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探索miR-17調(diào)控Balb/c小鼠乳腺癌生長和轉(zhuǎn)移的實驗研究

發(fā)布時間:2024-02-27 02:05
  乳腺癌(breast cancer)是乳房組織的惡性腫瘤,其病程進展快,病灶易發(fā)生轉(zhuǎn)移,而轉(zhuǎn)移灶引起的并發(fā)癥為其致死的主因。我國每年約有20萬例新增患者,其發(fā)病率與死亡率逐年上升,盡管乳腺癌通過手術(shù)治療、化療、放療及內(nèi)分泌和分子靶向治療等手段有效地治愈了臨床原位癌,但對于已發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移乳腺癌患者的總體治療效果及預(yù)后仍然欠佳,乳腺癌細胞可經(jīng)血液或淋巴道途徑發(fā)生肺、胸膜、骨、肝及腦轉(zhuǎn)移等,患者發(fā)生遠處器官轉(zhuǎn)移是其致死的主要原因之一。大量研究表明,miRNA對于乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展和擴散轉(zhuǎn)移具有重要調(diào)節(jié)作用,深入研究乳腺癌發(fā)生發(fā)展的分子機制,是尋找治療對策的關(guān)鍵。miR-17-92 cluster是目前研究最廣泛的miRNA之一,miR-17-92 cluster的功能涉及正常發(fā)育、腫瘤發(fā)生、免疫疾病、心血管疾病及神經(jīng)變性疾病等。miR-17-92 cluster位于小鼠14號染色體,人的染色體13q13-q32。它包括6個獨立成員:miR-17、miR-18、miR-19a、miR-19b、miR-20a與miR-92a,每個成員的表達作用各不相同,平衡表達。其中miR-17在大量研究中表現(xiàn)...

【文章頁數(shù)】:66 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
第1章 文獻綜述
    1.1 乳腺癌
        1.1.1 乳腺癌及其病因
        1.1.2 乳腺癌模型
        1.1.3 乳腺癌診斷及臨床治療情況
    1.2 micro RNA
        1.2.1 micro RNA與癌癥
        1.2.2 miR1792 cluster與癌癥
        1.2.3 miR-17與癌癥
    1.3 Bcl-2 凋亡途徑
        1.3.1 Bcl-2 家族蛋白與凋亡途徑
        1.3.2 Bcl-2 蛋白與 miR-17
    1.4 淋巴細胞與多潛能干細胞
        1.4.1 淋巴細胞與癌癥
        1.4.2 多潛能造血干細胞與癌癥
        1.4.3 淋巴細胞、多潛能干細胞與micro RNA
第2章 實驗材料與方法
    2.1 主要實驗儀器和材料
        2.1.1 主要試劑及來源
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 主要試劑及溶液配制
    2.2 實驗動物及模型制備
        2.2.1 細胞培養(yǎng)及細胞轉(zhuǎn)染
        2.2.2 實驗動物及分組
        2.2.3 模型制備
        2.2.4 miR-17上清液給予治療
    2.3 組織標本的制備及檢測
        2.3.1 組織標本的制備
        2.3.2 流式檢測脾細胞CD4,CD8,CD19,CD34抗體染色
        2.3.3 脾組織micro RNA提取及q-PCR
        2.3.4 石蠟切片制作
        2.3.5 HE染色
        2.3.6 免疫組化染色
        2.3.7 Western Blot檢測Bcl-2,Bax的表達
        2.3.8 圖像采集
        2.3.9 統(tǒng)計學(xué)處理
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 實驗動物基本情況
    3.2 測量實驗動物腫瘤生長情況
    3.3 檢測脾組織中miR-17的表達
    3.4 小鼠肺部腫瘤轉(zhuǎn)移灶情況
    3.5 miR-17對脾組織的Bcl-2,Bax蛋白的作用
    3.6 miR-17對CD4,CD8 T淋巴細胞、CD19 B淋巴細胞、CD34造血干細胞的影響
    3.7 腫瘤組織CD8抗體染色
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻
致謝



本文編號:3912210

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