目的:1.檢測肝癌組織中UBE2L3的表達水平。2.探討UBE2L3在肝癌細胞增殖與凋亡過程中發(fā)揮的作用。3.闡明UBE2L3影響肝癌細胞增殖與凋亡的分子機制。4.裸鼠原位移植瘤模型檢測UBE2L3在體內(nèi)的作用。方法:1.NCBI GEO數(shù)據(jù)庫（GSE14520;GSE25097）分析UBE2L3在肝癌病人癌組織及癌旁組織中的表達。TCGA數(shù)據(jù)庫分析UBE2L3的表達高低對病人總生存期和無病生存期的影響。RT-q PCR檢測UBE2L3在66例肝癌病人癌組織及癌旁組織中mRNA的表達水平。Western blot檢測UBE2L3在66例肝癌病人癌組織及癌旁組織中的蛋白表達水平。2.在肝癌細胞中基因敲減/敲除UBE2L3的表達,并利用臺盼藍排斥實驗檢測肝癌細胞的增殖;平板集落實驗檢測肝癌細胞的集落形成能力;軟瓊脂克隆形成實驗檢測肝癌細胞的錨定非依賴生長能力。3.在肝癌細胞中基因敲減/敲除UBE2L3的表達,并利用流式細胞術(shù)檢測肝癌細胞的凋亡;Western blot檢測凋亡相關(guān)因子的表達。4.在肝癌細胞中敲除UBE2L3的表達,并構(gòu)建裸鼠異位移植瘤模型,檢測敲除UBE2L3對肝細胞癌生長... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：145 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

GEO數(shù)據(jù)庫分析UBE2L3在肝癌組織及癌旁組織中的mRNA表達水平

圖 1.2 TCGA 數(shù)據(jù)庫分析 UBE2L3 表達水平與肝癌病人生存期的關(guān)系。a) UBE2L3 表達水平與總生存期的關(guān)系。P=0.0008。b) UBE2L3 表達水平與無病生存期的關(guān)系。P=0.0026。Figure 1.2 Kaplan-Meier analysis of the correlation between UBE2L3 level and survival in theTCGA cohort. a) The correlation between UBE2L3 level and overall survival. P=0.0008. b) Thecorrelation between UBE2L3 level and disease free survival. P=0.0026.

3 在 66 例肝癌組織中表達水平的驗證R 檢測 UBE2L3 在肝癌病人中的 mRNA 表達水平期表達譜芯片的分析，以及對 GEO、TCGA 數(shù)據(jù)庫的 在肝細胞癌的癌組織中表達升高，高表達的 UBE2L3此，為了進一步驗證 UBE2L3 在肝細胞癌中的表達，，我們分別提取了 66 例肝癌病人的癌組織及癌旁組織RT-qPCR 檢測 UBE2L3 在肝癌組織及癌旁組織中的 mR Ct 值取平均值，計算后作為對照，再將所檢測的結(jié)果對定量值。統(tǒng)計分析結(jié)果顯示，UBE2L3 在肝癌組織于其癌旁組織（圖 1.3）。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3623122