本文關(guān)鍵詞：干燥對白果中銀杏酚酸的影響及銀杏酚與順鉑聯(lián)合應(yīng)用對腫瘤作用效果的觀察，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：銀杏酸和銀杏酚為烷基酚酸類小分子化合物,存在于銀杏(Ginkgo biloba L.)的葉、果和外種皮中,其中銀杏酸被認(rèn)為是導(dǎo)致白果過敏的主要物質(zhì),因此在白果加工過程中,降低銀杏酚酸類化合物含量,以達(dá)到食品安全的要求。與此同時(shí),該類化合物又表現(xiàn)出突出的殺菌、殺蟲和抗腫瘤活性,在食品藥品和植物農(nóng)藥的開發(fā)方面有十分巨大的應(yīng)用潛力。本文首先從白果干燥處理角度出發(fā),研究不同干燥方法對白果中銀杏酸、銀杏酚含量的影響。其次,研究銀杏酸降解產(chǎn)物銀杏酚對順鉑治療荷肝癌小鼠療效的影響。并初步探索銀杏酚抗腫瘤的作用機(jī)理。研究的主要結(jié)論如下:1、采用微波和紅外對白果進(jìn)行干燥,以60℃烘干為參照,對比不同干燥方法對其中銀杏酸、銀杏酚含量的影響。結(jié)果表明:與60℃烘干相比,白果經(jīng)700W微波、80℃紅外干燥處理后銀杏酸、銀杏酚含量稍有降低。在白果漿中加一定量Na2CO3靜置2~12 h,再于同樣條件干燥,發(fā)現(xiàn)加堿處理后銀杏酸、銀杏酚的含量明顯降低,其降低率與加堿處理時(shí)間無依賴關(guān)系;與80℃紅外加堿干燥相比,700W微波加堿干燥處理后白果中銀杏酸含量降低了39%,銀杏酚含量降低了23.3%。2、銀杏酚體外對HepG2、SW480細(xì)胞遷移、侵襲的作用。采用MTT法,檢測銀杏酚及其與順鉑聯(lián)用對HepG2、SW480、HGC三種細(xì)胞存活率的影響;采用Transwell小室實(shí)驗(yàn),探討銀杏酚對HepG2、SW480細(xì)胞遷移、侵襲的作用;采用Western blot觀察MMP-7、Rho A和P-AKT的表達(dá)情況。結(jié)果表明,在0~80μg/mL時(shí),銀杏酚體外對HepG2、SW480、HGC的增殖具有很好的抑制作用。當(dāng)順鉑與銀杏酚按照1:2、1:4、1:8的濃度比例聯(lián)用時(shí),表現(xiàn)為協(xié)同作用,聯(lián)合指數(shù)分別為1.23、1.19、1.16。分別用20、40、80μg/mL銀杏酚處理HepG2、SW480細(xì)胞24h后,兩種細(xì)胞的遷移、侵襲能力隨著銀杏酚濃度的增加而逐漸減弱。不同濃度銀杏酚處理HepG2、SW480 24h后觀察到,隨著銀杏酚濃度的增加,MMP-7和Rho A、P-AKT的表達(dá)量逐漸降低。3、銀杏酚與順鉑聯(lián)用對H22荷瘤小鼠腫瘤生長的影響。昆明小鼠接種H22肝癌細(xì)胞構(gòu)造實(shí)體瘤模型。分別以7.5 mg/kg順鉑、1/2順鉑(3.75 mg/kg)、40mg/kg銀杏酚,及1/2順鉑(3.75 mg/kg)聯(lián)合銀杏酚10 mg/kg(低)或20 mg/kg(中)或40 mg/kg(高)隔天腹腔給藥10次,取血后處死。結(jié)果表明40 mg/kg銀杏酚聯(lián)合1/2順鉑(3.75 mg/kg)治療荷H22小鼠的抑瘤效果與7.5 mg/kg順鉑組接近且明顯優(yōu)于3.75 mg/kg順鉑組,降低順鉑的毒性,避免了小鼠體重減輕。計(jì)算Q值=1.461.15,說明40 mg/kg銀杏酚能提高3.75 mg/kg順鉑的抑瘤能力;與3.75 mg/kg順鉑組相比,1/2順鉑(3.75 mg/kg)與40 mg/kg銀杏酚的聯(lián)用,提高了小鼠的胸腺、脾臟指數(shù),40 mg/kg銀杏酚對順鉑具有減毒增效的作用。4、銀杏酚對順鉑化療Heps肝癌小鼠血清中IFN-γ、IL-2、TNF-α水平的影響。昆明小鼠接種Heps腫瘤細(xì)胞構(gòu)造移植瘤模型。分別以順鉑(3.75 mg/kg)、銀杏酚組(40 mg/kg)、順鉑(3.75 mg/kg)+20 mg/kg低劑量銀杏酚、順鉑(3.75mg/kg)+40 mg/kg高劑量銀杏酚,隔天腹腔給藥10次,取血后處死。