目的:研究苯并咪唑出芽抑制解除同源物1(BUB 1)在膀胱癌中的表達(dá)情況,并分析BUB 1與膀胱癌患者臨床病例資料及膀胱癌復(fù)發(fā)的相關(guān)性。研究BUB1在調(diào)節(jié)膀胱癌細(xì)胞干細(xì)胞潛能中的作用,分析其表達(dá)水平與干細(xì)胞主要轉(zhuǎn)錄因子之間的相關(guān)性。探討B(tài)UB1磷酸化激活STAT3的機制研究。方法:收集62例膀胱尿路上皮癌組織標(biāo)本和40例正常膀胱黏膜組織標(biāo)本應(yīng)用免疫組化技術(shù)測定BUB1表達(dá)情況;應(yīng)用western–blot技術(shù)檢測四對同一來源的膀胱癌組織和癌旁正常組織BUB1表達(dá)情況;應(yīng)用qRT-PCR技術(shù)檢測68例膀胱癌患者腫瘤組織及正常膀胱組織BUB 1 mRNA水平表達(dá)情況,并根據(jù)其結(jié)果與臨床資料及隨訪結(jié)果,通過Kaplan-Meier生存曲線及COX比例風(fēng)險回歸模型分析其與臨床病理分期、分級、膀胱癌復(fù)發(fā)可能的相關(guān)性。以CD 44和CD 24為干細(xì)胞標(biāo)志物,通過流式細(xì)胞術(shù)篩選膀胱癌細(xì)胞系EJ、T24、HTB-9中的腫瘤干細(xì)胞;通過qRT-PCR方法比較敲低BUB 1后干細(xì)胞主要轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)水平的改變,通過細(xì)胞成球?qū)嶒灡容^改變BUB1表達(dá)水平后不同CD44表達(dá)水平的膀胱癌HTB-9細(xì)胞成球數(shù)目;建...

【文章頁數(shù)】：109 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、BUB1在膀胱癌組織中的表達(dá)及臨床意義
    1.1 對象和方法
        1.1.1 研究對象
        1.1.2 主要實驗試劑
        1.1.3 主要試劑配制
        1.1.4 主要儀器
        1.1.5 實驗方法
        1.1.6 統(tǒng)計學(xué)處理
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 BUB1在膀胱尿路上皮癌中的表達(dá)情況
            1.2.1.1 免疫組化檢測BUB1在膀胱癌中的表達(dá)
            1.2.1.2 Western blot檢測BUB1在膀胱癌中的表達(dá)
            1.2.1.3 mRNA水平檢測BUB1在膀胱癌中的表達(dá)
        1.2.2 BUB1表達(dá)情況的臨床意義
            1.2.2.1 癌組織中BUB1表達(dá)量與臨床病理相關(guān)性分析
            1.2.2.2 BUB1表達(dá)量與膀胱癌復(fù)發(fā)的相關(guān)性分析
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、BUB1調(diào)節(jié)膀胱癌細(xì)胞干細(xì)胞潛能
    2.1 對象與方法
        2.1.1 研究對象
        2.1.2 主要實驗試劑
        2.1.3 主要試劑配制
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 實驗方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 流式細(xì)胞儀分選腫瘤干細(xì)胞結(jié)果
        2.2.2 HTB-9轉(zhuǎn)染效果驗證
        2.2.3 BUB1表達(dá)情況與CD44 的關(guān)系
        2.2.4 BUB1表達(dá)水平不同影響細(xì)胞成球?qū)嶒灲Y(jié)果
        2.2.5 BUB1表達(dá)水平與其他干細(xì)胞相關(guān)基因的關(guān)系
        2.2.6 顯微鏡下觀察BUB1影響HTB-9有絲分裂過程
        2.2.7 體內(nèi)裸鼠成瘤實驗結(jié)果
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、BUB1磷酸化STAT3的機制研究
    3.1 對象和方法
        3.1.1 研究對象
        3.1.2 主要實驗試劑
        3.1.3 主要試劑配制
        3.1.4 主要儀器
        3.1.5 實驗方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 BUB1可以物理性結(jié)合STAT3
            3.2.1.1 BUB1表達(dá)情況與STAT3 具有相關(guān)性
            3.2.1.2 BUB1可以結(jié)合STAT3 形成蛋白復(fù)合物
            3.2.1.3 BUB1結(jié)合位點STAT3研究
        3.2.2 BUB1表達(dá)水平影響STAT3 磷酸化水平
        3.2.3 BUB1調(diào)節(jié)SOX2 啟動子區(qū)活性
        3.2.4 體內(nèi)實驗驗證BUB1對STAT3和SOX2 表達(dá)水平的影響
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 有絲分裂檢查點及BUB1研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷



本文編號：3842369