模型
1.1.3 乳腺癌診斷及臨床治療情況
1.2 micro RNA
1.2.1 micro RNA與癌癥
1.2.2 miR1792 cluster與癌癥
1.2.3 miR-17與癌癥
1.3 Bcl-2 凋亡途徑
1.3.1 Bcl-2 家族蛋白與凋亡途徑
1.3.2 Bcl-2 蛋白與 miR-17
1.4 淋巴細(xì)胞與多潛能干細(xì)胞
1.4.1 淋巴細(xì)胞與癌癥
1.4.2 多潛能造血干細(xì)胞與癌癥
1.4.3 淋巴細(xì)胞、多潛能干細(xì)胞與micro RNA
第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器和材料
2.1.1 主要試劑及來(lái)源
2.1.2 主要儀器
2.1.3 主要試劑及溶液配制
2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及模型制備
2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞轉(zhuǎn)染
2.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
2.2.3 模型制備
2.2.4 miR-17上清液給予治療
2.3 組織標(biāo)本的制備及檢測(cè)
2.3.1 組織標(biāo)本的制備
2.3.2 流式檢測(cè)脾細(xì)胞CD4,CD8,CD19,CD34抗體染色
2.3.3 脾組織micro RNA提取及q-PCR
2.3.4 石蠟切片制作
2.3.5 HE染色
2.3.6 免疫組化染色
2.3.7 Western Blot檢測(cè)Bcl-2,Bax的表達(dá)
2.3.8 圖像采集
2.3.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本情況
3.2 測(cè)量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腫瘤生長(zhǎng)情況
3.3 檢測(cè)脾組織中miR-17的表達(dá)
3.4 小鼠肺部腫瘤轉(zhuǎn)移灶情況
3.5 miR-17對(duì)脾組織的Bcl-2,Bax蛋白的作用
3.6 miR-17對(duì)CD4,CD8 T淋巴細(xì)胞、CD19 B淋巴細(xì)胞、CD34造血干細(xì)胞的影響
3.7 腫瘤組織CD8抗體染色
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3912210
【文章頁(yè)數(shù)】:66 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
第1章 文獻(xiàn)綜述
1.1 乳腺癌
1.1.1 乳腺癌及其病因
1.1.2 乳腺癌模型
1.1.3 乳腺癌診斷及臨床治療情況
1.2 micro RNA
1.2.1 micro RNA與癌癥
1.2.2 miR1792 cluster與癌癥
1.2.3 miR-17與癌癥
1.3 Bcl-2 凋亡途徑
1.3.1 Bcl-2 家族蛋白與凋亡途徑
1.3.2 Bcl-2 蛋白與 miR-17
1.4 淋巴細(xì)胞與多潛能干細(xì)胞
1.4.1 淋巴細(xì)胞與癌癥
1.4.2 多潛能造血干細(xì)胞與癌癥
1.4.3 淋巴細(xì)胞、多潛能干細(xì)胞與micro RNA
第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器和材料
2.1.1 主要試劑及來(lái)源
2.1.2 主要儀器
2.1.3 主要試劑及溶液配制
2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及模型制備
2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞轉(zhuǎn)染
2.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
2.2.3 模型制備
2.2.4 miR-17上清液給予治療
2.3 組織標(biāo)本的制備及檢測(cè)
2.3.1 組織標(biāo)本的制備
2.3.2 流式檢測(cè)脾細(xì)胞CD4,CD8,CD19,CD34抗體染色
2.3.3 脾組織micro RNA提取及q-PCR
2.3.4 石蠟切片制作
2.3.5 HE染色
2.3.6 免疫組化染色
2.3.7 Western Blot檢測(cè)Bcl-2,Bax的表達(dá)
2.3.8 圖像采集
2.3.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本情況
3.2 測(cè)量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腫瘤生長(zhǎng)情況
3.3 檢測(cè)脾組織中miR-17的表達(dá)
3.4 小鼠肺部腫瘤轉(zhuǎn)移灶情況
3.5 miR-17對(duì)脾組織的Bcl-2,Bax蛋白的作用
3.6 miR-17對(duì)CD4,CD8 T淋巴細(xì)胞、CD19 B淋巴細(xì)胞、CD34造血干細(xì)胞的影響
3.7 腫瘤組織CD8抗體染色
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3912210
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