目的:利用恩度（重組人內(nèi)皮抑素）誘導(dǎo)人結(jié)直腸癌血管正常化時(shí)間窗的產(chǎn)生,同時(shí)分析血漿血小板反應(yīng)蛋白1（thrombospondin 1,TSP-1）的濃度變化與時(shí)間窗的相關(guān)性并初步探討其機(jī)制,明確TSP-1是否可作為全新的生物標(biāo)志物監(jiān)測(cè)腫瘤血管正�；瘯r(shí)間窗。方法:利用人結(jié)直腸癌細(xì)胞SW620（5×10⁶個(gè)細(xì)胞/只）,于BALB/c雌性（nu/nu）小鼠（4周齡）右側(cè)腹股溝內(nèi)側(cè)皮下注射進(jìn)行造模,造模前隨機(jī)取6只裸鼠采集血漿并通過(guò)ELISA檢測(cè)TSP-1濃度作為基礎(chǔ)值。腫瘤體積達(dá)到75mm³時(shí)再次隨機(jī)取3只裸鼠采集血漿以動(dòng)態(tài)觀測(cè)TSP-1濃度。待腫瘤體積達(dá)到100mm³-150mm³時(shí)開始進(jìn)行藥物干預(yù)（實(shí)驗(yàn)記為第0天）,實(shí)驗(yàn)組為重組人內(nèi)皮抑素（5mg/kg）腹腔注射,對(duì)照組注射等量生理鹽水（NS）,首先連續(xù)給藥4天,之后每2天給藥一次至第12天,分別在第0、2、4、6、12天采集血漿和腫瘤組織及肝腎組織,通過(guò)免疫組化、免疫熒光、HE染色分析腫瘤血管正�；瘯r(shí)間窗的產(chǎn)生及腫瘤組織內(nèi)部含氧量變化的情況,通過(guò)肝腎... 

【文章來(lái)源】：暨南大學(xué)廣東省211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

鹽水組周細(xì)胞覆蓋程度變化

圖 2：實(shí)驗(yàn)組血管密度變化（恩度組）1.2 恩度提高腫瘤血管的周細(xì)胞覆蓋周細(xì)胞被覆于血管內(nèi)皮細(xì)胞之間，是構(gòu)成血管壁完整性的重要部分可由血管平滑肌蛋白（α-SMA）標(biāo)記，在腫瘤的異常血管當(dāng)中，周細(xì)胞的缺失尤為多見[26]。在對(duì)照組當(dāng)中，α-SMA 表達(dá)量在鹽水處理前后未見表達(dá)量的差異性變化；恩度處理組中可發(fā)現(xiàn)用藥后第 4、6 天，周細(xì)胞密度緩慢升高，其中第 6 天較第0 天比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p＜0.01），但是恩度處理后第 12 天周細(xì)胞密度轉(zhuǎn)而降低，提示腫瘤血管經(jīng)歷了正�；疆惓；霓D(zhuǎn)變（α-SMA 為圖像中綠染部分，標(biāo)尺：100um）。（見圖 3、圖 4）

圖 4：恩度組周細(xì)胞覆蓋程度變化1.3 恩度處理后可提高腫瘤血管成熟度完整的血管中，內(nèi)皮細(xì)胞及周細(xì)胞間具有一定的比例關(guān)系，研究指出，α-SMA 陽(yáng)性面積區(qū)與 CD31 陽(yáng)性面積區(qū)比例值常作為血管成熟度的一種指標(biāo)，若其比例值越接近，表明其血管更加成熟[27]。我們將以上第 0、4、6、12 天腫瘤組織切片中 CD31 及α-SMA 圖層進(jìn)行整合分析發(fā)現(xiàn)在對(duì)照組當(dāng)中，用鹽水處理前后血管成熟度未見有差異性變化，且其成熟度比值均較為低下；而在恩度處理組當(dāng)中，用藥處理后第 4 天及第 6 天血管成熟度較第 0 天及第 12 天升高明顯（P < 0.001），而第 0 天及第 12 天對(duì)比無(wú)顯著差異且血管成熟度低下明顯，提示第 4 天至第 6 天為血管正�；囊欢螘r(shí)間窗（見圖 5）。


本文編號(hào)：3617161