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利用實(shí)時(shí)細(xì)胞分析技術(shù)檢測(cè)前列腺與胰腺癌細(xì)胞藥物敏感性及Trim46基因低表達(dá)對(duì)胰腺癌細(xì)胞Capan-2的增殖和遷移能力的

發(fā)布時(shí)間:2022-11-04 01:21
  目的基于實(shí)時(shí)細(xì)胞分析的技術(shù)發(fā)展,探索一種更加簡(jiǎn)便穩(wěn)定的方法評(píng)估不同腫瘤細(xì)胞系對(duì)藥物的敏感性,為前列腺癌和胰腺癌的臨床治療選擇藥物提供參考。方法選取VCaP、DU145、PC-3、PC-3M-2B4和PC-3M-IE8五株人前列腺癌細(xì)胞系,和SW1900、Capan-2、PANC-1三株人胰腺癌細(xì)胞系,選用多西他賽、卡巴他賽和醋酸阿比特龍三種前列腺癌常用治療藥物,及鹽酸吉西他濱和替吉奧膠囊兩種胰腺癌常用治療藥物,細(xì)胞接種24小時(shí)后分別梯度濃度給藥,利用RTCA監(jiān)測(cè)給藥前后的細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn),計(jì)算藥物對(duì)前列腺癌細(xì)胞和胰腺癌細(xì)胞的半抑制濃度(IC50)。對(duì)胰腺癌細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)給藥,利用AO/EB染色和激光共聚焦觀察,驗(yàn)證鹽酸吉西他濱和替吉奧膠囊所得IC50值。結(jié)果多西他賽對(duì) VCaP、DU145、PC-3、PC-3M-2B4、PC-3M-IE8 五種細(xì)胞系 24h的 IC50 分別為 8.81 nM、11.61 nM、1.78 nM、1.44 nM、8.69 nM?ò退悓(duì)五種細(xì)胞系 24 h 的 IC50 分別為 3.73 nM、3.96 nM、10.41 nM、5.43 nM、7.37 nM... 

【文章頁(yè)數(shù)】:70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
第一部分 利用實(shí)時(shí)細(xì)胞分析技術(shù)檢測(cè)前列腺與胰腺癌細(xì)胞藥物敏感性
    摘要
    Abstract
    前言
    材料和方法
        2.1 材料
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
            2.1.2 實(shí)驗(yàn)藥物
            2.1.3 主要試劑
            2.1.4 主要儀器
        2.2 方法
            2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2.2 確定E-plate 16細(xì)胞最佳接種量
            2.2.3 實(shí)驗(yàn)藥物的配置
            2.2.4 RTCA藥物敏感性評(píng)價(jià)
            2.2.5 吖啶橙/溴化乙錠(AO/EB)雙熒光染色
            2.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    結(jié)果
        3.1 細(xì)胞最佳接種量的確定
        3.2 前列腺癌細(xì)胞對(duì)多西他賽敏感性對(duì)比分析
        3.3 前列腺癌細(xì)胞對(duì)卡巴他賽敏感性對(duì)比分析
        3.4 前列腺癌細(xì)胞對(duì)醋酸阿比特龍敏感性對(duì)比分析
        3.5 胰腺癌細(xì)胞對(duì)鹽酸吉西他濱敏感性對(duì)比分析
        3.6 胰腺癌細(xì)胞對(duì)替吉奧膠囊敏感性對(duì)比分析
        3.7 AO/EB染色驗(yàn)證胰腺癌細(xì)胞對(duì)鹽酸吉西他濱和替吉奧膠囊的敏感性
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 Trim46基因低表達(dá)對(duì)胰腺癌細(xì)胞Capan-2的增殖和遷移能力的抑制
    摘要
    Abstract
    前言
    材料和方法
        2.1 材料
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要儀器
        2.2 方法
            2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2.2 Trim46低表達(dá)胰腺癌細(xì)胞系的構(gòu)建
            2.2.3 Western blot檢測(cè)Trim46基因蛋白及相關(guān)蛋白表達(dá)情況
            2.2.4 免疫熒光觀察Trim46蛋白與相關(guān)蛋白在細(xì)胞內(nèi)共定位情況
            2.2.5 Trim46低表達(dá)對(duì)胰腺癌細(xì)胞增殖能力的影響
            2.2.6 Trim46低表達(dá)對(duì)胰腺癌細(xì)胞遷移能力的影響
            2.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    結(jié)果
        3.1 Capan-2 Trim46低表達(dá)細(xì)胞系的建立
        3.2 Trim46蛋白與相關(guān)蛋白在細(xì)胞內(nèi)共定位情況
        3.3 TRIM46低表達(dá)對(duì)相關(guān)蛋白表達(dá)量的影響
        3.4 Trim46低表達(dá)對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響
        3.5 Trim6低表達(dá)對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人基本情況
碩士期間發(fā)表論文情況


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]吉西他濱誘導(dǎo)胰腺癌PANC-1細(xì)胞耐藥與C-IAP2表達(dá)關(guān)系的研究[J]. 張帆,黃鶴光.  中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2016(06)
[2]體外腫瘤細(xì)胞藥敏試驗(yàn)方法概述[J]. 李婷,賈鈺銘,雷開(kāi)鍵.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2016(05)
[3]374例惡性腫瘤患者化療藥物敏感性研究[J]. 喻衛(wèi)紅,孫濤,劉文中,李英輝,逯曉波,陸垚.  腫瘤學(xué)雜志. 2014(05)
[4]胰腺癌綜合診治中國(guó)專(zhuān)家共識(shí)(2014年版)[J]. 王理偉,陳棟暉,李琦,樓文輝,夏廷毅,潘宏銘,王儉,張智弘,白永瑞.  臨床腫瘤學(xué)雜志. 2014(04)
[5]惡性腫瘤藥物敏感性試驗(yàn)方法及其臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 陳娟,程國(guó)華,陳歷排,汪小樂(lè).  中國(guó)藥房. 2013(25)
[6]腫瘤藥敏試驗(yàn)方法的研究進(jìn)展[J]. 沈續(xù)松,符立梧.  腫瘤研究與臨床. 2012 (01)
[7]腫瘤藥敏試驗(yàn)與臨床病理及療效的關(guān)系[J]. 顏克蘭,唐東平,張傳珉,左傳田,張潔清,袁衛(wèi)平,唐凱.  中國(guó)癌癥防治雜志. 2011(01)
[8]腫瘤治療的新里程碑——靶向藥物治療[J]. 孫燕.  腫瘤藥學(xué). 2011(01)
[9]腫瘤藥敏試驗(yàn)指導(dǎo)個(gè)體化治療的研究進(jìn)展[J]. 米彥軍,張傳釗,符立梧.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2009(11)
[10]評(píng)估腫瘤化療敏感性方法的研究進(jìn)展[J]. 喬建梁,孟興凱,張俊晶,齊力.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2008(05)



本文編號(hào):3700982

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