目的:探索低濃度鉻暴露促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞生長的可能機(jī)制,探討CEBPB通過IL6/STAT3信號通路在鉻促進(jìn)的前列腺癌細(xì)胞生長中的作用和機(jī)制,探討TGF-β-EMT信號通路在促進(jìn)低濃度鉻暴露前列腺癌進(jìn)展中的作用和機(jī)制。方法:1)使PC3處于低濃度鉻暴露環(huán)境中。通過MTT等方法檢測PC3細(xì)胞在低濃度鉻暴露下的生長情況。收集細(xì)胞總RNA和總蛋白,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測CEBPB mRNA表達(dá)水平,WB法檢測CEBPB蛋白表達(dá)水平。合成了靶向CEBPB的siRNA,并通過Lipofectamine 3000轉(zhuǎn)染到前列腺癌PC3細(xì)胞系中。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測CEBPB mRNA的表達(dá)。MTT法檢測轉(zhuǎn)染前后PC3細(xì)胞的生長能力。2)收集細(xì)胞總RNA,分泌蛋白和總蛋白,并通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測IL6的mRNA表達(dá)水平。通過ELISA和WB實(shí)驗(yàn)檢測IL6的蛋白表達(dá)水平,通過WB實(shí)驗(yàn)檢測磷酸化STAT3和總STAT3的表達(dá)水平。探討IL6/STAT3信號通路在該過程中的作用,并通過小分子抑制劑抑制STAT3的活化,MTT法檢測抑制IL6/STAT3信號通路后PC3細(xì)胞生長能力的變化;3)通過W... 

【文章頁數(shù)】：133 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、CEBPB在鉻促進(jìn)的前列腺癌細(xì)胞生長中的功能
    1.1 對象和方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.2 主要溶液配制
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.1.4 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        1.1.6 統(tǒng)計(jì)方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 低濃度鉻暴露促進(jìn)PC3 細(xì)胞生長
        1.2.2 低濃度鉻暴露上調(diào)PC3 細(xì)胞中CEBPB的表達(dá)水平
        1.2.3 敲低 CEBPB 后抑制低濃度鉻暴露促進(jìn)的 PC3 細(xì)胞生長
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、IL6/STAT3信號通路在促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞生長中的功能
    2.1 對象和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.2 主要溶液配制
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1.6 統(tǒng)計(jì)方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 低濃度鉻暴露上調(diào)PC3 細(xì)胞中IL6的mRNA表達(dá)水平
        2.2.2 低濃度鉻暴露上調(diào)PC3 細(xì)胞中IL6 的蛋白表達(dá)水平
        2.2.3 低濃度鉻暴露上調(diào)磷酸化STAT3 水平
        2.2.4 抑制STAT3 信號抑制了鉻暴露促進(jìn)的PC3 細(xì)胞生長
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、低劑量鉻暴露通過TGF-β-EMT通路促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞侵襲
    3.1 對象和方法
        3.1.1 研究對象
        3.1.2 引物
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.4 溶液配制
        3.1.5 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.6 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3.2 結(jié)果
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述 重金屬個分布代謝及其致癌作用
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Annual report on status of cancer in China, 2011[J]. Wanqing Chen,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Jie He.  Chinese Journal of Cancer Research. 2015(01)



本文編號：3695098