目的:惡性腫瘤是威脅人類生命健康的重大疾病,傳統(tǒng)的手術(shù)治療、化學(xué)藥物療法、放射療法和免疫療法等雖然各有優(yōu)勢,但在應(yīng)用中也存在諸多局限,并不能完全滿足需要。因此,開發(fā)特異性好和療效高的抗腫瘤藥物仍然十分必要。RNase作為一類廣泛存在的具有細(xì)胞毒性作用的天然酶類,逐漸顯示出作為抗腫瘤藥物的潛力。已有研究表明在不同條件下不同的RNase具有促癌或者抑癌的多重作用,但是其具體功能機(jī)制尚有待進(jìn)一步闡明。為此,本文以人非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞為模型,深入研究RNase A對A549細(xì)胞不同生物學(xué)行為和功能的影響,揭示其作用機(jī)制,為研發(fā)基于RNase的抗癌藥物提供理論基礎(chǔ)。此外,本文初步研究了RNase A對大腸桿菌DH5α增殖的影響,以期為進(jìn)一步闡釋RNase A與細(xì)菌感染間的關(guān)系提供基礎(chǔ)。方法:1.RNase A對A549細(xì)胞生物學(xué)行為和功能的影響:1)分別通過光學(xué)顯微鏡和激光共聚焦掃描顯微鏡觀察RNase A處理對A549細(xì)胞形態(tài)的影響。2)通過Transwell法檢測不同濃度RNase A處理對A549細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響。3)利用細(xì)胞球形成實驗檢測不同濃度RNase A處理對A549...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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縮略語
中文摘要
Abstract
第一章 RNase A對人非小細(xì)胞肺癌A549 細(xì)胞生物學(xué)行為和功能的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實驗材料
            2.1.1 細(xì)胞系
            2.1.2 主要試劑與材料
            2.1.3 主要儀器
            2.1.4 溶液配制
        2.2 實驗方法
            2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2.2 顯微鏡觀察RNase A處理A549 細(xì)胞生長狀態(tài)
            2.2.3 激光共聚焦顯微鏡觀察RNase A處理A549細(xì)胞表面?zhèn)巫阕兓?br>            2.2.4 Transwell法檢測RNase A處理A549 細(xì)胞遷移能力
            2.2.5 Transwell結(jié)合基質(zhì)膠法檢測RNase A處理A549 細(xì)胞侵襲能力
            2.2.6 細(xì)胞成球?qū)嶒灆z測RNase A處理A549細(xì)胞球形成能力
            2.2.7 CCK-8 法檢測RNase A處理A549 細(xì)胞增殖水平
            2.2.8 CCK-8 法檢測RNase A聯(lián)合阿霉素處理A549 細(xì)胞增殖水平
            2.2.9 CCK-8 法檢測RNase A聯(lián)合順鉑處理A549 細(xì)胞增殖水平
            2.2.10 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 實驗結(jié)果
        3.1 RNase A促進(jìn)A549 細(xì)胞呈生長離散狀態(tài)
        3.2 RNase A促進(jìn)A549 細(xì)胞表面?zhèn)巫阍黾?br>        3.3 RNase A促進(jìn)A549 細(xì)胞遷移能力
        3.4 RNase A促進(jìn)A549 細(xì)胞侵襲能力
        3.5 RNase A抑制A549 細(xì)胞球形成
        3.6 RNase A對 A549 細(xì)胞增殖水平的影響
        3.7 RNase A聯(lián)合化療藥物對A549 細(xì)胞的殺傷作用
    4 討論
    5 小結(jié)
第二章 RNase A對大腸桿菌DH5α增殖的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實驗材料
            2.1.1 菌株
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要儀器
            2.1.4 溶液配制
        2.2 實驗方法
            2.2.1 菌體活化與種子液制備
            2.2.2 不同濃度RNase A處理LB和 M9 培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌DH5α
            2.2.3 RNase A預(yù)處理LB培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌DH5α
            2.2.4 RNase A處理大腸桿菌DH5α在LB固體培養(yǎng)基培養(yǎng)菌落
    3 實驗結(jié)果
        3.1 RNase A促進(jìn)大腸桿菌DH5α在LB和 M9 培養(yǎng)基中的增殖
        3.2 RNase A不同處理方式對大腸桿菌DH5α在LB培養(yǎng)基中增殖的影響
        3.3 RNase A處理促進(jìn)大腸桿菌菌落形成
    4 討論
    5 小結(jié)
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄 個人簡歷
致謝
綜述 RNase的腫瘤殺傷作用
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3772973