為了探討LncRNA AL022324.3在肝癌發(fā)展中的作用,我們進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)研究。首先,我們進(jìn)行了實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn),用來測(cè)量轉(zhuǎn)染后的目的基因的沉默效率。結(jié)果表明,在轉(zhuǎn)染后48小時(shí)目的基因沉默效率最高,沉默效率達(dá)到75%。接下來我們進(jìn)行了MTT實(shí)驗(yàn)研究沉默目的基因?qū)Ω伟┘?xì)胞增殖的影響,結(jié)果證明,沉默AL022324.3基因后,細(xì)胞的OD值與基因未沉默組相比明顯降低,表明細(xì)胞增殖能力明顯受到抑制,尤其是轉(zhuǎn)染后第4天,細(xì)胞增殖抑制效果最為明顯。總的OD值降低了25%以上。為了研究目的基因?qū)δ[瘤細(xì)胞劃痕愈合能力的影響程度,我們進(jìn)行了細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明沉默AL022324.3基因的細(xì)胞劃痕愈合距離明顯短于基因非沉默組。接下來為了研究目的基因?qū)?xì)胞遷移與侵襲能力的影響,在沉默AL022324.3基因后,觀察到細(xì)胞遷移與侵襲能力均受到一定程度的抑制。裸鼠同種異體肝癌移植瘤形成實(shí)驗(yàn)表明,沉默AL022324.3基因后,與目的基因非沉默組相比,裸鼠體內(nèi)移植瘤的增殖受到一定程度的抑制。我們從裸鼠移植瘤組織與HepG2、MHCC-97H肝癌細(xì)胞中提取RNA,并進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明... 

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
背景
Abstract
Background
實(shí)驗(yàn)一 沉默LncAL022324.3對(duì)肝癌細(xì)胞增殖的影響情況
    1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>    2.主要試劑和配置方法
    3.細(xì)胞培養(yǎng)
    4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    5.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)二 沉默LncAL022324.3對(duì)肝癌細(xì)胞遷移及侵襲的影響情況
    1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>    2.主要試劑與材料
    3.實(shí)驗(yàn)方法
    4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    5.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)三 沉默LncAL022324.3對(duì)裸鼠肝癌移植瘤體積變化的影響情況
    1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>    2.細(xì)胞培養(yǎng)
    3.實(shí)驗(yàn)方法
    4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    5.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)四 沉默LncAL022324.3對(duì)EMT相關(guān)基因及蛋白表達(dá)影響情況
    1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>    2.主要試劑和配置方法
    3.蛋白提取
    4.蛋白變性
    5.蛋白電泳
    6.轉(zhuǎn)膜
    7.膜封閉與抗體孵育
    8.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    9.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
References
綜述
    References
附錄
    主要儀器設(shè)備
    主要英文縮略表
致謝



本文編號(hào)：3670401