整合素是一類細胞黏附因子,在多種細胞表面高表達,通過介導(dǎo)細胞與細胞、細胞與外部基質(zhì)之間的識別與黏附調(diào)控細胞生理活動。研究表明,整合素在腫瘤的發(fā)生發(fā)展等生理過程中發(fā)揮重要作用。特別是整合素αvβ3在多種腫瘤細胞和腫瘤新生血管內(nèi)皮細胞中高表達,參與調(diào)控腫瘤細胞的增殖、血管生成以及細胞遷移等活動,是腫瘤診斷及治療的理想靶點。由于整合素αvβ3可以特異性識別精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)序列,多種RGD肽類及其類似物已被開發(fā)用于靶向整合素αvβ3。但是其親和性低、特異性差等問題限制了臨床上應(yīng)用。因此,開發(fā)專一高效的新型整合素αvβ3靶向肽對于腫瘤的診斷和治療具有重要意義。本文通過計算機模擬及體內(nèi)外實驗,設(shè)計并篩選得到了一條整合素αvβ3靶向肽,并將其用于腫瘤的診斷及治療。(一)制備ROS響應(yīng)型整合素αvβ3雙靶向造影劑,并探討了其在腫瘤診斷上的有效性;(二)對靶向肽進行優(yōu)化修飾,合成了靶向整合素αvβ3的抗腫瘤藥物,研究了其腫瘤靶向性以及抗腫瘤活性。本論文分為以下三個部分:第一部分,整合素αvβ3靶向肽的設(shè)計及篩選�；谡纤卅羦β3的晶體結(jié)構(gòu),利用計算機輔助藥物設(shè)...

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 整合素
        1.1.1 整合素家族概況
        1.1.2 整合素的功能
        1.1.3 整合素的表達
    1.2 整合素αvβ3在腫瘤中的作用
        1.2.1 整合素αvβ3與腫瘤細胞增殖
        1.2.2 整合素αvβ3與腫瘤血管生成
        1.2.3 整合素αvβ3與腫瘤轉(zhuǎn)移
    1.3 整合素αvβ3抑制劑研究現(xiàn)狀
        1.3.1 單克隆抗體
        1.3.2 小分子肽類
        1.3.3 非肽類小分子
    1.4 整合素αvβ3與腫瘤診斷與治療
        1.4.1 整合素αvβ3與腫瘤診斷
        1.4.2 整合素αvβ3與腫瘤治療
    1.5 研究目的及意義
第二章 整合素αvβ3靶向肽的設(shè)計及篩選
    2.1 前言
    2.2 實驗材料及儀器
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 實驗儀器及設(shè)備
    2.3 實驗方法
        2.3.1 多肽的設(shè)計及虛擬篩選
        2.3.2 候選肽的體外篩選
        2.3.3 RWrNR的親和力
        2.3.4 RWrNR的細胞攝取及分布
        2.3.5 RWrNR的特異性攝取(受體阻斷法)
        2.3.6 RWrNR的特異性攝取(基因敲除法)
        2.3.7 RWrNR的血清穩(wěn)定性
        2.3.8 荷瘤小鼠模型的建立
        2.3.9 RWrNR的體內(nèi)腫瘤靶向性
        2.3.10 統(tǒng)計學(xué)分析
    2.4 實驗結(jié)果與討論
        2.4.1 候選肽的設(shè)計及篩選
        2.4.2 候選肽的細胞攝取
        2.4.3 RWr NR對整合素αvβ3 的親和性
        2.4.4 RWr NR對整合素αvβ3 的特異性
        2.4.5 RWrNR的生物穩(wěn)定性
        2.4.6 RWrNR的體內(nèi)靶向性
    2.5 本章小結(jié)
第三章 ROS響應(yīng)型整合素αvβ3 雙靶向診斷試劑的開發(fā)及應(yīng)用
    3.1 前言
    3.2 實驗材料及儀器
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 實驗儀器及設(shè)備
    3.3 實驗方法
        3.3.1 RWrNR的細胞攝取(激光共聚焦法)
        3.3.2 RWrNR的特異性攝取(流式細胞法)
        3.3.3 Hydro-Cy5-RWr NR的合成
        3.3.4 Hydro-Cy5-RWr NR的光譜特性
        3.3.5 Hydro-Cy5-RWr NR對 ROS的特異性及敏感性
        3.3.6 Hydro-Cy5-RWr NR的特異性識別
        3.3.7 Hydro-Cy5-RWr NR的三維瘤球成像
        3.3.8 Hydro-Cy5-RWr NR的細胞毒性
        3.3.9 Hydro-Cy5-RWr NR的體內(nèi)長期毒性
        3.3.10 荷瘤小鼠模型的建立
        3.3.11 Hydro-Cy5-RWr NR的體內(nèi)腫瘤靶向性
        3.3.12 統(tǒng)計學(xué)分析
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 RWrNR的細胞攝取
        3.4.2 Hydro-Cy5-RWr NR的合成及表征
        3.4.3 Hydro-Cy5-RWr NR的腫瘤特異性
        3.4.4 Hydro-Cy5-RWr NR的三維瘤球成像
        3.4.5 Hydro-Cy5-RWr NR的生物安全性
        3.4.6 Hydro-Cy5-RWr NR的體內(nèi)特異性成像
    3.5 本章小結(jié)
第四章 基于多價效應(yīng)的抗腫瘤靶向肽的開發(fā)及應(yīng)用
    4.1 前言
    4.2 實驗材料及儀器
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 實驗儀器及設(shè)備
    4.3 實驗方法
        4.3.1 Octopus-R的設(shè)計及合成
        4.3.2 Octopus-R的純度
        4.3.3 Octopus-R的光譜特性
        4.3.4 Octopus-R的質(zhì)譜鑒定
        4.3.5 Octopus-R的粒徑及Zeta電位
        4.3.6 Octopus-R的血清穩(wěn)定性
        4.3.7 Octopus-R的親和性
        4.3.8 Octopus-R的抗細胞增殖
        4.3.9 Octopus-R的抗血管生成
        4.3.10 Octopus-R的抗細胞遷移(細胞劃痕法)
        4.3.11 Octopus-R的抗細胞遷移(Transwell法)
        4.3.12 Octopus-R-Cy5 的合成
        4.3.13 荷瘤小鼠模型的建立
        4.3.14 Octopus-R-Cy5 的體內(nèi)靶向性
        4.3.15 Octopus-R-Cy5 的體內(nèi)特異性
        4.3.16 Octopus-R的體內(nèi)抗腫瘤
        4.3.17 統(tǒng)計學(xué)分析
    4.4 實驗結(jié)果與討論
        4.4.1 Octopus-R的合成及表征
        4.4.2 Octopus-R的親和性
        4.4.3 Octopus-R的體外穩(wěn)定性
        4.4.4 Octopus-R的抗細胞增殖
        4.4.5 Octopus-R的抗血管生成
        4.4.6 Octopus-R的抗細胞遷移
        4.4.7 Octopus-R的體內(nèi)靶向性
        4.4.8 Octopus-R的體內(nèi)抗腫瘤
    4.5 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 主要結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
攻讀碩士期間學(xué)術(shù)成果
致謝



本文編號：3904374