結(jié)果顯示40 mg/kg銀杏酚與順鉑聯(lián)用不僅能提高小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和肝臟指數(shù),還能顯著升高血清中IFN-γ、IL-2、TNF-α的水平,Q值=1.16㧐1.15,說明40 mg/kg銀杏酚能提高3.75 mg/kg順鉑的抑瘤能力。40 mg/kg銀杏酚對順鉑具有增效作用,可能通過拮抗順鉑對化療小鼠免疫功能的抑制作用,增強(qiáng)其抗腫瘤能力。
【關(guān)鍵詞】：銀杏酚 肝癌細(xì)胞株 動物模型 增效減毒 免疫調(diào)節(jié)
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R73-36
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-13
• 第一章 緒論13-19
• 1.1 引言13-14
• 1.2 白果的紅外和微波干燥14-15
• 1.2.1 紅外、微波干燥的特點(diǎn)14
• 1.2.2 銀杏酸的脫羧降解14-15
• 1.3 銀杏酚的生物活性15-16
• （1）殺蟲作用15
• （2）致過敏作用15
• （3）抗腫瘤作用15-16
• 1.4 中藥及其活性成分與順鉑聯(lián)用在治療腫瘤中的協(xié)同作用16-17
• 1.5 本研究的意義及主要研究內(nèi)容17-19
• 1.5.1 本研究的意義17
• 1.5.2 本文的主要研究內(nèi)容17-19
• 第二章 微波、紅外干燥對白果中銀杏酚酸含量的影響19-27
• 2.1 前言19
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料19
• 2.2.1 主要試劑19
• 2.2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備19
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法19-21
• 2.3.1 白果漿樣品的干燥19-20
• 2.3.2 含水量測定20
• 2.3.3 薄層干燥的動力學(xué)模型20-21
• 2.3.4 干燥樣品中銀杏酸和銀杏酚含量的檢測21
• 2.4 結(jié)果與分析21-25
• 2.4.1 不同干燥方法對白果粉品質(zhì)的影響21-22
• 2.4.2 白果漿微波、紅外干燥的失水特性22-23
• 2.4.3 動力學(xué)模型23-24
• 2.4.4 不同干燥處理對白果中銀杏酚酸含量的影響24-25
• 2.5 討論25-26
• 2.6 本章小結(jié)26-27
• 第三章 銀杏酚體外對HepG2細(xì)胞遷移、侵襲的影響27-40
• 3.1 前言27
• 3.2 實(shí)驗(yàn)材料27-28
• 3.2.1 細(xì)胞株27
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)材料和試劑27
• 3.2.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備27-28
• 3.2.4 主要試劑的配制28
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法28-30
• 3.3.1 銀杏酚及其與順鉑聯(lián)用對腫瘤細(xì)胞生長的抑制作用28-29
• 3.3.2 銀杏酚對HepG2、SW480細(xì)胞遷移能力的影響29-30
• 3.3.4 銀杏酚對HepG2、SW480細(xì)胞侵襲能力的影響30
• 3.3.5 Western blot檢測與遷移、侵襲相關(guān)蛋白的變化30
• 3.3.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析30
• 3.4 結(jié)果與分析30-38
