腫瘤組織中的腫瘤細(xì)胞并不是均一的群體,其中存在一小部分細(xì)胞,這一小部分的細(xì)胞具有自我更新并產(chǎn)生異質(zhì)性腫瘤的能力,表現(xiàn)出干細(xì)胞樣特性,被稱(chēng)為腫瘤干細(xì)胞(cancer stem cell,CSC)[1]。腫瘤干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)為闡明腫瘤的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和耐藥提供了理論依據(jù)[2]。許多研究提示腫瘤干細(xì)胞可能是腫瘤發(fā)生、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和耐藥的根源,探索腫瘤干細(xì)胞的作用和調(diào)控機(jī)制,有望為開(kāi)發(fā)靶向腫瘤干細(xì)胞的新的治療手段奠定基礎(chǔ)。微小RNA(micoRNA,miRNA)是一類(lèi)非編碼的小分子RNA,長(zhǎng)度約為19-22個(gè)核苷酸的小分子[3]。miRNA由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的大小約為70-90nt的單鏈前體經(jīng)過(guò)Dicer酶進(jìn)行剪切加工生成,其通過(guò)與靶基因的3’非編碼區(qū)(3’untranslate region,3’UTR)堿性互補(bǔ)配對(duì)相結(jié)合,可以特異性抑制或降解靶基因的mRNA,進(jìn)而抑制靶基因的翻譯,調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)[3,4]。越來(lái)越多的證據(jù)表明,micoRNA在許多腫瘤中表達(dá)異常,能夠參與腫瘤的形成、生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)和耐藥等,其中一些miRNAs與肝癌干細(xì)胞特性維持有著密切的聯(lián)系[5,6]。因此,尋找在肝癌干細(xì)胞和肝癌非...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
個(gè)人簡(jiǎn)歷
摘要
Abstract
前言
第一部分 篩選及驗(yàn)證肝癌干細(xì)胞中表達(dá)顯著下調(diào)的miRNA
    前言
    材料與方法
        1. 實(shí)驗(yàn)材料
        2. 實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)篩選肝癌組織中表達(dá)下調(diào)顯著的miRNA
        2. 篩選肝癌干細(xì)胞中中表達(dá)下調(diào)顯著特異的miRNA
        3.驗(yàn)證miR-486-5p在肝癌和肝癌細(xì)胞中的表達(dá)情況
    討論
第二部分 miR4865p對(duì)肝癌干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響
    前言
    材料和方法
        1. 實(shí)驗(yàn)材料
        2. 實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1 miR4865p抑制肝癌干細(xì)胞的增殖和成瘤能力
        2. miR4865p抑制肝癌干細(xì)胞的干性
        3. miR4865p體外抑制肝癌干細(xì)胞的侵襲和遷移
        4.miR-486-5p對(duì)肝癌細(xì)胞耐藥性的影響
第三部分 miR4865p靶基因的篩選和鑒定
    前言
    材料與方法
        1. 材料
        2. 實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1. miR4865p靶基因篩選
        2. 熒光定量RT-PCR篩選mi R4865P的靶基因
        3. 在肝癌組織中驗(yàn)證SIRT1是miR4865p的靶基因
        4. 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)證實(shí)SIRT1是miR4865p的靶基因
    討論
第四部分 SIRT1對(duì)肝癌干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響
    前言
    材料與方法
        1. 實(shí)驗(yàn)材料
        2. 實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1. SIRT1慢病毒干涉載體的構(gòu)建
        2. 構(gòu)建穩(wěn)定RNA干涉SIRT1（shSIRT1）的肝癌細(xì)胞系
        3.SIRT1對(duì)肝癌細(xì)胞增殖能力的影響
        4. SIRT1對(duì)肝癌細(xì)胞耐藥性的影響
    討論
全文小結(jié)
Reference
附錄
縮略詞表
綜述 MicoRNA調(diào)節(jié)肝癌干細(xì)胞的功能及機(jī)制的研究
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的成果
論文全文



本文編號(hào)：3737522