基于冷凍腫瘤組織切片的磷酸化HER2免疫組織化學(xué)染色方法探討
發(fā)布時(shí)間:2022-02-13 19:12
目的探索針對(duì)磷酸化人類表皮生長(zhǎng)因子受體2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)中冷凍組織切片的最佳固定與保存條件。方法在BALB/c-nu/nu小鼠中建立人源性乳腺癌細(xì)胞BT474的皮下移植瘤模型,對(duì)比不同的抗原固定條件和存儲(chǔ)時(shí)間下,免疫組織化學(xué)染色觀察腫瘤模型中磷酸化HER2的信號(hào)變化。結(jié)果冰凍切片用體積分?jǐn)?shù)為10%的甲醛溶液固定5 min,可以維持良好的細(xì)胞形態(tài)。在-20℃的存儲(chǔ)條件下,腫瘤組織中磷酸化HER2蛋白在12周內(nèi)表達(dá)穩(wěn)定。結(jié)論冰凍組織切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色用時(shí)短,可以作為常規(guī)石蠟切片染色方法的補(bǔ)充或者替代。
【文章來(lái)源】:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué). 2020,40(05)
【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)
【部分圖文】:
未染色的冷凍組織切片經(jīng)過(guò)不同時(shí)間保存后p-HER2免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果(DAB顯色)
BT474移植瘤組織在冷凍制片后5~20 min進(jìn)行甲醛溶液固定,組織黏附性好,染色過(guò)程中不易掉片,光學(xué)顯微鏡下顯示組織結(jié)構(gòu)與細(xì)胞形態(tài)清晰,p-HER2染色信號(hào)穩(wěn)定無(wú)差異(圖1C~E)。冷凍制片30 min后再行甲醛溶液固定的切片中,p-HER2染色信號(hào)開(kāi)始下降。冷凍組織制片后立即進(jìn)行甲醛溶液固定的切片在光學(xué)顯微鏡下顯示組織黏附性較差,在染色沖洗過(guò)程中容易掉片,細(xì)胞結(jié)構(gòu)不夠清晰,p-HER2免疫組織化學(xué)信號(hào)彌散(圖1 F)。2.3 BT474腫瘤組織固定后抗原的穩(wěn)定性
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]無(wú)醛固定液與甲醛固定液對(duì)組織形態(tài)學(xué)保存效果比較[J]. 吳平,張聲. 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2015(03)
本文編號(hào):3623760
【文章來(lái)源】:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué). 2020,40(05)
【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)
【部分圖文】:
未染色的冷凍組織切片經(jīng)過(guò)不同時(shí)間保存后p-HER2免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果(DAB顯色)
BT474移植瘤組織在冷凍制片后5~20 min進(jìn)行甲醛溶液固定,組織黏附性好,染色過(guò)程中不易掉片,光學(xué)顯微鏡下顯示組織結(jié)構(gòu)與細(xì)胞形態(tài)清晰,p-HER2染色信號(hào)穩(wěn)定無(wú)差異(圖1C~E)。冷凍制片30 min后再行甲醛溶液固定的切片中,p-HER2染色信號(hào)開(kāi)始下降。冷凍組織制片后立即進(jìn)行甲醛溶液固定的切片在光學(xué)顯微鏡下顯示組織黏附性較差,在染色沖洗過(guò)程中容易掉片,細(xì)胞結(jié)構(gòu)不夠清晰,p-HER2免疫組織化學(xué)信號(hào)彌散(圖1 F)。2.3 BT474腫瘤組織固定后抗原的穩(wěn)定性
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]無(wú)醛固定液與甲醛固定液對(duì)組織形態(tài)學(xué)保存效果比較[J]. 吳平,張聲. 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2015(03)
本文編號(hào):3623760
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