目的:甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）是發(fā)病率上升最快的實體惡性腫瘤,近十年的發(fā)病率以每年5%的速度增長。盡管隨著多學(xué)科協(xié)作診治模式理念的不斷發(fā)展,大部分PTC的預(yù)后比較好,10年生存率約>90%,然而,對于ⅣB及ⅣC期的PTC患者常出現(xiàn)傳統(tǒng)治療方法難以控制的局部侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,有些失去手術(shù)治療的機會且對放射性碘治療不敏感者,預(yù)后較差。因此,尋找治療相關(guān)的新靶點,對難治性PTC的治療具有非常重要的理論和現(xiàn)實意義。中美指南均提及阿霉素（Adriamycin,ADM）可以用于治療ⅣB及ⅣC期的PTC患者。ADM可通過多種途徑發(fā)揮抗腫瘤作用,包括抑制DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II、增加細(xì)胞內(nèi)活性氧、激活p53、提高的cyclin G2表達(dá)、抑制熱休克蛋白等調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、侵襲。但在ADM的臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)其副作用較多且伴隨劑量依賴性,包括:（1）骨髓抑制,出現(xiàn)嚴(yán)重的感染和出血。（2）心臟毒性,可出現(xiàn)嚴(yán)重的心力衰竭。（3）惡心、嘔吐、脫發(fā)等。大劑量、高頻率的化學(xué)治療所產(chǎn)生的副作用嚴(yán)重?fù)p害患者的身心。因此,如何通過降低ADM的毒副作用而不降低其... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 ：甲狀腺乳頭狀癌血清1,25(OH)2D3水平及磷酸化組織信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子3與維生素D受體表達(dá)情況的研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 材料
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
            2.1.3 研究對象
        2.2 方法
            2.2.1 ELISA法檢測外周血血清1,25(OH)2D3濃度
            2.2.2 IHC步驟
        2.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 PTC與對照組血清1,25(OH)2D3濃度比較
        3.2 p-STAT3與VDR在PTC中的表達(dá)情況
        3.3 p-STAT3在PTC與癌旁組織中的表達(dá)比較
        3.4 PTC組織中p-STAT3與VDR細(xì)胞核表達(dá)相關(guān)性分析
        3.5 血清1,25(OH)2D3水平與PTC臨床病理資料的關(guān)系
        3.6 p-STAT3表達(dá)與PTC臨床病理資料的關(guān)系
    4 討論
    5 小結(jié)
第二部分 ：1,25(OH)2D3促進阿霉素誘導(dǎo)甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞凋亡的實驗研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 材料
            2.1.1 細(xì)胞系
            2.1.2 主要藥物及試劑
            2.1.3 實驗用引物序列
            2.1.4 主要儀器設(shè)備
            2.1.5 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.1.6 慢病毒感染PTC細(xì)胞
        2.2 方法
            2.2.1 CCK-8法檢測PTC細(xì)胞增殖能力
            2.2.2 流式細(xì)胞儀檢測PTC細(xì)胞凋亡
            2.2.3 PTC細(xì)胞總蛋白的提取
            2.2.4 蛋白濃度的測定
            2.2.5 配膠及加樣
            2.2.6 電泳
            2.2.7 轉(zhuǎn)膜
            2.2.8 切膠
            2.2.9 抗體孵育
            2.2.10 ECL發(fā)光
            2.2.11 PTC細(xì)胞RNA的提取
            2.2.12 測量RNA的濃度
            2.2.13 反轉(zhuǎn)錄
            2.2.14 Real time PCR
        2.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 ADM對PTC細(xì)胞的抑制作用存在濃度依賴性
        3.2 1 ,25(OH)2D3明顯增加ADM對PTC細(xì)胞的抑制作用
        3.3 1 ,25(OH)2D3明顯增加ADM對PTC細(xì)胞的凋亡作用
        3.4 1 ,25(OH)2D3明顯增加ADM誘導(dǎo)PTC細(xì)胞cleaved caspase-3的表達(dá)
        3.5 1 ,25(OH)2D3及ADM對PTC細(xì)胞p-STAT3表達(dá)的影響
        3.6 ADM對PTC細(xì)胞內(nèi)凋亡抑制蛋白表達(dá)情況
        3.7 慢病毒過表達(dá)p-STAT3后PTC細(xì)胞活力及凋亡情況
    4 討論
    5 小結(jié)
第三部分 ：1,25(OH)2D3誘導(dǎo)甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞非受體型酪氨酸磷酸酶2表達(dá)的機制研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 材料
            2.1.1 細(xì)胞系
            2.1.2 主要藥物及試劑
            2.1.3 實驗用引物序列
            2.1.4 實驗用到的小干擾RNA序列
            2.1.5 主要儀器設(shè)備
            2.1.6 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 方法
            2.2.1 PTC細(xì)胞總蛋白的提取
            2.2.2 PTC細(xì)胞核蛋白及漿蛋白的提取
            2.2.3 蛋白濃度的測定
            2.2.4 配膠及加樣
            2.2.5 電泳
            2.2.6 轉(zhuǎn)膜
            2.2.8 抗體孵育
            2.2.9 ECL發(fā)光
            2.2.10 PTC細(xì)胞RNA的提取
            2.2.11 測量RNA的濃度
            2.2.13 反轉(zhuǎn)錄
            2.2.14 Real time PCR
        2.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 1 ,25(OH)2D3對PTC細(xì)胞內(nèi)p-STAT3負(fù)性調(diào)節(jié)因子表達(dá)的情況
        3.2 siRNA干擾PTPN2后1,25(OH)2D3對PTC細(xì)胞p-STAT3表達(dá)的影響
        3.3 siRNA干擾PTPN2后PTC細(xì)胞內(nèi)p-STAT3表達(dá)變化情況
        3.4 1 ,25(OH)2D3促進VDR細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)增加
        3.5 siRNA干擾VDR后VDR的表達(dá)情況
        3.6 siRNA干擾VDR后1,25(OH)2D3對PTC細(xì)胞PTPN2、p-STAT3的表達(dá)
    4 討論
    5 小結(jié)
結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]2012年中國惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J]. 陳萬青,鄭榮壽,張思維,曾紅梅,左婷婷,賈漫漫,夏昌發(fā),鄒小農(nóng),赫捷.  中國腫瘤. 2016(01)



本文編號：3634806