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抗α2δ1/CD3雙特異性抗體的制備和功能的研究

發(fā)布時間:2022-02-23 05:02
  目的:雙特異性抗體近年來成為腫瘤治療的新方法,其可通過介導T細胞靶向殺傷腫瘤細胞。肝癌的復發(fā)和轉(zhuǎn)移通常與腫瘤起始細胞有關,本實驗室之前發(fā)現(xiàn)α2δ1(isoform 5)是肝癌的一個腫瘤起始細胞標志物,靶向該抗原的1B50-1可以通過消除腫瘤起始細胞從而減緩肝癌的生長。本研究旨在構(gòu)建抗α2δ1和CD3的雙特異性抗體,并在體內(nèi)外評價其殺傷肝癌干細胞的功能。方法:通過基因工程技術(shù),構(gòu)建穩(wěn)定表達T細胞銜接子(bispecific T-cell engager,Bi TE)和雙可變域免疫球蛋白(dual-variable-domain immunoglobulin,DVD-Ig)形式的抗α2δ1和CD3的雙特異性抗體的真核表達質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染Expi 293F細胞后,1B50-1-g OKT3-7 Bi TE和1B50-1-V9 Bi TE選取轉(zhuǎn)染4天后的細胞上清使用鎳離子親和色譜純化,1B50-1-g OKT3-7 DVD-Ig G1選取轉(zhuǎn)染6天后的細胞上清使用Protein G親和色譜純化。在得到純化的抗α2δ1和CD3的雙特異性抗體后,將純化的抗體通過SDS-PAGE蛋白電泳和考馬斯亮藍染色鑒定... 

【文章來源】:重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】:93 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
英漢縮略詞名詞對照
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 材料與方法
第二章 實驗結(jié)果
第三章 討論
參考文獻
雙特異性抗體的研究進展
    參考文獻
致謝
研究生期間發(fā)表的論文


【參考文獻】:
期刊論文
[1]Colon cancer and the epidermal growth factor receptor:Current treatment paradigms,the importance of diet,and the role of chemoprevention[J]. Baldeep Pabla,Marc Bissonnette,Vani J Konda.  World Journal of Clinical Oncology. 2015(05)
[2]Epidermal growth factor receptor inhibitors in colorectal cancer treatment: What’s new?[J]. M Ponz-Sarvisé,J Rodríguez,A Viudez,A Chopitea,A Calvo,J García-Foncillas,I Gil-Bazo.  World Journal of Gastroenterology. 2007(44)



本文編號:3640925

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