研究背景肝細(xì)胞癌是臨床上常見的惡性腫瘤,居惡性腫瘤的第5位,在全世界與腫瘤相關(guān)的死亡中排第3位。肝細(xì)胞癌（HCC）是肝癌的主要組織學(xué)亞型,占原發(fā)性肝癌的90%,遺傳和表觀遺傳學(xué)改變,慢性乙型病毒感染或丙型肝炎病毒感染,黃曲霉毒素暴露,吸煙,肥胖和糖尿病是肝癌的主要危險因素,肝癌預(yù)后不良的原因主要是由于高發(fā)生率的腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。目前,移植是治療HCC的最有效方法,但由于腫瘤負(fù)擔(dān)或肝功能不良,超過70%的晚期病例不適合移植。晚期不能耐受uuouuuuu手術(shù)的患者主要采取化療,多靶點(diǎn)激酶抑制劑索拉非尼是FDA批準(zhǔn)的一線靶向藥物,但是也只能為晚期肝癌患者提供2.8個月的生存獲益,此外由于不良反應(yīng)和耐藥性,使得其治療效果尚不滿意,因此努力尋找有效的藥物和最優(yōu)化的治療方法是當(dāng)前的研究重點(diǎn)。BRD4全稱為bromodomain-containing protein 4,即溴結(jié)構(gòu)域蛋白4,屬于BET家族成員。BET溴結(jié)構(gòu)域（bromodomain and extra-terminal domain）包含四種蛋白,即BRD2、BRD3、BRD4和BRDT。BET具有保守的模塊化結(jié)構(gòu):包括兩段N-末端串聯(lián)... 

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【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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1 引言
2 材料
    2.1 細(xì)胞株
    2.2 藥物及試劑
    2.3 儀器與設(shè)備
    2.4 常用液的配制
3 實驗方法
    3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.1.1 細(xì)胞傳代與培養(yǎng)
        3.1.2 細(xì)胞計數(shù)
        3.1.3 細(xì)胞凍存
        3.1.4 細(xì)胞復(fù)蘇
    3.2 MTT 法測定細(xì)胞增殖抑制率
        3.2.1 JQ1和索拉非尼對肝癌細(xì)胞增殖抑制率和IC50測定
        3.2.2 JQ1和索拉非尼聯(lián)用對肝癌細(xì)胞增殖抑制率測定
        3.2.3 JQ1和索拉非尼聯(lián)合用藥評價方式
    3.3 流式細(xì)胞儀測取細(xì)胞周期抑制率
    3.4 流式細(xì)胞儀測取細(xì)胞凋亡率
    3.5 Western-Blot檢測
        3.5.1 蛋白質(zhì)的樣品制備
        3.5.2 蛋白定量
        3.5.3 蛋白電泳
        3.5.4 轉(zhuǎn)膜
        3.5.5 封閉
        3.5.6 一抗孵育
        3.5.7 二抗孵育
        3.5.8 顯影
    3.6 統(tǒng)計學(xué)方法
4 結(jié)果
    4.1 JQ1對肝癌細(xì)胞的增殖抑制作用
    4.2 索拉非尼對肝癌細(xì)胞的增殖抑制作用
    4.3 JQ1與索拉非尼聯(lián)合對人肝癌細(xì)胞株增殖抑制作用
    4.4 JQ1 與索拉非尼聯(lián)合對人肝癌細(xì)胞株細(xì)胞周期的影響
    4.5 JQ1 和索拉非尼聯(lián)合對人肝癌細(xì)胞株的凋亡影響
    4.6 JQ1 與索拉非尼聯(lián)合作用對肝癌細(xì)胞的凋亡蛋白Bcl-2、BIM、癌基因c-MYC的表達(dá)影響
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄 個人簡歷
致謝
綜述 靶向 BET 溴結(jié)構(gòu)域在腫瘤中的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3708732