目的:前列腺癌在我國(guó)發(fā)病率逐年增高,且隨著年齡增加有遞增趨勢(shì)^[1]。前列腺癌患者在患病前期沒有明顯的癥狀,目前也缺乏有效的早期診斷方法,少數(shù)在早期診斷出前列腺癌的患者多為正常體檢時(shí)意外發(fā)現(xiàn)。多數(shù)患者在確診時(shí)已經(jīng)發(fā)展為晚期前列腺癌,喪失了前列腺根除術(shù)的合適時(shí)機(jī)^[2-4]。因此及早診斷和治療對(duì)前列腺癌患者至關(guān)重要。生物標(biāo)記物檢測(cè)對(duì)于惡性腫瘤的早期診斷近年來是臨床研究的重點(diǎn)內(nèi)容。Eya2（eyes absent homolog2）是EYA家族蛋白之一,具有高度保守的EYA結(jié)構(gòu)域,該家族成員可以編碼一系列轉(zhuǎn)錄輔助因子^[5]。近些年來,一些研究表明Eya2參與一些癌癥的發(fā)展,在包括肺癌,頭頸癌,宮頸癌以及膠質(zhì)瘤中等惡性腫瘤中均存在Eya2異常表達(dá)的現(xiàn)象^[6-9]。在本課題研究中我們將探究Eya2在前列腺癌中的表達(dá)模式,臨床意義,表達(dá)差異對(duì)前列腺癌細(xì)胞生物學(xué)功能的影響以及潛在的分子生物學(xué)機(jī)制,以判斷Eya2是否可能作為前列腺癌早期診斷的生物標(biāo)記物。研究方法:1組織樣本98例人類前列腺癌組織和16例前列腺正常組織... 

【文章頁(yè)數(shù)】：104 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
第一部分:Eya2在前列腺癌中高表達(dá)并促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞增殖和侵襲
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 免疫組織化學(xué)
            2.1.1 主要儀器及生產(chǎn)商
            2.1.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.1.3 組織樣本
            2.1.4 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2.1 主要儀器及生產(chǎn)商
            2.2.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.2.3 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.3 Western Blot
            2.3.1 主要儀器及生產(chǎn)商
            2.3.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.3.3 主要試劑配方
            2.3.4 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染與干擾
            2.4.1 主要儀器及生產(chǎn)商
            2.4.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.4.3 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
            2.5.1 主要儀器及生產(chǎn)商
            2.5.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.5.3 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.6 CCK-8和集落形成實(shí)驗(yàn)
            2.6.1 儀器及生產(chǎn)商
            2.6.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.6.3 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.7 TRANSWELL細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)
            2.7.1 主要儀器及生產(chǎn)商
            2.7.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.7.3 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.8 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果
        3.1 Eya2在前列腺癌組織中高表達(dá)
        3.2 Eya2在前列腺癌組織中的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系
        3.3 Eya2在前列腺癌細(xì)胞中高表達(dá)
        3.4 Eya2促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞增殖
        3.5 Eya2促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞侵襲
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分:Eya2調(diào)控前列腺癌細(xì)胞線粒體功能及多西紫杉醇化療敏感性
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.1.1 主要儀器及生產(chǎn)商
            2.1.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染與干擾
            2.2.1 主要儀器及生產(chǎn)商
            2.2.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.2.3 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.3 western blot
            2.3.1 主要儀器及生產(chǎn)商
            2.3.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.3.3 主要試劑配方
            2.3.4 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.4 CCK-8和集落形成實(shí)驗(yàn)
            2.4.1 儀器及生產(chǎn)商
            2.4.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.4.3 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.5 細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)
            2.5.1 儀器及生產(chǎn)商
            2.5.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.5.3 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.6 線粒體膜電位JC-1實(shí)驗(yàn)
            2.6.1 儀器及生產(chǎn)商
            2.6.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.6.3 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.7 統(tǒng)計(jì)方法
    3 結(jié)果
        3.1 Eya2降低前列腺癌細(xì)胞對(duì)多西紫杉醇的化療敏感性
        3.2 Eya2抑制多西紫杉醇誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡
        3.3 Eya2抑制凋亡相關(guān)蛋白的降解
        3.4 Eya2促進(jìn)線粒體膜電位上升
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分:Eya2 通過AKT/Bcl-2 通路調(diào)節(jié)前列腺癌細(xì)胞生物學(xué)功能
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.1.1 主要儀器及生產(chǎn)商
            2.1.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染與干擾
            2.2.1 主要儀器及生產(chǎn)商
            2.2.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.2.3 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.3 western blot
            2.3.1 主要儀器及生產(chǎn)商
            2.3.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.3.3 主要試劑配方
            2.3.4 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
            2.4.1 主要儀器及生產(chǎn)商
            2.4.2 主要試劑及生產(chǎn)商
            2.4.3 主要實(shí)驗(yàn)步驟
        2.5 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果
        3.1 Eya2 促進(jìn)AKT磷酸化并上調(diào)Bcl-2 以及MMP7 表達(dá)
        3.2 前列腺癌中Eya2與Bcl-2及MMP7 表達(dá)顯著相關(guān)
        3.3 Eya2 激活前列腺癌細(xì)胞中AKT/Bcl-2 信號(hào)通路
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]前列腺癌骨轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)因素[J]. 陳業(yè)輝,聶品,江文,趙仕佳,仉智,林華欣,李淼沅,劉燕青,李鵬麾,朱旭生.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(02)
[2]PI3K-Akt信號(hào)通路與腫瘤細(xì)胞凋亡關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 黃秀蘭,崔國(guó)輝,周克元.  癌癥. 2008(03)



本文編號(hào)：3677494