目的:鐵死亡（Ferroptosis）是一種新的調(diào)節(jié)性細胞死亡形式,是鐵離子依賴的脂質(zhì)過氧化物（Lipid reactive oxygen species,lipid ROS）累積到致死水平所導致的細胞死亡。鐵死亡不能被凋亡抑制劑如壞死穩(wěn)定素（Necrostatin-1）或自噬抑制劑如氯喹（Chloroquine）抑制,但是可被鐵離子螯合劑如去鐵胺（Deferoxamine）或者合成的抗氧化劑如ferrostatin-1抑制。鐵死亡主要涉及鐵離子代謝、脂質(zhì)過氧化以及system Xc--GSH-GPX4軸。細胞內(nèi)鐵離子穩(wěn)態(tài)與細胞對鐵離子的吸收、排出和存儲有關(guān)。細胞內(nèi)鐵離子調(diào)節(jié)蛋白的失調(diào)會導致細胞內(nèi)Fe2+過量的積累并通過Fenton反應(yīng)促進lipid ROS產(chǎn)生。System Xc-是一種廣泛存在于磷脂雙層膜中的氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白,溶質(zhì)載體家族7成員11（Solute carrier family 7 member 11,SLC7A11）編碼的輕鏈是system Xc-特有的亞基,且SLC7A11的表達水平通常與system Xc-的活性呈正相關(guān)。細胞通過system Xc-攝取細胞外胱氨... 

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分:GDF15對Erastin誘導的胃癌細胞鐵死亡的影響
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 細胞系
        2.2 實驗動物
        2.3 主要實驗材料和儀器
            2.3.1 相關(guān)分子生物學實驗材料
            2.3.2 主要儀器
        2.4 生物信息學網(wǎng)址和計算機分析軟件
        2.5 實驗方法
            2.5.1 細胞培養(yǎng)
            2.5.2 細胞轉(zhuǎn)染
            2.5.3 細胞總RNA的提取
            2.5.4 c DNA合成和實時定量PCR
            2.5.5 Western blotting
            2.5.6 Erastin、sorafenib和ferrostatin-1 儲存液及工作液配制
            2.5.7 CCK-8 檢測細胞活性
            2.5.8 細胞狀態(tài)觀察
            2.5.9 動物實驗
            2.5.10 統(tǒng)計學數(shù)據(jù)分析
    3 結(jié)果
        3.1 Erastin誘導胃癌細胞鐵死亡
        3.2 敲低GDF15促進erastin誘導的胃癌細胞鐵死亡
        3.3 敲低GDF15促進erastin在裸鼠體內(nèi)的抗腫瘤活性
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分:GDF15對Erastin誘導的胃癌細胞中SLC7A11表達和功能的影響及其機制初步研究
    6 前言
    7 材料和方法
        7.1 細胞系
        7.2 主要實驗材料和儀器
            7.2.1 相關(guān)分子生物學實驗材料
            7.2.2 主要儀器
        7.3 生物信息學網(wǎng)址和計算機分析軟件
        7.4 實驗方法
            7.4.1 細胞培養(yǎng)
            7.4.2 細胞轉(zhuǎn)染
            7.4.3 細胞總RNA的提取
            7.4.4 c DNA合成和實時定量PCR
            7.4.5 Western blotting
            7.4.6 免疫共沉淀
            7.4.7 谷氨酸釋放檢測實驗
            7.4.8 谷胱甘肽檢測實驗
            7.4.9 脂類過氧化物檢測實驗
            7.4.10 統(tǒng)計學數(shù)據(jù)分析
    8 結(jié)果
        8.1 敲低GDF15對胃癌細胞中鐵死亡相關(guān)基因表達的影響
        8.2 GDF15介導erastin對胃癌細胞MGC803中SLC7A11表達的影響
        8.3 GDF15對胃癌細胞中system Xc-功能的影響
        8.4 GDF15介導erastin對胃癌細胞MGC803中system Xc-功能的影響
        8.5 GDF15對胃癌細胞MGC803中SLC7A11表達調(diào)節(jié)的初步機制
    9 討論
    10 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡介



本文編號：3650087