發(fā)布時(shí)間：2022-02-13 11:39

　　目的:1.檢測(cè)肝癌組織中UBE2L3的表達(dá)水平。2.探討UBE2L3在肝癌細(xì)胞增殖與凋亡過(guò)程中發(fā)揮的作用。3.闡明UBE2L3影響肝癌細(xì)胞增殖與凋亡的分子機(jī)制。4.裸鼠原位移植瘤模型檢測(cè)UBE2L3在體內(nèi)的作用。方法:1.NCBI GEO數(shù)據(jù)庫(kù)（GSE14520;GSE25097）分析UBE2L3在肝癌病人癌組織及癌旁組織中的表達(dá)。TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)分析UBE2L3的表達(dá)高低對(duì)病人總生存期和無(wú)病生存期的影響。RT-q PCR檢測(cè)UBE2L3在66例肝癌病人癌組織及癌旁組織中mRNA的表達(dá)水平。Western blot檢測(cè)UBE2L3在66例肝癌病人癌組織及癌旁組織中的蛋白表達(dá)水平。2.在肝癌細(xì)胞中基因敲減/敲除UBE2L3的表達(dá),并利用臺(tái)盼藍(lán)排斥實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肝癌細(xì)胞的增殖;平板集落實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肝癌細(xì)胞的集落形成能力;軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肝癌細(xì)胞的錨定非依賴生長(zhǎng)能力。3.在肝癌細(xì)胞中基因敲減/敲除UBE2L3的表達(dá),并利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)肝癌細(xì)胞的凋亡;Western blot檢測(cè)凋亡相關(guān)因子的表達(dá)。4.在肝癌細(xì)胞中敲除UBE2L3的表達(dá),并構(gòu)建裸鼠異位移植瘤模型,檢測(cè)敲除UBE2L3對(duì)肝細(xì)胞癌生長(zhǎng)... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：145 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

GEO數(shù)據(jù)庫(kù)分析UBE2L3在肝癌組織及癌旁組織中的mRNA表達(dá)水平

圖 1.2 TCGA 數(shù)據(jù)庫(kù)分析 UBE2L3 表達(dá)水平與肝癌病人生存期的關(guān)系。a) UBE2L3 表達(dá)水平與總生存期的關(guān)系。P=0.0008。b) UBE2L3 表達(dá)水平與無(wú)病生存期的關(guān)系。P=0.0026。Figure 1.2 Kaplan-Meier analysis of the correlation between UBE2L3 level and survival in theTCGA cohort. a) The correlation between UBE2L3 level and overall survival. P=0.0008. b) Thecorrelation between UBE2L3 level and disease free survival. P=0.0026.

3 在 66 例肝癌組織中表達(dá)水平的驗(yàn)證R 檢測(cè) UBE2L3 在肝癌病人中的 mRNA 表達(dá)水平期表達(dá)譜芯片的分析，以及對(duì) GEO、TCGA 數(shù)據(jù)庫(kù)的 在肝細(xì)胞癌的癌組織中表達(dá)升高，高表達(dá)的 UBE2L3此，為了進(jìn)一步驗(yàn)證 UBE2L3 在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)，，我們分別提取了 66 例肝癌病人的癌組織及癌旁組織RT-qPCR 檢測(cè) UBE2L3 在肝癌組織及癌旁組織中的 mR Ct 值取平均值，計(jì)算后作為對(duì)照，再將所檢測(cè)的結(jié)果對(duì)定量值。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示，UBE2L3 在肝癌組織于其癌旁組織（圖 1.3）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3623122