• 3.4.1 銀杏酚對HepG2、SW480、HGC細(xì)胞生長的抑制作用30-31
• 3.4.2 銀杏酚與順鉑聯(lián)用對HepG2細(xì)胞生長的影響31-32
• 3.4.3 銀杏酚對HepG2、SW480細(xì)胞遷移、侵襲能力的影響32-37
• 3.4.4 銀杏酚對MMP-7、Rho A和P-AKT蛋白表達(dá)的影響37-38
• 3.5 討論38
• 3.6 本章小結(jié)38-40
• 第四章 銀杏酚對順鉑化療H22荷瘤小鼠療效的影響40-47
• 4.1 前言40
• 4.2 實(shí)驗(yàn)材料40-41
• 4.2.1 試劑、材料40
• 4.2.2 細(xì)胞株40
• 4.2.3 實(shí)驗(yàn)動物40
• 4.2.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備40-41
• 4.3 實(shí)驗(yàn)方法41-42
• 4.3.1 細(xì)胞株的培養(yǎng)41
• 4.3.2 移植瘤模型的建立41
• 4.3.3 銀杏酚與順鉑聯(lián)用對H22荷瘤小鼠的分組情況、給藥途徑41-42
• 4.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析42
• 4.5 結(jié)果與分析42-45
• 4.5.1 銀杏酚與順鉑聯(lián)用對荷H22小鼠生存狀態(tài)的影響42
• 4.5.2 銀杏酚與順鉑聯(lián)用對荷H22小鼠體質(zhì)量、瘤重、抑瘤率影響及Q值計(jì)算42-43
• 4.5.3 銀杏酚與順鉑聯(lián)用對 H22 荷瘤鼠存活時(shí)間的影響43-44
• 4.5.4 銀杏酚與順鉑聯(lián)用對H22荷瘤鼠免疫器官的影響44
• 4.5.5 銀杏酚與順鉑聯(lián)用對H22荷瘤鼠腫瘤組織形態(tài)的影響44-45
• 4.6 討論45-46
• 4.7 本章小結(jié)46-47
• 第五章 銀杏酚對順鉑化療Heps肝癌小鼠血清中IFN-γ、IL-2、TNF-α水平的影響47-55
• 5.1 前言47
• 5.2 實(shí)驗(yàn)材料47-48
• 5.2.1 試劑、材料47
• 5.2.2 細(xì)胞株47
• 5.2.3 實(shí)驗(yàn)動物47
• 5.2.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備47-48
• 5.3 實(shí)驗(yàn)方法48-49
• 5.3.1 細(xì)胞株的培養(yǎng)48
• 5.3.2 移植瘤模型的建立48
• 5.3.3 銀杏酚與順鉑聯(lián)用對Heps荷瘤小鼠的分組情況、給藥途徑48-49
• 5.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析49
• 5.5 結(jié)果與分析49-53
• 5.5.1 銀杏酚與順鉑聯(lián)用對Heps荷瘤鼠體質(zhì)量、瘤重、抑瘤率影響及Q值計(jì)算49-50
• 5.5.2 銀杏酚與順鉑聯(lián)用對Heps荷瘤鼠生存?zhèn)�數(shù)的影響50
• 5.5.3 銀杏酚與順鉑聯(lián)用對Heps荷瘤鼠免疫器官的影響50-51
• 5.5.4 銀杏酚與順鉑聯(lián)用對荷Heps小鼠腫瘤生長大小的影響51-52
• 5.5.5 銀杏酚與順鉑聯(lián)用對荷Heps小鼠血清中IFN-γ、IL-2、TNF-α的作用52-53
• 5.6 討論53-54
• 5.7 本章小結(jié)54-55
• 第六章 結(jié)論與展望55-58
• 6.1 本論文的主要結(jié)論55-57
• 6.2 研究展望57-58
• 參考文獻(xiàn)58-64
• 致謝64-65
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文65

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本文編號：389235