研究目的利用前列腺癌腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(CAF)與正常成纖維細(xì)胞(NF)分泌的exosome分別處理腫瘤細(xì)胞,初步探討CAF來源的exosome及其所含的特定生物分子在前列腺癌細(xì)胞發(fā)生上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)中的作用。研究方法(1)利用Western Blot和細(xì)胞免疫熒光(IF)的方法鑒定CAF與NF,并提取CAF與NF的條件培養(yǎng)基處理前列腺腫瘤細(xì)胞,Western Blot驗(yàn)證不同培養(yǎng)基對腫瘤細(xì)胞的影響。(2)利用超高速梯度離心技術(shù)提取CAF與NF條件培養(yǎng)基中的exosome,并使用透射電子顯微鏡對其進(jìn)行鑒定。(3)利用PKH-67對CAF及NF分泌exosome進(jìn)行染色,IF下觀察腫瘤細(xì)胞對exosome的攝取情況。(4)利用Transwell migration assay,Western Blot和IF分析exosome對前列腺腫瘤細(xì)胞遷移作用及EMT的影響。(5)查閱相關(guān)文獻(xiàn)及數(shù)據(jù)庫,初步鑒定可能引起上述作用的mi RNA,利用RT-PCR及q PCR進(jìn)行分析及定量,利用mi RNA抑制劑處理CAF及NF后重復(fù)上述實(shí)驗(yàn),并通過Transwell migration assa...

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
1 對象和方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)對象
    1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法
2 結(jié)果
    2.1 鑒定腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAF）與正常成纖維細(xì)胞（NF）
    2.2 CAF及NF條件培養(yǎng)基對前列腺腫瘤細(xì)胞EMT轉(zhuǎn)化的影響
    2.3 鑒定exosome
    2.4 IF檢測前列腺腫瘤細(xì)胞吸收exosome情況
    2.5 Exosome對前列腺腫瘤細(xì)胞遷移能力的影響
    2.6 Exosome對前列腺腫瘤細(xì)胞EMT轉(zhuǎn)化的影響
    2.7 通過文獻(xiàn)及數(shù)據(jù)庫查找相關(guān)miRNA并驗(yàn)證表達(dá)情況
    2.8 PCR檢測四種miRNA在exosome中表達(dá)情況
    2.9 攝取exosome后前列腺腫瘤細(xì)胞內(nèi)miRNA水平變化情況
    2.10 MiRNA inhibitor處理后相關(guān)miRNA的表達(dá)水平
    2.11 MiRNA inhibitor處理后CAF exosome對前列腺腫瘤細(xì)胞EMT的影響
    2.12 MiRNA inhibitor處理后CAF exosome對前列腺腫瘤細(xì)胞遷移能力的影響
3.討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 外泌體在惡性腫瘤進(jìn)展中的作用及診療意義
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號：3789978